南京地区猪流感病毒H1N1和H3N2亚型流行病学调查

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1、E P I D E M I O L O G I C A LS I 瓜V E Yo FS W I N EI N F L U E N Z AV I R U SH 1 N 1A N DH 3 N 2I NS W I N EB yZ h uX i a n g l e iS u p e r v i s e db yP r o f L uC h e n g p i n g& P r o f Z h a n gZ h e n l a nAD i s s e r t a t i o nS u b m i t t e dt oN a n J i n gA g r i c u l t u r a lU n i v

2、 e r s i t yI nP a r t i a lF u l f i l l m e n to ft h eR e q u i r e m e n t sf o rt h eM a s t e ro fP r o f e s s i o n a lD e g r e ei nV e t e r i n a r ym e d i c i n eC o m p l e t e di nJ u n e2 0 1 2C o m m e n c e m e n ti nJ u n e2 0 1 2原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已

3、经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者( 需亲笔) 签名:卒、确 年6 月2 - E I学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密口,在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密d( 请在以

4、上方框内打“”)学位论文作者( 需亲笔)导师( 需亲笔) 签名:月1 2 日多月日目录目录摘! 耍IA B S T R A C T I I I英文缩写词表V第一篇文献综述。1第一章猪流感的研究概况1 猪流感流行情况与流行特征11 1 流行情况11 2 流行特征22 临床症状33 发病机理及病理变化。44 免疫机制45 诊断方法45 1 血清学诊断55 1 1 血凝抑制试验55 1 。2 酶联免疫吸附试验。55 2 分子生物学诊断55 2 1 实时荧光定量P C R 65 2 2 依赖核酸序列的扩增技术( N A S B A ) 65 2 3 基因芯片6参考文献。8第二章猪流感病毒概述。1 l1

5、 病毒结构1 12 理化性质1 23 生物学特性1 23 1 血凝性1 23 2 抗原性1 2南京地区猪流感病毒H 1 N 1 和H 3 N 2 亚型流行病学调查3 3 增殖性1 34 基因组特性1 34 1 血凝素( H A ) 1 34 2 神经氨酸酶( N A ) 1 44 3 核蛋白( N P ) 。1 44 4 基质蛋白( M a t r i xP r o t e i n ,M ) 1 54 5 聚合酶蛋白( P B 2 、P B l 、P A ) 1 64 6 非结构蛋白( N o n s t r u c t u r a lP r o t e i n ,N S ) 1 6参考文献l

6、7第二篇研究内容1 9第三章猪流感病毒H 1 N 1 和I - 1 3 N 2 亚型血清学调查2 ll 材料2 11 1 病毒与血清2 11 2 红细胞悬液的配制一2 12 方法2 l2 1 血凝抑制试验( H I ) 2 l2 1 1 血清处理2 22 1 2 抗原制备。2 22 1 2 1 细胞复苏2 22 1 2 2 传代细胞培养2 22 1 2 3 细胞冻存2 32 1 2 4S I V 接种和检查2 32 1 3 抗原效价测定2 32 1 4 四个单位抗原配制2 42 1 5 血凝抑制试验2 42 1 6 结果2 52 2 酶联免疫吸附试验( E L I S A ) j 2 72 2

7、 1 样品处理2 82 2 2 实验过程2 82 2 3 结果判定2 82 2 4 结果2 93 讨 仑3 0目录参考文献3 4第四章猪流感病毒H 1 N 1 和H 3 N 2 亚型病原学调查3 71材料3 72 方法3 72 1 样品处理3 72 2R N A 提取3 82 3e D N A 合成3 82 4P C R 引物设计与合成3 92 5P C R 检测3 92 6 琼脂糖凝胶电泳( P A G E ) 4 02 7 结果一4 03 讨论4 1参考文献4 4第五章猪流感的防控措施4 71 种源控制4 72 加强饲养管理4 73 加强S I 预防监测4 84 疫苗免疫4 85 公共卫生

8、4 85 1 猪群公共卫生4 95 2 兽医公共卫生4 95 3 人类公共卫生4 9参考文献5l全文总结5 3附勇匙5 5A 南京地区S I VH 1 N 1 和H 3 N 2 亚型流行病学调查相关试剂和仪器5 51 试剂材料5 51 1 细胞培养相关试剂5 51 2 抗体检测相关试剂。5 52 仪器设备5 6南京地区猪流感病毒H I N I 和H 3 N 2 亚型流行病学调查B 抗体检测结果5 7致谢6 9摘要南京地区猪流感病毒H 1N 1 和H 3 N 2 亚型流行病学调查摘要猪流感( S w i n eI n f l u e n z a ,s I ) 是由正粘病毒科流感病毒属A 型流感病毒引起猪的一种急性、高度接触传染性呼吸道疾病,对畜牧养殖业危害极大,并且具

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