根内球囊霉菌对茶树抗铅胁迫能力的调节效应

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1、分类号论文题目:河南农业大学硕士学位论文密级英文题目:A d j u s t m e n tE f f e c to fG l o m u si n t r a r a d i c e so nP bS t r e s sR e s i s t a n c eA b i l i t yo ft h eT e aP l a n t s导专论文提交目学位授予曰河南农业大学学位论文独创性声明、使用授权及知识产权归属承诺书学位论根内球囊霉菌对茶树抗铅胁迫能力的调节学位 硕士 文题目效应级别学生学科导师 杜娟植物学袁祖丽 姓名专业姓名学位论文 如需保密,解密时间年月日 是否保密独创性声明本人呈交论文是在

2、导师指导下进行的研究工作及取得研究成果,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包括为获得河南农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,指导教师对此进行了审定。与我一H I 作的J = 对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明,并表示了谢意。f I M I I I I I I r U l l l l l l l HI I I I Irllllf特此声明。Y 2 4 3 2 3 8 5研究生签名:蝴导师虢慨日期:;o1 3f 月斗日日期:沪f 蚌细弓日勰1日期:砷f 3 年月二卜日日期:劢f 睁石月弓日日期抛并万聃致谢本论文是在导师袁祖

3、丽教授的悉心指导下完成的,从论文选题、试验设计、试验开展到论文撰写,袁老师都给予了无微不至的关心,倾注了大量的心血。三年的研究生生活,在袁老师的深切关怀和指导下,我受益匪浅。她严谨的治学态度,宽厚待人的生活作风,高度的责任心,崇高的教师风范,平易近人的人格魅力都给我深远的影响,令我终身受益。同时,在生活上,特别是在我生病的日子里,袁老师给予了我无私的关爱与帮助! 在此,谨向我敬爱的恩师袁祖丽教授表示崇高的敬意、衷心的感谢以及无法言表的感激之情!在三年的研究生学习生活中,我得到了叶永忠老师、王伟老师、赵会杰老师、邱立友老师、李春奇老师、胡秀丽老师、杨慧玲老师、邰付菊老师、魏东伟老师、袁志良老师、

4、汪月霞老师、院办的李晓老师等对我的培养和教育,以及研究生处的各位老师和生命科学学院的各位领导的关心和帮助,特别是王伟老师、邰付菊老师、胡秀丽老师以及中心实验室黄晓书老师对我的试验的热情指导和帮助! 在此,向你们表达深深的感激与谢意!感谢河南农业大学推广楼5 0 2 、5 2 5 、5 0 1 、5 0 3 、5 2 4 、5 1 2 实验室的师兄师姐、师弟师妹以及2 0 1 0 级的同窗们给予我的帮助,特别是师妹陈卫莉、赵晓改,师弟袁志恒,同窗侯鹏飞、申腾飞、张莉、郑静静、安素坊等在学习、生活中的关心和试验中的帮助! 感谢宿舍的所有姐妹,谢谢你们的陪伴、关心和帮助! 此刻,真诚地向你们道一声谢

5、谢!感谢我的家人对我的关爱和照顾,这么多年来,你们一直都在物质和精神上默默地支持、鼓励我,支撑我不畏困苦,一路前行! 再次表示深深的感谢和崇高的敬意!最后,衷心地感谢为评阅本论文而付出宝贵时间和辛勤劳动的专家及教授们!目录摘要11 文献综述21 1 茶及其重要性21 1 1 茶树概述21 1 2 茶叶的保健与药理功效21 2 茶树重金属污染现状21 2 1 茶树重金属污染概况21 2 2 茶树P b 污染的途径31 3 植物忍耐和解除重金属毒性的途径31 4 丛枝真菌与共生植物41 4 1 丛枝菌根的类型41 4 2 丛枝菌根的结构41 4 3 丛枝菌根对共生植物生长发育的促进作用51 5 重

6、金属胁迫下丛枝真菌对共生植物的保护机制51 5 】菌根化可减少植物体内重金属含量51 5 2 菌根化可减轻重金属对植物的危害61 5 3 菌根化显著地影响了共生植物中一些与金属耐性和解毒相关的基因表达量61 6 茶树叶片总蛋白质的提取方法71 6 1 植物组织蛋白质分离的三个关键点71 6 1 1 植物组织的破碎71 6 1 2 次生代谢物的去除71 6 1 3 蛋白质的溶解性71 6 2 植物组织总蛋白质提取的三种方法81 6 2 1T C A ,丙酮提取法81 6 2 2 酚抽提法81 6 2 3T C A 丙酮,酚抽提法82 引言l O3 材料与方法113 1 试验地点与供试材料113

7、1 1 试验地点l l3 1 2 供试材料。1 13 2 接种处理与胁迫处理113 2 1 接种处理11i3 2 2 胁迫处理一1 13 3 样品的采集与预处理3 3 1 样品的采集一113 3 2 样品的预处理一1 23 4 各种耗材及试剂1 23 5 试验方法123 5 1 茶树生物量的测定一1 23 5 1 1 鲜叶产量的测定1 23 5 1 2 百芽重的测定I S 8 1 1 23 5 2G R S P 的提取及测定1 33 5 2 1 有关试剂的配制133 5 2 2G R S P 的提取【8 9 1 一133 5 2 3G R S P 的测定【矧1 33 5 3 根系菌根侵染率的测

8、定1 33 5 3 1 有关试剂的配制1 33 5 3 2 墨水染色观察法测定根系菌根侵染率【9 1 】1 43 5 4 根、叶、土及G R S P 中P b 含量的测定1 43 5 5 多胺含量的测定【9 2 , 9 3 1 153 5 6 抗氧化酶和抗氧化剂活性的测定153 5 6 1 超氧化物歧化酶( S O D ) 活性的测定1 53 5 6 2 过氧化物酶( P O D ) 活性的测定1 63 5 6 3 抗坏血酸过氧化物酶( A P X ) 活性的测定1 73 5 6 4 过氧化氢酶( C A T ) 活性的测定1 73 5 6 5 谷胱甘肽还原酶( G R ) 活性的测定183

9、5 7 茶树叶片蛋白质差异的研究一1 83 5 7 1 有关试剂的配制183 5 7 2 茶树叶片蛋白质的提取2 03 5 7 3 茶树叶片蛋白质的定量2 03 5 7 4 茶树叶片蛋白质的S D S P A G E 单向电泳2 03 5 7 5 茶树叶片蛋白质的I E F S D S P A G E 双向电泳2 13 5 7 5 1 第一向等电聚焦( I E F ) 一2 13 5 7 5 2 平衡213 5 7 5 3 第二向S D S P A G E 电泳2 23 6 数据处理分析2 24 结果与分析2 24 1 接种与未接种根内球囊霉菌的茶树百芽重及鲜叶产量的比较2 24 2 接种与未接种根内球囊霉菌的茶树根际土壤中G R S P 含量的比较2 34 3 接种与未接种根内球囊霉菌的茶树根系菌根侵染情况的比较2 34 4 接种与未接种根内球囊霉菌的茶树根、叶、根际土壤及球囊霉素中P b 含量的比较2 34 5 接种与未接种根内球囊霉菌的茶树根系、叶片中多胺含量的比较2 44 6 接种与未接种根内球囊霉菌的茶树叶片抗氧化能力的比较2 54 7 接种与未接种根内球囊霉菌的茶树叶片间的蛋白表达差异比较2 54 7 1 茶树叶片总蛋白S D S P A G E 单向电泳分析2 54 7 2 茶树叶片总蛋白质双向电泳分析一2 55 结论与讨论2

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