糖和苷的提取与分离

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1、提取1. 酶对糖及其苷类提取的影响通常含糖及其苷类化合物的天然药材组织中往往同时含有酶,共存酶能促使苷键裂解,故药材粉碎后,受潮、冷水浸泡都能促使它们的相互接触致使苷键裂解,生成次生苷乃至苷元,影响原有成分及其作用,因此:欲提取原始苷时,需杀酶,60%以上乙醇、甲醇或80以上水处理;欲提取次生苷或苷元,需利用酶,如发酵等。 糖和苷的提取分离2. 提取糖及苷类溶剂的选择一般来说,糖苷类具多羟基,极性较大,难溶于低极性有机溶剂,大多在甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯中溶解度较大,提取效率较好,又能抑制酶,故为优选溶剂;水也为常用溶剂,尤其是糖的提取,可选用热水提取,但杂质较多,同时应注意共存有机

2、酸的影响,必要时可用缓冲液。分离1活性炭柱色谱2纤维素色谱3离子交换柱色谱4凝胶柱色谱5季铵氢氧化物沉淀法6分级沉淀或分级溶解法7蛋白质除去法1活性炭柱色谱概述用途分离水溶性物质较好如:氨基酸、糖类及某些苷类。特点:上样量大,分离效果较好,不受糖溶液浓度改变和无机盐存在的影响,适合大量制备;来源容易,价格廉;缺点:无测定其吸附力级别的理想方法。 活性炭对物质的吸附规律 对分子量大的化合物吸附力大于分子量小的化合物,即:多糖 单糖活性炭在水溶液中的吸附力最强,在有机溶剂中吸附力较弱。洗脱顺序:H2O、10%、20%、30%、50%、70%乙醇液无机盐,单糖等 二糖 三糖 多糖2纤维素色谱原理与P

3、C相同,属分配层析。溶剂系统:水、丙酮、水饱和的正丁醇等。用水溶性的溶剂如HAc:H2O进行展开时,其原理属吸附层析。 3离子交换柱色谱除水提液中的酸、碱性成分和无机离子;制成硼酸络合物阴离子交换树脂(不同浓度硼酸盐液洗脱) 4凝胶柱色谱常用商品名称及型号:葡聚糖凝胶琼脂糖凝胶5季铵氢氧化物沉淀法季铵氢氧化物是一类乳化剂。 6分级沉淀或分级溶解法是利用多数糖可溶于水,三糖以下尚可溶于乙醇,随着聚合度的增大,在乙醇中溶解度逐步降低的性质,在糖的水溶液中分次加入乙醇,使醇浓度渐增,从而达到对糖进行粗略分离目的的方法。为使多糖稳定,通常在pH=7时进行 酸性多糖在pH=24时进行处理酸性多糖时,为防酸水解苷键,操作宜迅速。7蛋白质除去法用分级沉淀法得到的多糖,常夹杂有较多的蛋白质,为除之,通常选择能使蛋白质沉淀而使多糖不沉淀的试剂来处理,如:酚、三氯乙酸、鞣酸等。注意:处理时间要短,温度要低。(避免多糖降解)三氟三氯乙烷法和Sevag法(用氯仿:戊醇或丁醇4:1混合)在避免降解上有较好效果。

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