临床基础检验学-血液常规检查

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1、临床基础检验学天津医科大学检验系 血液临检教研室卢金海绪论临床检验基础(clinical laboratory base)是借助于先进的检测技术,对来自机体 的血液、尿液、粪便及分泌物和排泄物等标 本进行理学、化学、病原学、和显微镜形态 学检查,为临床的诊断和治疗提供依据。是 检验医学的重要组成部分。一、临床检验基础的现状和特点1.检测手段的不断进步。2.床边检测的运用。3.试剂的配套化、专业化和多样化。4.检测方法的标准化。5.检验的全面质量管理和质量保证。二、临床基础检验学的基本任务1.为疾病诊断提供依据。(白血病、疟疾)2.为分析病情、观察疗效、判断预后提供信息。(贫血、肾病)3.为预防

2、疾病提供资料。(早期发现传染病 、肿瘤)4.为科研、普查疾病提供可靠数据。(遗传 病、药物筛选、肿瘤、优生优育)三、学好临床检验基础的要求1.理论联系实际。2.操作正规、熟练。3.培养职业道德、实事求是,一丝不苟的工作作风。第一章 血液标本采集和血涂片制备一、血液的组成血液(blood)是由血细胞和血浆组成的红色粘稠混 悬液。血细胞(红细胞、白细胞和血小板)。 血液 水分占91%92%血浆 固体成分占8%9%,(各种蛋白(抗体、酶、凝血因子等生物活性物质、无机盐、激素、维生素和代谢产物。)二、血液的理化性质1.量(amount)正常成人血量占体重的7%9%(60 80ml/kg体重)。成人平均

3、血量5L左右,其中血浆占 55%,血细胞占45%。2.酸碱度(acid-alkalinty)血液的pH值为7.35 7.453.比重(specific gravity,SG)全血 1.0501.060(取决于红细胞浓度)血浆 1.025-1.030(取决于血浆蛋白)红细胞 1.090(取决于血红蛋白)4.粘稠度(consistency)全血相对粘度为使水的45倍。血浆相对粘度为使水的1.62.4倍血清相对粘度为使水的1.5倍5. 渗透压(osmotic presure)血浆为290310 mOsm/kgH2O6.凝固性(coagulability) 血液离体后数分钟内即自行凝固。7.颜色(co

4、lour)含氧高鲜红色,含高铁血红蛋 白或其他衍生物时,呈暗红色、紫黑色。第一节 血液标本采集和抗凝剂 选择一、血液标本种类全血:由血细胞和血浆组成,主要用于临床血液 学检查,如血细胞计数、分类和形态学检查 .血浆:为全血除去血细胞的部分,适合临床生化 检查,内分泌激素测定、血栓与止血的检查。血清:是离体后的血液自然凝固后析出的液体部分,除纤维蛋白原等凝血因子,其他成分与血浆基本相同 。多用于临床化学和临床免疫学检查。 血清与血浆的主要 区别: 血浆含有纤维蛋白原 (fibrinogen) 而血清没有。二、血液标本采集 方法 1. 毛细血管采血法 (the collection of capi

5、llary blood) 2. 静脉采血法 (the collection of venous blood) 3. 动脉采血法 (the collection of arterial blood ) 1.毛细血管采血法l方法 手指或耳垂部消毒后用无菌针刺破皮肤,使血液自 然流出,吸取一定量进行检测 ;l用途 用于需血量很少或一 般常规检查;l评价 采血方便;容易溶血 凝血和可能混入组织液,易发生凝块。2.静脉采血法1) 普通静脉采血法(开放式)2) 真空负压静脉采血法(封闭式)1) 普通静脉采血法 开放式静脉采 血法 方法 将肘部静脉上端用压脉带系紧,使静脉充分暴露,局部消毒,用注射器刺入取血

6、; 用途 需血量较多或采用全自动血液分析仪测定时使用; 评价 采集的血量可任意控制,但操作环节多,在移液及丢弃注射器时可能造成环境污染。2)真空负压静脉采血 封闭式静脉采血 法方法 消毒与选择穿刺部位同普通法。采血器有套筒式和头皮静脉式二种,具有软橡皮套管式止血装置,穿刺回血后将另一端插入真空定量硅化的采血试管中,血液足量后,拔出试管即止血,再插另一真空定量管时又可采血。评价 操作规范,采血过程中血标本不与外界接触, 避免血源性交叉感染。用途 同普通静脉采血法。方法同静脉法,但采用的血管为动脉。动脉采血具有一定的风险。3.动脉采血法三、标本采集时的质量 控制 l标本采集时应规范操作,以减少误差

7、;l毛细血管采血时应避开伤损部位,避免挤压皮 肤,血液应自然流出;l静脉采血时压脉带压迫时间不宜太长;l动脉采血后应立即与空气隔绝,阻止血气交换 ; l容器要干净,干燥,避免强力振荡引起溶血;l血液标本采集后应立即送检;l抗凝的标本其比例要准确,必要时需修正;l尽量避免输液时采血,因可干扰测试结果。抗凝剂的选择和应 用一、抗凝剂作用原理和应用什么叫抗凝?抗凝剂又是什么?l抗凝 用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性,以阻止血液凝固,称为抗凝。 l抗凝剂 能够阻止血液凝固的物质,称 为抗凝剂或抗凝物质。 原理 枸椽酸盐能与血液中的钙离子结合形成螯合物,从而阻止血液凝固。2C6 H5

8、 O7 Na3 3Ca 2+ C12H10 Ca3O14 - 6Na+用途 一般用于红细胞沉降率和凝血功能测定。多用于临床血液学检查,输血保养液的成份之一。评价 毒性小,价廉。缺点在血中的溶解度低,抗凝力不强。用量 浓度为106124mmol/L,抗凝剂与血液的比例为1:9。1.枸椽酸盐(citrate) 即柠檬酸盐原理 溶解后解离的草酸根与标本中的钙离子形成草酸钙沉淀,使Ca+失去凝血功能。Na2 C2 O4 + Ca + CaC2 O4 +2 Na+用途 过去主要用于凝血象和血细胞比容测定,现在使用很少。评价 优点是溶解度好、价廉。缺点是对因子有影响,影响PT测定;钾/钠盐易使血细胞脱水皱

9、缩,而铵盐又可使血细胞膨胀。可选用按比例配制的双草酸(Na+/K+和NH4+)来克服以上缺点;标本中如加入高浓度的草酸盐抗凝剂,可引起溶血和改变血液pH,干扰K+、Na+、Cl-的测定。用量 一般浓度为0.1mol/L,1:9抗凝。2. 草酸盐(oxalate) 常用的有钠盐、钾盐和铵盐原理 加强AT灭活丝氨酸蛋白酶的作用,阻止凝血酶形成,并有阻止血小板聚集等多种作用。用途 是红细胞渗透脆性试验理想的抗凝剂。评价 肝素具有抗凝力强,不影响血细胞体积、不易溶血等优点。缺点是常可引起白细胞聚集,阻止血小板聚集,并使血涂片在瑞氏染色时产生蓝色背景,不适合血液学一般检查。用量 152.5IU肝素盐/m

10、l全血。3. 肝素(heparin) 生理性抗凝剂原理 EDTA能与血液中钙离子结合成螯合物,使Ca+ 失去凝血作用,从而阻止血液凝固。K2 C10 H14 O8 N2 Ca + CaC10 H12 O8 N2 2 K+ 2 H+ 用途 用于多项血液学检查,尤其是血小板计数。 EDTA钾盐特别适合于血细胞分析仪和血细胞比容测定 ,室温下6 h红细胞体积不变。 评价 EDTA盐对血细胞形态和血小板计数影响很小; EDTA影响血小板聚集,不适合做凝血象检查和血小板 功能检查。 用量 EDTA-K2-2H2O 1.52.2mg/ml血液。4.乙二胺四乙酸(ethylenediamine tetraa

11、cetic acid,EDTA)盐常用其钾盐与钠盐,钾盐溶解度明显高于钠盐。血液标本的保存与处理 一、血液标本的保存二、标本的处理及其原则一、血液标本的保存类类型室 温4-80血液常规检验规检验2d不宜不宜血凝检验检验5个月,WBC。通常在 (1217)109/L ,分娩时疼痛和产伤可更高,如无并发症产后2周左右恢复正常 。(1) 生理性变化 ()中性粒细胞病理性变化急性感染:化脓性球菌 严重的组织损伤或大量的血细胞破坏 急性大出血急性中毒肿瘤性增多骨髓增殖性疾病病理性增多某些感染某些血液病慢性理化损伤自身免疫性疾病脾功能亢进病理性减少()中性粒细胞病理性变化.嗜酸性粒细胞(eosinophi

12、l,) 光镜结构电镜结构(1)病理性增多 l过敏性疾病l寄生虫病l某些传染病及传染病恢复期l某些皮肤病l血液病l某些恶性肿瘤(2)病理性减少见于伤寒、副伤寒、手术后严重 组织损伤以及应用肾上腺皮质激 素或促肾上腺此质激素后。3.嗜碱性粒细胞( basophil,B) 光镜结构电镜结构(1)病理性增多 慢粒:嗜碱性粒细胞可10;骨髓增生性疾病:如真性红细胞增多症;其他:如淋巴细胞瘤,脾切除后和某些转 移癌。 4.淋巴细胞( Lymphocyte,L) 光镜结构电镜结构淋巴细胞(lymphocyte, L) 成人淋巴细胞约占白细胞的14,为 人体主要免疫活性细胞,起源于多能干细胞 。 在骨髓、脾、

13、淋巴结和其他淋巴组织生 发中心发育成熟者称为B淋巴细胞占淋巴细 胞的20%30% 。在胸腺、脾、淋巴结和其他组织,依赖 胸腺素发育成熟者称为T淋巴细胞。占淋巴 细胞的60%70% 。B细胞寿命较短,一般仅35d,经抗 原激活后分化为浆细胞,产生特异性抗体, 参与体液免疫T细胞寿命较长,可达数月, 甚至数年;T细胞寿命较长,可达数月,甚至数年 ,被抗原致敏后,可产生多种免疫活性物质 ,参与细胞免疫。 还有少数NK细胞(杀伤细胞)、N细胞( 裸细胞)、D细胞(双标志细胞)淋巴细胞亚群 。 淋巴细胞增多(lymphocytosis):指外 周血淋巴细胞绝对值:成人4109/L儿童7.2109/L4岁

14、以下的儿童9109/L。某些传染病:如风疹、百日咳等。 某些传染病恢复期和肾移植术后发生排 斥反应时; 急慢性淋巴细胞性白血病; 某些慢性感染:如结核病(WBC总数正常) 。(1)病理性增多 (2)病理性减少 多见于传染病急性期,长期接触放射线,细胞免疫缺陷等。各种引起N的原因均可导致L相对减少。5.单核细胞( Monocyte,M ) 光镜结构电镜结构(1)病理性增多 某些感染:如结核,伤寒,亚急性感染性心内 膜炎或某些感染的恢复期;某些寄生虫病:如疟疾,黑热病等;某些血液病:单核细胞性白血病,恶 性组织细胞病及骨髓增生异常综合征 等。白细胞计数与分类的临床应用1.诊断:白细胞形态的检查必须

15、结合临床其他常用检查、特殊检查等综合进行分析,才能 迅速、有效、准确地对疾病作出诊断。 2.鉴别诊断:当血液分析仪检查显示细胞计数异常或白细胞分类计数异常时,作血细胞形 态检查对于鉴别某些疾病有重要意义。 3.治疗监测与预后(1)急性白血病 (2)急性感染病例分析1,女,20岁,农民,未婚。因咽痛 、高热8天入院。当地医院查WBC 0.58109/L ,经抗感染 治疗,上述症状无好转。并出现咳嗽,咳黄 脓痰,右上腹疼痛,尿频,尿急而收入院。一个多月前在当地诊为“甲亢”,服用 他巴唑至今。 体征:体温39.6 ,急性重病容,口腔充 血、水肿、溃疡,表面有脓性分泌物,双侧扁 桃 度肿大,双肺散在干湿性啰音。实验室检查:RBC 3.96 1012 / L ,Hb 107g/ L ,WBC 1.0 109/L ,分类N 0.40, L 0.60, Plt 96 109/L,骨髓象粒系减少占 3.5% 。咽拭子培养、尿培养阳性。思考题:1.本例可作为诊断的线索是什么?2.本例的诊断是什么?诊断依据是什么?病例分析2l病例:患者,女性,34岁,已婚。因面色苍白、头 晕、乏力1年余,近2个月病情加重伴心悸来就诊。l主诉:近1年前无明显诱因出现面色苍白、头晕、 乏力,近2个月病情加重伴心悸曾到本院门诊部检查 ,并给予铁剂口服治疗1周。患者进食正常,无挑食

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