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1、细 菌 的 分离 与 鉴定脓汁中球菌的分离与鉴定粪便中杆菌的分离与鉴定病原菌的检验程序 直接涂片镜检 分离培养 生化试验 血清学试验 动物试验 药物敏感试验脓汁中球菌的分离与鉴定（一）分离 常见球菌的生物学性状 溶血现象的观察葡萄球菌 生物学性状：G+球形或略呈椭圆形，典型的葡萄球菌排列呈葡萄串状。在脓汁和液体培养基中生长者，常为双球或短链状。 营养要求不高，在普 通培养基上生长良好 ，最适生长温度为37 度，最适pH为7.4。 菌落特点：圆形，隆 起，表面光滑湿 润， 边缘整齐，不透明， 直径约12mm。（ 以金葡为例，注意溶 血环）菌落颜颜色溶血现现象致病性金黄色葡 萄球菌多为为金黄,可
2、有白或柠柠檬溶血(溶 血素)强,为为致病 菌表皮葡萄 球菌白色_弱,为为条件 致病菌腐生葡萄 球菌白色或柠柠檬 色_不致病链球菌生物学性状： G+ 球形或椭圆形，成链状排 列。 营养要求高，普通培养基 上生长不良，需补充血液 血清葡萄糖。 最适宜生长温度37度，最 适宜pH为7.47.6。 菌落特点：菌落呈圆形，隆起，灰 白色，细小，表面光滑，边缘整齐 ，直径 0.50.75mm。溶血现象溶血环的 特点致病性甲型溶血 性链球菌溶血1-2mm,草 绿色条件致病乙型溶血 性链球菌溶血2-4mm，完 全透明致病强丙型链球 菌无无无甲 链乙 链丙 链肺炎双球菌生物学性状：G+双球菌,菌体呈矛头状 ,宽
3、端 相对,尖端向外.有荚膜. 营养要求高,在含有血液或血 清的培养基中才能生长最适温度为37度,最适pH为 7.4-7.8.在 血琼脂平板上,菌落呈圆形稍扁,灰白色,细小,半透明,直径0.5-1.5mm.溶血环,与甲型溶血性链球菌相似,孵育时间48h,菌落中央呈脐状下陷.脑膜炎双球菌生物学性状: G- 肾形或豆形双球菌,两菌接触 面平坦或稍向内陷.营养要求高,需在含有血清, 血液的培养基中才能生长.最适温度37度,最适pH7.4- 7.6,在巧克力培养基上生 长良好.专性需氧. 菌落:圆形,凸起,无色, 光滑,透明,露滴状.(三）致病性肠道杆菌 大肠杆菌: 生物学性状: G- 镜下为杆状 营养
4、要求不高,可在普 通琼脂培养基上生长 最适宜温度为37度,最 适宜pH为7.4 菌落特点: 圆形,凸起,灰白色,表面光滑,湿润,直径2- 3mm. 分类: 肠产毒性大肠杆菌 肠侵袭性大肠杆菌 肠致病性大肠杆菌 肠出血性大肠杆菌 肠集聚性大肠杆菌伤寒杆菌 生物学特性: G- 镜下为杆状 营养要求不高,可在普 通琼脂培养基上生长 最适宜温度为37度,最 适宜pH为7.4 菌落特点: 圆形,无色,半透明,中等大小(四)常见培养基的特性血琼脂平板 在普通琼脂培养基的 基础上加入血液制备 而成,是最常用的营养 培养基,可供营养要求 较高的细菌生长. 常用于分离培养和溶 血现象观察.SS培养基 含有胆酸盐
5、抑制G+, 枸橼酸钠和煌绿能部 分抑制大肠杆菌,致病 的沙门菌和志贺菌能 大量生长. 含有中性红指示剂和 乳糖,中性红遇酸变粉 红. 常用于培养肠道致病 菌.双糖铁培养基含有乳糖和葡萄糖: 产酸产气含有硫酸亚铁: 如细菌分解含硫氨基酸生成 硫化氢,可形成黑色沉淀酚红指示剂: 酸: 黄 碱: 红 1)大肠杆菌发酵乳糖和葡萄糖产酸产气（糖发酵 试验）,是斜面及底层均呈黄色并有气泡. 2) 沙门菌和志贺菌只发酵葡萄糖,不发酵乳糖,分 解葡萄糖产的酸使培养基pH下降,酚红指示剂变 黄,但是培养基中的葡萄糖仅有0.1%,在斜面的 酸性物质被氧化成挥发性酸,且细菌氧化氨基酸 物质产生的氨的中和作用,是斜面变红,而底层则 为黄色.双糖铁培养基的用途 用于观察细菌是否产生硫化氢及对糖的发 酵能力.方 法 1) 将脓汁标本接种在血琼脂平板,放入37 度温箱中培养24小时. 2)将粪便标本接种到SS培养基,放入37度 温箱中培养24小时.结 果 培养24小时后,可见两个平板上均出现单个 菌落. 放入冰箱保存,下节课实验内容细菌的鉴定 要用.
