流式细胞术免疫分型基础流式细胞术免疫分型基础免疫分型组成免疫分型组成• 识别细胞识别细胞 • 诊断标准诊断标准干干/祖细胞：祖细胞：CD34，，CD38，，HLA-DR，，TdT髓系：髓系：CD33，，CD13，，CD15，，CD11b，，CD14，，CD64，， cMPO，，CD117, CD11c, CD36红系：红系：CD71，，glyA巨核系：巨核系：CD41，，CD61B 细胞：细胞：CD10，，CD19，，CD20，，CD22，，CD23，，k，λ，λ, cCD79a,cIgM, (CD5, CD11c, CD103, CD25, FMC7)T细胞：细胞：CD2，，CD3，，CD5，，CD7，，CD4/8，， cCD3, TCRNK细胞：细胞：CD16，，CD56，（，（CD3 - /CD56+）浆细胞：）浆细胞：CD138，，CD38, ck，，cλ λ系别相关标志系别相关标志原始细胞（原始细胞（Blast））形态学上的原始细胞包括：形态学上的原始细胞包括： • 干细胞干细胞 • 粒系：原粒粒系：原粒+早幼粒细胞（有颗粒原粒？）早幼粒细胞（有颗粒原粒？） • 单核系：原单单核系：原单+幼单幼单 • 淋巴系统：原淋巴系统：原+幼淋幼淋 • 原始巨核原始巨核髓系幼稚细胞髓系幼稚细胞• 幼稚细胞包括原粒、原单、原始巨核、幼单。
幼稚细胞包括原粒、原单、原始巨核、幼单 • 异常单核不能算幼稚单核，在鉴别急性粒单细 胞白血病、急性单核细胞白血病、慢性粒单细 胞白血病中有重要作用异常单核不能算幼稚单核，在鉴别急性粒单细 胞白血病、急性单核细胞白血病、慢性粒单细 胞白血病中有重要作用 • 小的异常增生巨核和微巨核不能算幼稚细胞小的异常增生巨核和微巨核不能算幼稚细胞 • 在在APL中，异常早幼粒也算幼稚细胞中，异常早幼粒也算幼稚细胞 • 原红一般不计在内，除非罕见的急性纯红细胞 白血病原红一般不计在内，除非罕见的急性纯红细胞 白血病髓系幼稚细胞免疫标志髓系幼稚细胞免疫标志• 原粒、原单：原粒、原单：CD34、、CD117、、HLA-DR、、CD13、、 CD33、、MPO+/- • 原始巨核原始巨核:CD61、、CD41a、、CD9、、CD36（不特异）（不特异） • 幼单：幼单：CD15dim、、HLA-DRstr、、CD64、、CD11c、、 CD4dim、、CD11b、、CD33str、、CD13、、CD14- • APL：：HLA-DR-、、CD34-、、CD117+、、CD9+、、 CD15-/+、、CD33str、、CD64+、、CD13dim淋系幼稚细胞淋系幼稚细胞• 幼稚细胞包括原始淋巴、幼稚淋巴。
幼稚细胞包括原始淋巴、幼稚淋巴 表型：表型： • 幼稚标志幼稚标志+泛泛B/T标志标志 • 幼稚标志：幼稚标志：CD34、、TdT、、B系（系（CD10））T系 （系 （CD1a、、CD99str) • 泛泛B：：CD19、、cCD79a、、CD22 • 泛泛T：胞浆：胞浆CD3、、CD7、、CD2、、CD5 • 不表达成熟标志：不表达成熟标志：B系胞膜轻链；系胞膜轻链；T系系CD4、、 CD8、、CD32008 WHO分类2008 WHO分类• 偏成熟髓系疾病偏成熟髓系疾病 –髓系增殖性肿瘤(MPN)（包括肥大细胞增多症）髓系增殖性肿瘤(MPN)（包括肥大细胞增多症） –伴有嗜酸细胞增多和PDGFRA、PDGFRB、FGFR1异常的 髓系和淋系肿瘤伴有嗜酸细胞增多和PDGFRA、PDGFRB、FGFR1异常的 髓系和淋系肿瘤 – MDS/MPNMDS/MPN – MDSMDS • 急性髓系白血病和急性未定系列白血病急性髓系白血病和急性未定系列白血病 • 前体淋巴肿瘤前体淋巴肿瘤 • 成熟淋巴增殖性疾病成熟淋巴增殖性疾病 – B细胞淋巴瘤B细胞淋巴瘤 – T或者NK细胞淋巴瘤T或者NK细胞淋巴瘤 – 何杰金氏淋巴瘤何杰金氏淋巴瘤 – 免疫缺陷病免疫缺陷病 • 组织细胞和树突细胞肿瘤组织细胞和树突细胞肿瘤MPN（髓系增殖性肿瘤）• BCR-ABL1阳性慢性髓系白血病（chronic myelogenous leukemia,CML)BCR-ABL1阳性慢性髓系白血病（chronic myelogenous leukemia,CML) • 慢性中性粒细胞白血病(CNL)慢性中性粒细胞白血病(CNL) • 真性红细胞增多症(PV)真性红细胞增多症(PV) • 原发性骨髓纤维化(PMF)原发性骨髓纤维化(PMF) • 特发性血小板增多症(ET)特发性血小板增多症(ET) • 慢性嗜酸性粒细胞白血病，NOS(CEL)慢性嗜酸性粒细胞白血病，NOS(CEL) • 肥大细胞增多症(mastocytosis)肥大细胞增多症(mastocytosis) • 髓系增殖性肿瘤，不能分类的(MPN.U)髓系增殖性肿瘤，不能分类的(MPN.U)CML加速期(Accelerated Phase,AP) • 出现下述之一考虑CML AP： PB中嗜碱性粒细胞超过20%；（嗜碱性粒细 胞识别：位置：CD45/SSC图，原粒的左上， 表达CD9、CD123、CD203c、CD22dim） PB或者BM中髓系幼稚细胞为10-19% 幼稚细胞克隆为非髓系。
出现下述之一考虑CML AP： PB中嗜碱性粒细胞超过20%；（嗜碱性粒细 胞识别：位置：CD45/SSC图，原粒的左上， 表达CD9、CD123、CD203c、CD22dim） PB或者BM中髓系幼稚细胞为10-19% 幼稚细胞克隆为非髓系CML急变期（Blast Phase, BP）CML急变期（Blast Phase, BP）• 表现为下述之一： ①PB中原始细胞占白细胞20%以上，BM中原 始细胞占有核细胞20%以上， ②原始细胞髓外增生 70%的病例BP是急髓变，包括中性粒、嗜酸 性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核系、巨核系 或者红系急变，或者上述组合，20-30%为淋 系急变表现为下述之一： ①PB中原始细胞占白细胞20%以上，BM中原 始细胞占有核细胞20%以上， ②原始细胞髓外增生 70%的病例BP是急髓变，包括中性粒、嗜酸 性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核系、巨核系 或者红系急变，或者上述组合，20-30%为淋 系急变MDS/MPN• CMML • aCML, BCR-ABL1- • JMML • MDS/MPN, UCMML诊断标准诊断标准1、持续性PB单核细胞增多>1X109/L（>20%) 2、无Ph染色体或者BCR/ABL1基因 3、无PDGFRA或者PDGFRB重排（尤其是伴嗜酸性粒细 胞增多的病例） 4、PB和BM中幼稚细胞=骨髓有核细胞的50%时的 可能诊断红系前体细胞>=骨髓有核细胞的50%时的 可能诊断MDS幼稚细胞20%≥≥50%诊断其它表现诊断其它表现PB/BM发现发现BM中红系前 体中红系前 体%注意：非红系的计算，红系前体、淋巴细胞、浆细胞都不计在内。
注意：非红系的计算，红系前体、淋巴细胞、浆细胞都不计在内AML，，NOS亚型：参照亚型：参照FAB界限不 清，出现 分化标志原粒以外，有分化阶段粒细 胞，界限不 清，出现 分化标志原粒以外，有分化阶段粒细 胞， POX,SBB,CE+原粒原粒25%BM、 PB髓外为 主前体前体B细胞白血病细胞白血病/淋巴瘤，淋巴瘤， NOS• B-ALL：以胞膜免疫球蛋白为界，不包括：以胞膜免疫球蛋白为界，不包括 Burkitt • 表型：表型：CD19+/cCD22+/cCD79a+，但是都 不特异，需要组合，但是都 不特异，需要组合+高强度表达高强度表达表1 B-ALL/LBL免疫表型分类表1 B-ALL/LBL免疫表型分类++++++++++cCD79a++++++++++CD22#++++++++++CD19++++---sIg++++++--cIgM++++++-CD20++++++++-CD10-++++CD34-++++++TdTMature B-ALL 现现Burkitt样白 血病样白 血病/淋巴瘤淋巴瘤Transitional pre-B-ALL* (无无EGIL编码编码)Pre B-ALL (EGIL B-III)Common B- ALL (EGIL B-II)Pro B-ALL (EGIL B-I)标志标志-：：75%病例阳性。
病例阳性 *：约：约5%的的Pre B-ALL为过渡型为过渡型pre B-ALL，定义为胞浆和胞膜，定义为胞浆和胞膜IgM，但是不 表达成熟κ、λ轻链 #：PE标记或者胞浆CD22但是不 表达成熟κ、λ轻链 #：PE标记或者胞浆CD22表2 T-ALL/LBL免疫表型分类表2 T-ALL/LBL免疫表型分类+单 阳单阳--+++髓质-双 阳双阳-++++皮质---+/--+++Pre---+/---++ProCD3CD8CD4CD34CD1aCD2CD7cCD3亚型+单 阳单阳--+++髓质-双 阳双阳-++++皮质---+/--+++Pre---+/---++ProCD3CD8CD4CD34CD1aCD2CD7cCD3亚型每种临床表现应该评价的细胞系每种临床表现应该评价的细胞系 （来自2006 Bethesda）（来自2006 Bethesda）T、M嗜酸性粒细胞增多B、T淋巴细胞增多、肝脾大M单核细胞增多M中性粒细胞增多B、T、M、P全血细胞减少B、T、M、P血小板减少B、T、M、P白细胞减少B、T、M、P贫血评价的细胞系临床表现T、M嗜酸性粒细胞增多B、T淋巴细胞增多、肝脾大M单核细胞增多M中性粒细胞增多B、T、M、P全血细胞减少B、T、M、P血小板减少B、T、M、P白细胞减少B、T、M、P贫血评价的细胞系临床表现注：B:B细胞系;M:髓系;P:浆细胞系;T:T细胞系注：B:B细胞系;M:髓系;P:浆细胞系;T:T细胞系最低检测抗体1最低检测抗体11、1、成熟髓系肿瘤/疾病：成熟髓系肿瘤/疾病： • 原始细胞标志：CD34、CD117原始细胞标志：CD34、CD117 • 髓系标志： CD11b、CD13、CD14、CD15、CD16、 CD64 2、成熟B系肿瘤：CD5、CD10、CD19、CD20、CD23、 kappa、lambda 3、成熟T/NK系肿瘤：CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、 CD8、CD56（如果CD4/CD8双阳，要求做CD1a） 4、浆细胞肿瘤/疾病：CD19、CD38、CD56、CD138、 胞浆kappa、胞浆lambda髓系标志： CD11b、CD13、CD14、CD15、CD16、 CD64 2、成熟B系肿瘤：CD5、CD10、CD19、CD20、CD23、 kappa、lambda 3、成熟T/NK系肿瘤：CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、 CD8、CD56（如果CD4/CD8双阳，要求做CD1a） 4、浆细胞肿瘤/疾病：CD19、CD38、CD56、CD138、 胞浆kappa、胞浆lambda最低检测抗体2最低检测抗体25、5、AML：AML： • 原始细胞标志：CD34、CD117、HLA-DR原始细胞标志：CD34、CD117、HLA-DR • 髓系标志： CD11b、CD13、CD14、CD33、CD64、 胞浆MPO髓系标志： CD11b、CD13、CD14、CD33、CD64、 胞浆MPO • 伴系表达标志：CD7、CD56、CD19 6、B-ALL：伴系表达标志：CD7、CD56、CD19 6、B-ALL： • 原始细胞标志：CD34原始细胞标志：CD34 • B系标志： CD10、CD20、CD19、胞浆CD79a（或者 CD22-PE/胞浆CD22） 7、T-ALL：B系标志： CD10、CD20、CD19、胞浆CD79a（或者 CD22-PE/胞浆CD22） 7、T-ALL： • 原始细胞标志：CD34、胞浆TdT原始细胞标志：CD34、胞浆。