《阿托伐他汀对对比剂肾病大鼠肾脏细胞凋亡及尿LFABP和MBL含量的影响》由会员分享，可在线阅读，更多相关《阿托伐他汀对对比剂肾病大鼠肾脏细胞凋亡及尿LFABP和MBL含量的影响（66页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、研究生个人简介柳青，女，1 9 8 7 年0 1 月出生，江苏丰县人，党员。学习经历及任职情况：1 9 9 3 年至1 9 9 9 年江苏省丰县东关小学小学语文课代表1 9 9 9 年至2 0 0 2 年江苏省丰县实验中学初中班长2 0 0 2 年至2 0 0 5 年江苏省丰县第一中学高中团支书2 0 0 5 年至2 0 1 0 年徐州医学院华方学院本科2 0 1 0 年至今攻读徐州医学院肾脏内科硕士学位宣传委员本科获奖情况：? 。：一一 2 0 0 5 2 0 0 6 学年度，荣获校一等级奖学金，优秀团员等2 0 0 6 2 0 0 7 学年度，荣获校三等级奖学金，英语等级奖学金，三好学生等
2、2 0 0 7 2 0 0 8 学年度，荣获校二等级奖学金，三好学生等2 0 0 8 2 0 0 9 学年度，荣获校二等级奖学金，三好学生等2 0 0 9 2 0 1 0 学年度，荣获校三等级奖学金，诚信奖学金等研究生期间获奖情况：2 0 11 年，荣获“优秀团干部”英语考试情况：C E T - 6 级执业医师考试：已通过研究生导师：戴春副教授。研究生期间研究方向：急性肾衰竭。研究生期间所发表文章：1 柳青，戴春阿托伐他汀对对比剂肾病大鼠肾脏细胞凋亡及F A S F A S L 表达的影响 J 中国现代医生，2 0 1 2 ，5 0 ( 2 4 ) ：2 0 2 5 2 柳青，戴春阿托伐他汀对
3、对比剂肾病大鼠尿肝型脂肪酸结合蛋白及甘露糖结合凝集素含量的影响 J 徐州医学院学报，2 0 1 3 ，3 3 ( 2 ) ：9 3 - 9 6 目录缩略词表一1中文摘要2A b s t r a c t - - - - - 。4前言6材料和方法81 材料一82 方：法9结果。1 7讨论2 2结论2 6参考文献2 7综述。3 2攻读硕士学位期间发表学术论文题目一5 9临床培训小结“6 0致谢6 2论文独创性声明6 3论文使用授权声明一6 4论文审阅认定书一6 4徐州医学院硕士学位论文缩略词A T O 魍B U NC I NE U S AF 】附峪G 腿H R II n d oL 艮蝠PL N A
4、M 匣M B LS c rT U N E L缩略词表英文全称A t o r v a s t a t i nA c u t ek i d n e yi n j u r eB l o o du F c an i t r o g e nC o n t r 缸t - i n d u c e dn e p h r o p a t h yE n z y m e l i n k e di m m u n o s o r b e n ta s s a yF r e ef a t t ya c i d sG l o m e m l a rF i l t r a t i o nR a t e3 - h y d r
5、 o x y - 3 - m e t h y l g h t a r y lc o - e n z y m ear e d u c t a s ei n l f i b i t o r sI n d o m e t h a c i n b i v 篚蛐a c i db m d m gp r o t e i nN i t r o - L - a r g i n i n em e t h y l e s t e rM a r m o s e - b i n d i n gl e c t i nS e r u mc r e a t i n i n eT e r m i n a ld e o x y
6、n u c l e o t i d y lt r a u s f e r a s em e d i a t e dd U T P - b i o t i nn i c ke n dl a b e l i n g0 U l lI I I II l U l I I IIU lI I IIII Y 2 4 3 5 2 3 2中文全称阿托伐他汀急性肾损伤血尿素氮对比剂肾病双抗体夹心酶联免疫吸附法游离脂肪酸肾小球滤过率羟甲基戊二酰辅酶A 还原酶抑制剂吲哚美辛L 型脂肪酸结合蛋白N 硝基L 精氨酸甲酯甘露糖结合凝集素血肌酐末端脱氧核苷酸转移酶介导的d U T P 生物素缺口末端标记徐州医学院硕士学位论文阿
7、托伐他汀对对比剂肾病大鼠肾脏细胞凋亡及尿L F A B P 和N B L 含量的影响中文摘要目的通过研究阿托伐他汀对对比剂肾病大鼠肾脏细胞凋亡及尿液中L 型脂肪酸结合蛋白( I F A B P ) 和甘露糖结合凝集素( M B L ) 含量的影响，探讨他汀类药物对对比剂肾病的保护作用。方法清洁级雄性S D 大鼠3 2 只随机分为空白对照组、实验对照组、造模组、他汀组，每组8 只。他汀组于造模前3 天至造模后3 天连续给予阿托伐他汀3 0 T I l g ( k 矿d ) 灌胃，其余组生理盐水灌胃。建立对比剂肾病大鼠模型，其中造模组、他汀组注射吲哚美辛、N 一硝基一L - 精氨酸甲酯、泛影葡胺，
8、实验对照组以生理盐水代替泛影葡胺，空白对照组只注射等体积的生理盐水。采集各组大鼠造模前、造模后4 8 h 的血液，全自动生化分析仪检测血肌酐( S C r ) 值：收集各组大鼠造模前后2 4h 尿液，离心取上清，双抗体夹心酶联免疫吸附法( E L I S A ) 测定L F A B P 和M B L 含量；造模7 2 h 后处死大鼠摘取右肾，采用原位末端标记法( T U N E L ) 检测肾脏细胞凋亡，免疫组化法检测肾脏F A S 、F A S L 的表达。比较各组大鼠造模前后血S C r 、尿L F A B P 、尿M B L 含量的变化及肾组织细胞凋亡、F A S F A S L 表达情
9、况。结果1 注射对比剂4 8 h 后造模组血S c r 较注射前升高大于2 5 ( P 0 0 5 ) ；8 造模组与其他三组比较，肾脏凋亡细胞数明显增多( p f 7 1 阿托伐他汀灌胃：其余3 组均使用等量生理盐水灌胃。注射泛影葡胺前各组限水1 2 h 。注射泛影葡胺当天各组水合氯醛腹腔麻醉后，剥离股静脉，置入留置针。其中造模组、他汀组每隔1 5 分钟注射吲哚美辛lm g 1 0 0 9 、N 硝基一L 广精氨酸甲酯lm g 1 0 0 9 、泛影葡胺lm l 1 0 0 9 ；实验对照组注射吲哚美辛1m g 1 0 0 9 、N - 硝基- L 精氨酸甲酯lm g 1 0 0 9 ，以生
10、理盐水1 5 m l 代替泛影葡胺；空白对照组只注射等体积的生理盐水1 5 m l 。注射结束拔除针头，压迫止血，缝皮。2 3 1 标本收集2 3 1 1 造模前及造模后4 8 小时内眦静脉取血，并留取造模前及造模后2 4 h 尿液，分别取6 m l ，以2 0 0 0 转分钟离心1 0 分钟，取上清液于8 0 冰箱保存，以备用。2 3 1 27 2 d x 时后，再次麻醉，打开腹腔，冰盐水反复灌洗，直至肾脏颜色变苍白，游离肾脏组织，置于冰上，小心去包膜，延肾蒂剖开肾脏。切取皮髓交界取肾脏组织，分别放置1 0 中性甲醛及2 5 戊二醛电镜液固定，制作成石蜡切片以备用。2 3 2 石蜡切片的制作
11、组织固定：取出肾组织迅速切成小而薄组织块，放入1 0 甲醛溶液；组织洗涤：用蒸馏水冲洗，除去残留的固定液；组织脱水、透明a7 5 乙醇2 5 小时b8 0 乙醇2 5 小时c9 0 乙醇2 0 分钟d9 0 乙醇2 0 分钟e9 5 乙醇2 0 分钟f 9 5 乙醇2 0 分钟g1 0 0 7 , 醇2 0 分钟hl o o 乙醇2 0 分钟徐州医学院硕士学位论文i 二甲苯( 1 )5 分钟j 二甲苯( 2 ) 肉眼观察组织浸蜡：组织经过二甲苯透明后，用冷风稍干并立即投入5 4 5 6 “ C 液体石蜡，3 6 小时；组织包埋：用干净蜡包埋。2 3 3 血肌酐测定血标本在高速离心机上离心( 2
12、 0 0 0 转分钟，l O 分钟) ，吸取血清，在全自动生化分析仪上采用自动生化分析仪检测S c r 。2 3 4 尿液L F A B P 的测定2 3 4 1 原理本实验采用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法( E L I S A ) 测定样品中大鼠L F A B P 的水平。向预先包被了大鼠L F A B P 单克隆抗体的酶标孔中加入L F A B P ，温育；温育后，加入生物素标记的抗L F A B P 抗体，再与链霉亲和素H R P 结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A 、B ，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。在4 5 0 n m 处测O D
13、值，L F A B P 浓度与O D 值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中L F A B P 的浓度。2 3 4 2 试剂盒组成标准品(64000pgm1)05ml标准品稀释液3 m l酶标包被板9 6 孔链霉亲和素H R P3 m l2 0 倍浓缩洗涤液2 0 m l生物素标记的抗LFABP抗体lml显色剂A 液3 m l显色剂B 液3 m l终止液3 r n l徐州医学院硕士学位论文2 3 4 3 实验前配液设标准孔5 孔，并稀释标准品，方法如下洗涤液：将2 0 倍浓缩洗涤液用蒸馏水2 0 倍稀释后备用；样本：将保存的尿液上清液于室温下溶解后以l ：5 稀释。2 3 4 4 检测程序加样
14、：设5 个标准孔，1 个空白孔，其余为样本孔。标准孔：将标准品1 ( 2 0 0 0 g r n l ) 、标准品2 ( 4 0 0 0 p g , m i ) 、标准品3 ( 8 0 0 0 p g m 1 ) 、标准品4 ( 1 6 0 0 0 p g m 1 ) 、标准品5 ( 3 2 0 0 0 p g h a ) 各5 0 1 1 1 依次加入标准孔中，再加入链霉亲和素阳冲5 0 1 1 1 ；样品孔：加入稀释好的尿液样本4 0 l l l 、抗L F A B P 抗体1 0 u l 、链霉亲和素H R P5 0 u l ；空白孔：之后只加入显色剂A 、B 和终止液，其余不加。盖上封板膜，轻轻振荡混匀，3 7 “ C 温育6 0 分钟；洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置3 0 秒后弃去，如此重复5 次，拍干；显色：每孔加入显色剂A5 0 u l ，再加入显色剂B5 0 u l ，轻轻振荡混匀，3 7 “ C 避光显色1 0 分钟：终止：每孔
