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1、G B / T 5 4 1 3 - 1 7 -1 9 9 7前言木标准给出两种方法， 方法一是微生物法. 为等效采用美国公职分析化学师协会( AO A C ) 的方法， 虽然操作步骤萦杂， 但测定结果准确度高. 方法二是高压液相色谱法， 是经实验确定的一种快速、 准确的方法 。木标准方法一为仲裁法。木系A标准从实施之日 起， 代替G B 5 4 1 3 -8 5 .木标准由中国轻工总会提出。木标准由全国乳品标准化中心归口。木标准负责起草单位: 国家乳制品质量监督检验中心。木标准参加起草单位: 卫生部食品卫生监督检验所、 浙江省轻工业研究所、 哈尔滨森永乳品有限公 司、 雀粱( 中国) 投资服务
2、有限公司。木标准 主 要起 草人 : 张 玉杰 、 工 芸、 殷晓 红、 杨 金宝 、 吕为群 。中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准婴 幼 儿 配 方 食 品 和 乳 粉G B / T 5 4 1 3 . 1 7 -1 9 9 7泛 酸 的 测 定代 替 G B 5 4 1 3 - 8 5Mi l k p o v Me r a n d f o r m u l a f o o d s f o r i n f a n t a n d y o u n g c h il d r e nD e te r min a t io n o f p a n t o t h e n ic a c id范
3、围木标准规定了用微生物法和高压液相色谱法测定泛酸的方法。 木标准方法一适用于婴幼儿配方食品和乳粉中泛酸的测定， 方法二适用于乳粉中泛酸的测定。方 法一 微生 物法2 方 法原理利用植物乳杆菌( L a c t o b a c i li u s p l a n ta r u m) 的繁V i a与样品中的泛酸含址成正比的关系可计算出 样品中的泛敌含a . .3 试剂、 菌种和培养基所有试剂， 如末注明规格， 均指分析纯， 所有实验用水， 如未注明其他要求， 均指三级水。 3 . 1 生理盐水: 她氯化钠溶于1 0 0 O . L容址瓶中。东2 泛 酸钙 : 标准 品。 3 . 3 乙酸: c (
4、 H A c ) 为0 . 2 . . i / L.吸1 2 m L冰乙酸用燕馏水稀释至I L . 3 . 4甲苯 。 3 . 5 乙酸钠: c ( N 尸 稀释!月子. 样品的质IV或体积) , 9 ( 或n I L ) .8 允许 差同一样品两次测定值之差不得超过两次测定平均值的1 0 沁。方法二 高压液相色谱法9 方 法提要样品经水提取， 过滤， 除去蛋白质后， 川高压液相色谱侧定滤液中泛酸梭基的紫外吸收。1 0试剂所有试剂， 如未注明规格， 均指分析纯， 所有实验用水， 如未注明其他要求， 均指三级水。 1 0 . 1 硅酬树脂: 食品添加剂。1 0 . 2 A lW oM C D为
5、0 . l mo l / L . 1 0 . 3 硫酸锌 e M s o . ) 为I 殆八. 1 0 . 4 乙月 青 : 光谱纯。 1 0 . 5 磷敌二氧钾. c ( K H . P O , ) 为0 . 0 2 in o l压。称取2 . 7 2 g磷酸二氧钾， 加水溶解成 I G O O . L . 1 0 . 6 乙A m - O . 0 2 m . 压 磷敌二氛钾溶液: 体积比I 9 。 向I 体积乙脂中加入9 体积的0 . 0 2 m o l 九 磷酸 二氧钾， 用盐酸A节p H为3 .1 1仪器常用实验室仪器及: 1 1 . 1 离心机.3G B / T 5 4 1 1 1
6、7 - 1 9 9 71 1 . 2 滤膜过滤器: 滤膜 1 . 加m。 1 1 . 3 五氧化二磷 操器。 1 1 . 4 高压液相色谱仪: 带萦外检测器。1 2 操作步01 2 . 1 样品溶液的制备 1 2 . 1 . 1 准确称取样品约 I 飞， 加6 o m L水和I 滴硅酮树脂( 1 0 . 1 ) 后， 转入离心管中. 用盐酸湃液 ( 1 0 . 2 ) 调节P H为4 -5 ， 加入I O M L硫酸锌溶液( 1 0 . 3 ) 充分混合， 离心分离. 1 2 - 1 . 2 上清液用滤纸过滤， 用I O O ML容量瓶收集滤液， 离心管中残济用少量水冲洗于同一滤纸上. 用 少
7、最水洗滤纸， 洗液与滤液合并， 加水至I 0 0 n L 。经滤膜过滤器( 1 1 . 2 ) 过滤后作为样品溶液。 1 2 . 2 标准溶液的制备 1 2 - 2 . 1 泛酸标准贮备液: 浓度为l m g / m L .准确称取在I W!M( l 1 . 3 ) 中I wo的泛酸钙1 . ()9 1 8 g ， 加水溶解成1 0 0 0 mL . 1 2 - 2 . 2 泛酸标准工作液准确吸取标准r . 备液( 1 2 . 2 . 1 ) 1 , 2 , 4 , 8 , 1 2 r n L ， 分网加水成I 0 0 mL ， 作为标准T作液. 泛酸浓度分 训为1 0 , 2 0 , 4 0
8、 , 8 0 , 1 2 印9 加L . 1 2 . 3 测定条件坑充剂: 化学结合型硬脂硅烷。色谱柱: 内径6 . 2 - ， 长2 5 c m.洗脱液: 乙月 条0 . 0 2 r n o l / L磷酸二氛钾( I 9 ) .流速, I m L / min .测定波长: 2 0 0 n m.注1 柱的内 径和长 度可自由 选择。2 洗脱液 组成比和 流速 可报据色 通住情 况面改 变 ，没有统 一规定。 泛酸的 保角时间 可设定 为 8 - 1 2 m tn .3 泛酸的 最大吸收 在波 长 1 9 4 - 附近。 但是 移动扣 在此处也 有吸 收。 所 以洲定 波长定为2 0 0 -
9、. 1 2 . 4 标准曲线分别吸取 I O P L标准工作液( 1 2 . 2 . 2 ) ， 注入高压液相色谱中. 根据峰高绘制标准曲线.注: 进 样a, 灵敏 度与高 压液相色瀚 的注入 方式有 关， 因 此达 样盆可在3 - 2 0 0 L之间 变动。 1 2 . 5 样品测定准确吸取样品溶液( 1 2 . 01 印L. 注入高乐液相色谱仪中， 将所得峰高从标准曲线中求出样品滚液 中泛酸的浓度。1 3分析结 果 的表 述样 品 中 泛 酸 含 二 、/ I、一 10 0 1产 x 1 00 ” “ ” ” “ “ :( 2 ) 式中: ，样品溶液中泛酸的质rp .浓度, p g / l O N s二 称取样品的质量. 泛酸钙含0 .( Mg / k g ) =a酸含V . ( .n g / l 0 0 g ) X 1 . 0 8 7 泛酸钠含量( .g 八幼=泛酸含址( m g / l o 飞) XI . 1 0 01 4允许 差同一样 品 的两 次测 定值之 差不 得超 过两 次测 定平均 值的 l o %.
