《光动力疗法抑制移植静脉再狭窄的实验研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《光动力疗法抑制移植静脉再狭窄的实验研究（79页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、中国人民解放军军医进修学院硕士学位论文光动力疗法抑制移植静脉再狭窄的实验研究姓名：程智广申请学位级别：硕士专业：心血管外科指导教师：余翼飞;顾瑛2003.6.1军医进修学院硕士研究生毕业论文英汉缩略词对照P D TP h o t o d y n a m i ct l l e m p y光动力疗法I HI n t i m a lh y p e r p l a s i a内膜增生H M M EH e m a t o p o r p h y r i nm o n o m e t h y le t l l e r血卟啉单甲醚P D G FP l a t e l e t - d e r i v e dg
2、 r o w t hf a c t o r血小板源性生长因子b F G Fb a s i c F i b r o b l a s t g r o w t h f a c t o r碱性成纤维细胞生长因子E G FE p i d e r m a lg r o w t hf a c t o r表皮生长因子I G FI n s u l i n - l i k eg r o w t hf a c t o r胰岛素样生长因子I LI n t e r l c u k i n白细胞介素T G FT r a n s f o r m i n g g r o w t h f a c t o r转化生长因子T N
3、FT u m o rn e c r o s i sf a c t o r肿瘤坏死因子V C A MV a s c u l a rc e l la d n e s i o nm o l e c u l e -血管细胞粘连分子P C N AP r o l i f * r a f i n gc e l ln u c l e a ra n t i g e n增殖细胞核抗原T KT h y m i d i n e k i n a s e脱氧胸腺激酶N M M H C DN o m u s c l e m y o s i nh e a v yc h a i n D非肌肉型肌球蛋白重链异型P T C AP
4、e r c u t a n e o u sW a n s l u m i n a lc o r o n a r ya n g i o p l a s t y 经皮腔内冠状爿脉成形术S M CS m o o t hm u s c l ec e l l平滑肌细胞V S M CV a s c u l a rm o o t hm u s c l ec e l l血管平滑肌细胞L P R L LL o wp o w e rr e dl a s e rl i g h t低能量红激光H p DH a e m a t o p o r p h y r i nd e r i v a t i v e s血卟啉衍生物
5、E C ME x 仃a c e l l u l a rm a t r i x细胞外基质 M M P sM a t r i xM e t a l l o p r o t e i n a s e s基质金属蛋白酶 N ON i t r o g e nm o n o x i d e一氧化氮P G l 2P r o s t a c y e l i n前列环素A C E IA n g i o t e n s i n c o n v e r t i n ge n z y m ei n h i b i t o r 血管紧张素转化酶抑制剂军医进修学院硕士研究生毕业论文中文摘要作者姓名：学科专业：导师：程智广胸
6、心外科学余翼飞光动力疗法抑制移植静脉再狭窄的实验研究摘要研究目的：冠脉旁路术后大隐静脉移植物发生再狭窄是困惑外科医师的一个难题，一定程度的内膜增生是移植静脉对动脉环境的适应性的体现。然而增生过度必将带来狭窄，最终导致血管闭塞。尽管如此，自体大隐静脉仍是应用最多的搭桥材料，因为它足够长且易于取材，尤其在多支冠脉病变而动脉移植物不足或急诊手术时更是如此。移植静脉再狭窄的机理与P T C A 术后再狭窄相似：内皮损伤后，在各种生长因子和细胞因子的作用下，血管中膜平滑肌细胞向受损内膜移行、增殖并分泌基质，进而血管发生重塑造成的；移植静脉的各个部位均会发生再狭窄，但吻合口内膜增生是导致静脉桥再狭窄及闭塞
7、的主要原因。移植静脉晚期的主要病理生理改变是粥样硬化。如何防治静脉移植后发生的再狭窄及提高吻合口近远期通畅率是心血管外科面临的重要课题。药物治疗、基因治疗、放射治疗效果均不肯定，存在安全性问题，有潜在的副作用等，于是促使我们不断寻求新的治疗手段。军跃进修学院硕士研究生毕业论文中文摘要P D T 的基本原理是通过激光照射使细胞内光敏剂在有氧条件下产生单态氧，引起细胞结构损伤，产生杀伤细胞或抑制细胞功能的作用。P D T 能够诱发平滑肌细胞凋亡，抑制S M C 的增殖、迁移和分泌功能；并能保护内皮细胞，维持内皮结构完整；而且能促进血管壁的适应性重构，抑制其挛缩，从而抑制静脉移植早期的内膜增生，从而
8、延迟管腔狭窄的进程。基于上述优点，光动力疗法在预防P T C A术后再狭窄的实验研究已进入二期临床阶段，然而在抑制移植静脉再狭窄病变方面的研究较少。有鉴于此，本研究拟采用兔颈外静脉颈总动脉移植模型，在移植静脉吻合口附近区域应用光动力疗法，探讨该种治疗方法对吻合口动脉端、动静脉连接部，静脉端内膜增生的抑制效应，从而为移植静脉再狭窄的防治提供新的思路。方法和结果：存活、血管通畅的1 6 只动物共3 2 个吻合口，随机分为光动力治疗组：将H M M E ( 15 u g m 1 ) 溶液充盈该吻合口处，使用5 3 2 n m 波长半导体激光器外照射5 m i n ，功率密度1 0 0 m w c m
9、 2 ，能量密度3 0 J c m 2 ；单纯激光照射组：将生理盐水充盈吻合口处5 m i n后，用同样参数的激光照射；单纯光敏剂灌注组：H M M E ( 1 5 u g m 1 )充盈吻合口处5 m i n ；空白对照组：生理盐水充盈吻合口处5 m i n 。手术后四周将四组中吻合口的动静脉连接部及两侧0 5 c m 处的动脉端、静脉端进行取材，并对它们的的内膜增生情况进行比较，观察不同处理组内膜增生程度的差异，统计学分析组间差异及各个处理组之间疗效的比较。结果发现，各取材部位的光动力治疗纽与对照组相比差异显著，P 0 0 5 ；激光照射组和光敏剂灌注组相比无明显差异，P O 0 5 兰垦
10、垄堡兰堕堡土堑窒竺生些堡兰堂垫垄芝堕塑型堡堕壁壁墨堡皇塑壅墼竺型吻合口动脉端表4 动脉端组问方差分析注：F = 1 5 0 0 ，P ( 0 0 0 0 1 ，提示各组在动脉端的内膜增生程度存在差异表5 动脉端各处理组的组间两两比较分析：S N K M e a nNgroupt；r o u p l n g注：在动脉端，光动力治疗组、光敏剂灌注组与对照组及激光照射组相比差异显著，P 0 0 5 。军医进修学院硕士研究生毕业论文光动力疗法抑制移植静脉再狭窄的实验研究注：F = 1 5 P ( 0 0 0 0 5 。提示各组在静脉端的内膜增生程度存在差异表7 静脉端各处理组的组间两两比较分析6 r
11、o u p l n g。r一_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ - _ - _ _ _ _ - - _ _ _ - _ _ _ _ - _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ - _ _ _ _ _ _ - _ _ 一A0 5 4 5 8 58对照组1 3O 4 1 0 2 58光敏剂组BC BO 3 3 7 0 48激光组CCO 2 5 2 9 38光动力组注：在静脉端，光动力治疗组、光敏剂灌注组及激光照射组与对照组相比差异显著，P 5 7 8 2 n m 6 2 7 8 n m 。这是因为波长短的激光，单个光子的能量高，光敏剂更易吸收其能量，因而激发产生的效应强。光
12、敏反应强度与能量密度呈正相关，能量密度过低( 3 0 J c m 2 ) ，则不能产生足够的光敏反应以破坏靶组织乳头层毛细血管网。关澄宇等幢4 在预选的P D T 参数范围中，最优搭配是：功率密度3 0 m W c m 2 ；照射时间1 5 m i n ；H M M E 剂量5 m g k g 体重。基于前述研究，我们选用5 3 2 n m 波长半导体激光器外照射5 m i n ，功率密兰堕堂竺堂堕堡主型塞竺兰些丝壅堂垫垄芝鲨塑! ! 壁堕堂壁要堡皇塑茎竺! ! 型度1 0 0 m w c m 2 ，能量密度3 0 J c m 2 ，H M M E ( 1 5 u g m 1 ) 溶液充盈局部
13、血管作为光动力治疗。结果发现，光动力治疗组在移植静脉吻合口的动静脉连接部、动脉端及静脉端，光动力治疗组与其他各组相比差异显著，P 6 3 0 n m ) 有强吸收；三重态量子产率高，三重态的能量大于9 4K J m o l 一1 ：单重态氧的量子产率高：低暗毒性：在癌组织上可被选择性吸收，对健康组织，特别是皮肤应不吸收或少吸收：容易大量合成，且药的配方简单，容易保存根据药物动力学的要求，多余的药物应能很快从体内排泄眇。以H p D 为代表的混合卟啉类光敏剂属于第一代光敏剂，它们都是复杂的卟啉混合物，组成不定，结构尚有争议：作用光谱也不理想，对6 3 0 h m红光的吸收较差，而6 3 0 n
14、m 光照对组织的穿透能力也较差：给药至光照的时间间隔长：皮肤光敏副作用较大，可持续至治疗后六周m 1 。八十年代以后，第二代光敏剂的开发研究发展迅速，在光敏活性、吸收光谱和组织选择性方面比第一代光敏剂有很大改进。第二代光敏剂垩垦些竺堂堕堡主堑塞生兰些兰塞! 塑都是单体化合物，大多为卟啉类化合物的衍生物，包括卟啉、卟吩、红紫素、内源性卟啉等，其它还有金属酞菁、稠环醌类化合物等。国外第二代光敏剂有苯卟啉衍生物单环酸h ( B P D M A ) 、5 一氨基酮戊酸( 5 - a m i n o l e v u l i n i Ca c i d ，5 - A L A ) 、间一四羟基二氢卟吩( m
15、T H P C ) 、二氢卟吩e 6 ( C h l o r i ne 6 ) 、红紫素( p u r p u r i n s ) 类光敏剂。国内正在开发的具有独立知识产权的第二代光敏剂主要有血卟啉单甲醚、竹红菌素类和二苯基卟吩( D i p h e n y l 一2 ，3 - d i h y d r o x y c h l o r i n ，D P C O H ) 。组织氧是参与光动力作用的重要反应物，组织中氧的浓度对光动力治疗的效果起着很重要的作用。有研究表明，由于光动力作用，可以使被照射治疗的组织区域的氧浓度有明显的降低，组织中氧消耗的速率如果大于6l am s - 1 ，组织就不能从循
16、环系统及时补足氧，使组织中的氧浓度持续下降，这样就使单态氧的产率下降，光敏剂的杀伤效率就会降低凹卜9 卯。为了产生最大的光动力效应，选择光动力疗法的光源应按照最佳匹配原则，就是使激发光波长与光敏剂的吸收光谱有最大限度的重叠。通过选择不同波长的光源可以控制P D T 的作用深度。就激发光子能量而言，在光动力疗法中使用的激发光波长不能太长。 m a x 在6 0 08 0 0 n m 的红光区时最易穿过人体组织，并且九m a x 越长，光对人体组织的穿透能力越强，对靶组织的穿透深度越大，而日光对皮肤的光敏副作用越小扪。( 3 ) 光动力治疗的血管效应光动力反应可以生成大量活性氧，活性氧能与多种生物大分子相互作用，损伤细胞结构或影响细胞功能，因而产生治疗作用。P D T 作用于血管产生的一系列反应使得它能应用于肿瘤治疗和其它两性血管疾病治疗。P D T 作用于肿瘤有赖于肿瘤血管能特异性吸收和滞留光敏剂，除了直军医进修学
