《前列腺素E1和Valsartan防治家兔颈动脉球囊损伤术后再狭窄的实验研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《前列腺素E1和Valsartan防治家兔颈动脉球囊损伤术后再狭窄的实验研究（55页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、南京医科大学硕士学位论文前列腺素E和Valsartan防治家兔颈动脉球囊损伤术后再狭 窄的实验研究姓名：高志伟申请学位级别：硕士专业：外科学(普外科)指导教师：陈国玉20030408南京医科大学硕士学位论文C E AP T C AR SS M CP G E lA n g A n tA R AA C EA C E IP C N A7 N E LE CE TA AP P A RI E L队P K缩略词c a r o t i de n d a r t e r e c t o m yp e r c u t a n e o u st r a n s l u m i n a lc o r o n a r
2、ya n g i o p l a s 哆r e s t e n o s i ss m o o t hm u s c l ec e l lp r o s t a g l a n d i nE la n g i o t e n s i n a n g i o t e n s i nr e c e p t o ra n g i o t e n s i nI Ir e c e p t o ra n t a g o n i s ta n g i o t e n s i nc o n v e r t i n ge n z y m ea n g i o t e n s i n c o n v e r t i
3、 n ge n z y m ei n h i b i t o rp r o l i f e r a t i n gc e l ln u c l e a ra n t i g e nt e r m i n a ld e o x y n u c l e o t i d y lt r a n s f e r a s e m e d i a t e dd U T Pn i c k - e n d l a b e l i n ge n d o t h e l i u mc e l le n d o t h e l i na r a c h i d o n i ca c i dp e r o x i s
4、o m ep r o l i f e r a t o r - a c t i v a t e dr e c e p t o ri n t i m a le l a s t i cm e m b r a n em i t o g e n - a c t i v a t e dp r o t e i nk i n a s e2颈动脉内膜切除术经皮冠状动脉成形术再狭窄平滑肌细胞前列腺素E l血管紧张素血管紧张素受体血管张素受体阻滞剂血管紧张素转化酶血管紧张素转化酶抑制剂增殖细胞核抗原末端脱氧核糖转移酶介导的d U T P缺口末端标记内皮细胞内皮素花生四烯酸过氧化物酶增生物激活受体内弹力膜有丝分裂原激
5、活蛋白激酶南京医科大学硕士学位论文前列腺素E ，和v als a r t a n 防治家兔颈动脉球囊损伤术后再狭窄的实验研究南京医科大学第一附属医院普外科研究生高志伟导师陈国玉摘要研究背景颈动脉内膜切除术( c a r o t i de n d a r t e r e c t o m y ，C E A ) 已成为颈动脉外科防治短暂陛脑缺血发作( t r a n s i e n ti s c h e m i ca t t a c k ，T I A ) 和脑卒中的有效术式；经皮腔内冠状动脉血管成形术( p e r c u t a n e o u st r a n s l u m i n a lc
6、o r o n a r ya n g i o p l a s y ，P T C A ) 是心血管疾病治疗学上的一次革命。然而，C E A 和P T C A 等血管成形术后共有的并发症：再狭窄( r e s t e n o s i s ，R S ) 严重影响了中远期疗效。R S 是困扰血管外科多年的难题，对R S 机制及其防治的研究一直是颈动脉外科和心血管介入治疗领域的一大重点。目的1 建立家兔颈动脉球囊损伤术动物模型，设立对照组探讨R S 形成机理。2 以前列腺素E l ( P G E l ) 和V a l s a r t a n 作为干预因素，探讨P G E l和V a l s a r t
7、a n 对R S 的防治作用。方法4 0 只家兔行颈动脉球囊损伤术后，随机分成对照组( n = 1 0 ) 、P G E l 组( n = 1 0 ) 、V a l s a r t a n 组( n = 1 0 ) 以及P G E l 和V a l s a r t a n 联合治疗组( n = 1 0 ) 。P G E l 组：术后各兔每天予以P G E l 经耳缘静脉缓睫注射( 0 2 “g k g - 1 ) ，共1 0 天；V a l s a r t a n 组：术后各兔每天予以V a l s a r t a n 喂服( 1 0 m g k g “ 1 ) ，共1 0 天；联合治疗组：同
8、时予以P G E l组和V a l s a r t a n 组的治疗方案；对照组：各兔每天予以生理盐水O 5m l南京医科大学硬士学位论文耳缘静脉注射1 0 天。各兔于术前、术后3 天、1 周、2 周、4 周及8周留取静脉血，用放射免疫法检测血浆中内皮素( E T 1 ) 、血栓素( T X A 2 ) 代谢产物T X B 2 和前列环素( P G l 2 ) 代谢产物6 酮前列腺素F I 。( 6 k e t o P G F l 。) 的水平变化；术后4 周、8 周每组随机处死家兔各5 只，留取损伤侧颈动脉，制作H E 染色、原位标记凋亡细胞( T U N - E L ) 染色和增殖细胞核抗
9、原( P C N A ) 免疫组化染色切片，应用光学显微镜和计算机图像分析系统对切片进行图像分析。结果1 术后3 天、1 周、2 周、4 周，P G E l 组、V a l s a r t a n 组和联合治疗组E T o l 较对照组明显降低( P 5 0 ) 高达2 4 。P T C A 术后R S 主要发生于术后半年之内，单纯P T C A 术后R S 发生率高达3 0 5 0 【7 | 8 J 。多数学者认为导致血管再狭窄的可能机制是【9 ，1 0 1 ：血管内皮细胞受损，内膜下基质暴露，血小板粘附、聚集，导致多种生长因子和血管活性分子生成，如血小板衍化生长因子，成纤维生长因子、内皮细
10、胞生长因子、胰岛素样生长因子、内皮素、血管紧张素等，导致了炎症反应，血管中膜收缩型V S M C 被激活转化成为合成型V S M C ，迁移至内膜下大量增殖，同时大量结缔组织基质合成与分泌。R S 的发生按其病理发展过程大体分为五个阶段：1 1 1 1 血栓形成期；2 。炎症期；3 血管平滑肌细胞增殖期；4 基质大量形成期；5 血管“再塑”期。在这一类似手术后疤痕过度增生的局部血管损伤修复过程中，血管内皮细胞的损伤是R S 的启动因素，它不仅可以促进血管局部血栓的形成，还可释放血管紧张素转化酶( A C E ) 、内皮素、5 一羟色胺、生长因子、细胞因子、粘附分子等血管活性分子，促进血管的收缩
11、，进而启动和引起一系列血管损伤和修复反应。基于此，棼课题组在建立家兔颈动脉球袅损伤术动物模型的基础上，应用新型前列腺素E I ( P G E l ) 制荆一一凯时、新型血管紧张素I I 受体拮抗剂一一V a l s a r t a n ( 代文) ，进行防治R S 的实验研究。前列腺素E I ( P G E l ) 具有抗血小板聚集、扩张血管、促进红细胞变形、抑制活性氧、防止组织再灌注损伤、保护细胞膜，稳定线粒体膜等独特广泛的药理作用。目前临床主要应用于治疗慢性动脉闭塞症和微循环障碍，国内尚未见用于防治R S 的报导。V a l s a r t a n 通过阻断血管紧张素I I ( A n g
12、 I I ) 与A T l 受体( 血管紧张素I 型受体) 的结合发挥南京医科大学硕士学位论文作用，研究证明，A n gI I 不仅可以通过经典的血管紧张素转化酶途径生成，也可由非血管紧张素转化酶( 如：组织蛋白酶G 、胰蛋白酶和激肽释放酶) 途径生成。传统的血管紧张素转化酶抑制剂( A C E I ) 仅能阻断由经典途径生成的A n gI I ，而V a l s a r t a n 通过阻断A T l 受体，进而彻底阻断肾素一血管紧张素系统的生物效应，因此，V a l s a r t a n 比A C E I更为有效。同时由于它对血管紧张素转化酶( A C E ) 无抑制作用，也无促进缓激肽
13、和P 物质生成的作用，因而无A C E I 类药物的副反应。R S 是困扰血管外科多年的难题，近二十多年来，对R S 机制及其防治的研究一直是颈动脉外科和心血管介入治疗领域的一大重点，本课题对R S 的机理和防治进行研究，为临床防治R S 研究提供实验研究基础。1 材料和方法1 1 材料1 1 1 动物及分组健康家兔4 0 只，雌雄不拘，体重1 9k g 2 3 埏，平均( 2 1 土0 2 ) k g ，南京医科大学实验动物中心提供。行右侧颈总动脉球囊损伤术后，随机分为对照纽( n = 1 0 ) 、P G E t 纽( n = 1 0 ) 、V a l s a r t a n组( n =
14、1 0 ) 以及P G E l 和V a l s a r t a n 联合治疗组( n = 1 0 ) 。1 1 2 主要器械及试剂( 1 ) 前列腺素E I ( 凯时) 由北京泰德制药有限公司惠赠，规格：1 0 “g 2 m l ，生产批号：1 0 1 1 M ，本实验将其与生理盐水配制成】“g m I 使用。( 2 ) V a l s a r t a n ( 代文D i o v a n ) 由北京诺华制药有限公司惠赠，规格：8 0m g 片，生产批号：S C 9 4 0 0 3 ，本实验将其与生理盐水配制成4 0 m g 1 0 m l 稀释药液使用。( 3 ) 血栓素( T X B 2
15、) 放免药盒购自北京东雅生物技术研究所( 4 ) 6 - 酮一前列腺素F 1 。( 6 - k e t o P G F l 。) 放免药盒购自北京东雅生物技术研究所。南京医科大学硕士学位论文( 5 ) 内皮素( E T 1 ) 放免药盒购自北京东雅生物技术研究所。( 6 ) T U N E L 试剂盒，德国R o c h e 公司产品。( 7 ) 鼠抗人增殖细胞核抗原( P C N A ) ，丹麦D a k o 公司产品。( 8 ) 鼠A B C 试剂盒，美国V e c t o r 公司产品。( 9 ) B e c k m a nJ - 6 B 型离心机，美国B e c k m a n 公司产
16、品。( 1 0 ) P T C A 球囊导管3 0 m i l l 2 0 m m ，美国C o r d i s 公司产品。( 1 1 ) D F M - 9 6 型多管放射免疫计数器，安徽合肥众成机电技术公司产品。( 1 2 ) 图像分析仪：N Y D - 1 0 0 0 型，由南京医科大学病理学教研室与东南大学共同研制。1 2 方法1 2 1 模型制备4 0 只家兔按C l o w e s 方法制作家兔颈总动脉损伤术动物模型：3 戊巴比妥钠11 1 1 l 蚝经耳缘静脉麻醉后，颈正中切开皮肤、皮下组织，分离显露右颈总动脉，耳缘静脉静推肝素2 5 0U 后，将P T C A 球囊导管从右颈外动脉切口向右颈总动脉方向逆行插入约3 5c m ，以生理盐水充盈扩张球囊至感到抽拉阻滞感，缓慢拉回至动脉切开处，如此反复插入抽拉5 次后移出导管，结扎右颈外动脉。术后各兔每天肌内注射青霉素4 0 万单位，共3 天，预防感染。1 2 2 用药方案前列腺素E l ( P G E
