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1、天津农学院毕业论文开题报告中文题目 饲料脂肪水平对鲤鱼生长、体成分及相关脂代谢酶的活性和基因表达的影响 学生姓名 范泽 学 院 水产学院 系 别 水产养殖科学系 专业班级 2010 级水产养殖学专业 3 班 指导教师 程镇燕 乔秀亭 开题时间 2013 年 4 月 一、研究目的和意义鲤鱼为鲤形目、鲤科、鲤亚科、鲤属的淡水鱼,原产亚洲。在世界范围内鲤鱼品种以我国最多、最集中,许多为我国特有的种类。鲤鱼对营养物质的需求,目前的研究主要集中在其对蛋白质的需要量方面,同样,鲤鱼饲料中利用脂肪对蛋白质的节约效应有很多学者进行了研究,但大多集中在饲料中脂肪水平对鱼体生长,消化酶活性等的影响方面,而关于鲤鱼
2、脂肪代谢,尤其是饲料中脂肪水平对鲤鱼脂肪代谢的两个关键酶 FAS 及 LPL 表达的影响的报道罕见。基于此,本文以鲤鱼为研究对象探讨了饲料脂肪水平对鲤鱼生长性能、体成分及脂肪代谢酶活性和其基因表达的的影响,为今后确定鲤鱼合理设置饲料配方提供依据,同时也为探索鱼类脂肪代谢的分子调控机制奠定基础。二、该选题的研究现状及发展趋势饲料中脂肪含量不足,可致使鱼类代谢紊乱,但饲料中脂肪水平过高,又会导致鱼体脂肪沉积过多,鱼类抗病能力下降1-2,因此饲料中脂肪水平的高低影响鱼类的生长。首先,这种影响可以通过一些主要的形体指标及生长性能的变化得到反映,韩光明3的研究表明以增重率和特定生长率为主要参照,得出吉富
3、罗非鱼饲料中脂肪适宜添加量 5.69%-7.67%。其次,饲料脂肪水平同时也影响鱼体及肌肉的营养成分。相关研究表明,饲料脂肪水平和鱼体总脂肪及肌肉脂肪含量的正相关关系在很多鱼类中都存在4-5。另外饲料脂肪水平的增加也会对鱼体及肌肉的水分、灰分、蛋白含量产生影响6-7。此外饲料脂肪水平对鱼体的影响尚有另一个关键环节脂肪代谢,其中涉及许多关键酶,目前的研究多集中于脂肪酸合成酶 FAS 及脂蛋白酯酶 LPL。脂肪合成酶 FAS 是脂肪代谢中主要的关键酶之一,韩光明3的研究表明吉富罗非鱼肝脏中 FAS 活性的测定显示,随着饲料脂肪水平提高,肝脏中 FAS 活性有降低的趋势,说明外源脂肪提供充足时,鱼体
4、减少脂肪酸的合成。脂蛋白脂酶 LPL 同样也是作为脂肪代谢的关键酶,郑珂珂等8发现瓦氏黄颡鱼肝脏 LPL mRNA 表达水平也表现出随饲料脂肪水平的升高而上升的趋势。目前,关于饲料脂肪水平对鲤鱼生长发育的影响有很多学者进行了研究,但大多集中在饲料中脂肪水平对鱼体生长,消化酶活性等的影响方面,相反关于鲤鱼脂肪代谢尤其是 FAS 及 LPL 两个关键酶表达的影响的报道罕见,而这些研究将为探索鱼类脂肪代谢的分子调控机制奠定基础。三、主要参考文献1 Du Z Y, Liu Y J, Tian L X, et al. Effect of dietary lipid level on growth, fe
5、ed utilization and body composition by juvenile grass carp J. Aquaculture Nutrition, 2005(11): 139-146.2 Regost C, Arzel J, Cardinal M, et al. Dietary lipid level, hepatic lipogenesis and flesh quality in turbot(Psetta maxima)J. Aquaculture, 2001, 193: 291-309.3 韩光明.饲料脂肪水平对吉富罗非鱼生长、体脂沉积、脂肪酸组成及脂肪酸合成酶的
6、影响D.南京:南京农业大学,2009.4 Shearer K D. Factors affecting the proximate composition of cultured fishes with emphasis on salmonids J. Aquaculture, 1994, 119: 63-88.5 朱卫,刘鉴毅,庄平等.饲料脂肪水平对点篮子鱼生长和体成分的影响J.海洋渔业,2013,35(1):65-71.6 宋理平,韩勃,冒树泉,王爱英,胡 斌,等.脂肪水平对厚唇弱棘鯻生长及肠道脂肪酶活性的影响J.广东海洋大学学报,2010,30(1):13-17.7 向枭,周兴华,陈建等
7、饲料脂肪水平对白甲鱼幼鱼形体指数、脂肪沉积和脂肪代谢酶活性的影响J水产学报,2013,37(9):1350-1355.8 郑珂珂,朱晓鸣,韩冬,杨云霞,雷武,解绶启等饲料脂肪水平对瓦氏黄颡鱼生长及脂蛋白脂酶基因表达的影响J水生生物学报,2010,34(4):815-821.四、主要研究内容及预期目标主要研究内容本试验以鲤鱼为研究对象,分别饲喂以鱼粉、豆粕、花生粕和棉粕作为蛋白源,豆油作为脂肪源,配制的5种不同脂肪水平的试验饲料,其中粗脂肪水平依次为2.1%、4.0%、5.8%、7.6%、9.4%,粗蛋白水平依次为32.0%、31.1%、30.2 %、29.2%、28.3%,进行为期 9 周的摄
8、食生长试验,研究饲料脂肪水平对鲤鱼生长、体成分及相关代谢酶活性和基因表达的影响。预期目标本文以鲤鱼为研究对象探讨了饲料脂肪水平对鲤鱼生长、体成分及脂肪代谢酶活性和其基因表达的的影响,探索鲤鱼配合饲料的最适脂肪水平,为今后确定鲤鱼合理设置饲料配方提供依据,为进一步探讨相关脂代谢酶的功能、作用机理及调控鱼类脂肪沉积的研究提供参考性资料,同时也为探索鱼类脂肪代谢的分子调控机制奠定基础。五、研究方案拟采用的研究方法分别用恒温干燥法( 105 ) 、凯氏定氮法、索氏抽提法和马弗炉550 高温灰化法测全鱼及肌肉的水分、蛋白质、粗脂肪、粗灰分含量;相关脂代谢酶活性应用购自南京建成生物工程研究所的试剂盒进行测
9、定;采用半定量RT-PCR方法,对禁食后再投喂的鲤鱼肝脏及肾脏的FAS及LPL mRNA表达情况进行检测,研究饲料脂肪水平及再投喂对鲤鱼肝脏及肾脏的FAS及LPL mRNA表达的影响。准备工作情况及主要措施1、检索相关文献,收集资料。学习并掌握鱼体体成分测定方法、相关脂代谢酶活性测定方法及半定量RT-PCR方法和原理。2、试验鱼及管理。实验用鲤鱼为天津市换新水产良种场同一批繁殖的鱼种,随机分成 5 个组,每组 3 个重复,每个重复 60 尾,分别饲喂脂肪水平为2.1%、4.0%、5.8%、7.6%、9.4% 的试验饲料,进行为期 9 周的摄食生长试验,并在实验基地进行活体解剖,取材,样品放于-
10、80冰箱保存。3、准备实验仪器及试剂。4、全鱼及肌肉测定体成分,肝脏及肾脏测定脂代谢酶活性及基因表达。分别用恒温干燥法( 105 ) 、凯氏定氮法、索氏抽提法和马弗炉 550 高温灰化法测全鱼及肌肉的水分、蛋白质、粗脂肪、粗灰分含量;采用半定量 RT-PCR方法,对鲤鱼肝脏及肾脏的 FAS 及 LPL mRNA 表达情况进行检测,六、工作进度安排2013 年 04 月中旬,撰写开题报告,进一步查阅资料;2013 年 04 月 17 日05 月 31 日,查阅资料,拟定实验方案;2013 年 06 月 01 日06 月 25 日,中期检查表及方案指导;2013 年 07 月 01 日08 月 1
11、0 日,试验操作及方法指导;2013 年 08 月 11 日10 月 17 日,试验鱼养殖;2013 年 10 月 18 日2014 年 03 月 01 日,取样并进行分析试验;2014 年 03 月 01 日04 月 01 日,完成论文初稿;2014 年 04 月 01 日05 月 12 日,毕业论文定稿;2014 年 05 月 13 日05 月 20 日,论文评阅;2014 年 05 月 21 日05 月 31 日,论文修改及装订;2014 年 06 月 01 日06 月 10 日,毕业论文答辩。指导教师意见:选题较新颖,有一定的理论和实践意义。阅读了一定量的参考文献,对本课题的研究现状有一定了解。实验方法可行,工作时间安排合理。同意开题。指导教师(签字): 年 月 日系意见:系主任(签字): 年 月 日注:1如果学生做的是毕业论文,封皮上就是“毕业论文开题报告”;如果学生做的是毕业设计,封皮上就是“毕业设计开题报告”这几个字。2开题报告中的“一”、“二”、“三”、“四”、“五”“六”项需要填写的内容全部用宋体小四,行距:固定值 22 磅。 3指导教师意见和系意见均在 30 字以上,用蓝、黑色签字笔或钢笔填写。果博东方,果博东方官网,果博东方娱乐http:/www.guobodongfang.meA8woY7Dp2AUX