《NADH及脱氢酶型电化学生物传感器的制备方法研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《NADH及脱氢酶型电化学生物传感器的制备方法研究（54页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、 重庆医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。学位论文作者签名旅弘榔日期：尹f 碑中碍夕曰l学位论文版权使用授权书本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学。本人保证毕业离校后，发表
2、论文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容( 保密内容除外) ，并编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他手段保存论文。保密论文在解密后适用本授权书。论文作者张旎孕蜂 指导教师签名滞避龄日期：驯号明舻盟目录符号说明1中文摘要3英文摘要5论文正文：N A D H 及脱氢型电化学生物传感矗的制备方法研究。81 i l 自言8j I I l j i l i ；文i l i t 1 3第章基于M D B G M C C S 纳米复合物一步法构建N A D H 电化学传感矗1
3、 81 资料与方法1 8I I I j i I I j 啊1 81 2 仪器与设备1 91 3M D B G M C C S 纳米复合物的制备。1 9 1 4 一步法构建N A D H 电化学传栅1 91 5N A D H 电化学传感器的性能表征和评价2 02 结果与讨论2 02 1N A D H 电化学传感矗的性能表征2 02 2N A D H 电化学传感器的工作电位优化2 52 3N A D H 电化学传感器的线性范围2 63 d - 结2 7第二章基于G M C M D B A D H N A D + C S 纳米生物复合物一步法构建乙醇电化学 I j 勰2 91 资科与方法2 9I I
4、 ；l j 6 C j 啊2 91 2 仪器和设备。2 91 3M D B G M C A D H N A D + C S 纳米生物复合物的制备3 01 4 一步法构建乙爵电化学传感器3 01 5 乙醇电化学传感器的性能表征和评价3 01 6M D B 在不同p H 下的稳定性3 02 结果与讨论312 1 乙醇电化学传感器的性能表征及条件优化。3l2 2 乙醇电化学传感器的线性范围3 32 3 乙醇电化学传感器的实际样本检测3 53 ，j 、j 右3 6敛总 结3 7j I I I l 目 i l ：文j I i 3 8：j ：2 ：i I i I I 综述4 l致谢4 9攻读硕士期间发裹的
5、论文及申请的专利5 0重庆医科大学硕士研充生学位论文A D HA O XN A D HN A D +D BG M C SC SS P E 唧T r j sH C lA AU AD AC AK C lN a C lC a C l 2M g C hH 2 0 2I p cI p 。符号说明A l c o h o ld e h y d r o g e m s eA l C o h olo x i d a s eR e d t r e df o r m o f1 3 一n i c o t i n a m i d ea d e n i n ed i n u c l e o t i d e中文全称乙醇脱氢
6、酶乙醇氧化酶还原型辅酶O x i d i z e df o r mo f l 3 n i c o t i n a m i d ea d e n i n e氧化型辅酶Id i n u c l e o t i d eM e k i o h Sb l u eG r a p h i t i z e dr r 燃o p o r o u sc a r b o n sC h i t o s a nS c r e e np r i n t e dc a r b o ne l e c t r o d eP o l y e t h y l e n et e r e p h t h a h t eT r i s m
7、 e t y la m i n o m e t h a n eH y d r o c h l o r i ca c i dL ，a S c o r b 记a c i dU r i cA c i dD o p a m i n eC a t e c h o l a m i n eP o t a s s i u mc h l o r i d eS o d i u mc h l o r i d eC a l c i u mc h l o r i d eM a g n e s i u mc h l o r i d eH y d r o g e np e r o x i d eC a t h o di c
8、p e a kc u r r e n tA n o d i cp e a kc u r r e n tI TC u r v eC u r r e n t - t i m ec u r v e麦尔多拉蓝石墨化介孔碳壳聚糖丝网印刷电极聚对苯二甲酸乙二醇酯三羟甲基氨基甲烷盐酸L 抗坏血酸尿酸多巴胺儿茶酚胺氯化钾氯化钠氯化钙氯化镁过氧化氢阴极峰电流阳极峰电流电流时间曲线C VL o DI 毽D 赋P O C TM e dP E D O TT B T DP P YC y c l i cv o l t a m m e t r y循环伏安法L i m i to f d e t e c t i o n检测限R
9、 e h t i v es t a n d a r dd e v i a t i o n相对标准偏差D i f f e r e n t i a lp u l s ev o l t a m m e t r y差分脉冲伏安法P o h a to f c a r et e s t即时检测或床旁检测M e d i a t o r电子介体电子媒介体P o l y ( 3 ，4 - e t h y l e n e d i o x y t h i o p h e n e )聚( 3 ，4 - 乙撑二氧噻吩)P o l y ( 4 ，7 d i t h i e n - 2 y l - 2 ，1 ，3 - b
10、e n z o t h i a d i a m聚( 4 ，7 - 二噻吩2 基1 e )2 ，1 ，3 苯并噻二唑)P o l y ( p y r r o l e l聚吡咯2N A D H 及脱氢酶型电化学生物传感器的制备方法研究摘要脱氢酶型电化学生物传感器是在辅酶的参与下，利用修饰在电极表面的脱氢酶检测目标分子的一种电化学装置。脱氢酶反应在维持生命正常运转、细胞新陈代谢等方面具有重要意义。将传感器的快速、便携和低成本的特性与脱氢酶反应的高特异性相结合，制备脱氢酶型电化学生物传感器用于检测疾病相关的目标分子，对于满足临床对疾病快速诊断的需求具有重要价值。本论文围绕目前脱氢酶型电化学生物传感器研
11、究中存在的关键问题开展了相关的研究。具体内容分为以下两部分：( 1 ) 构建了基于M D B G M C C S 纳米复合物，采用一步滴涂法制备电化学传感器，用于N A D H 的高灵敏、高特异检测。利用G M C 对M D B的强吸附特性，将M D B 固载于G M C 表面；利用C S 的多聚阳离子特性和良好的成膜性，将M D B G M C 复合物分散后滴涂于电极表面，制备M D B G M C C S 纳米复合膜；考察了修饰电极对N A D H 的电催化特性；在电活性分子( 抗坏血酸、尿酸、多巴胺等) 和金属离子( 铒j 离子、钠离子、钙离子、镁离子) 存在下，修饰电极对N A D H
12、 分析的特异性；在优化电位下修饰电极对N A D H 表现出高的灵敏度( 1 0 。3 6本研究获得重庆医科大学检验医学院优秀硕士基金资助。3n A g M ) ，快速响应( 5s ) 和低的检测限( O 1 8 6 州) 及长期稳定性。( 2 ) 构建了M D B G M C A D H N A D + C S 纳米生物复合物，用于一步滴涂法制备乙醇电化学传感器。将上述研究制备的M D B G M C C S 纳米复 合物与乙醇脱氢酶( A D H ) 和氧化型辅酶( 删) 共混后，一步滴涂法修饰于电极表面，制备无试剂的一次性乙醇电化学生物传感器；利用C S 良好的成膜性和生物形容性，将A
13、D H 稳定地固定于电极表面；考察了传感器对乙醇的电化学响应；在优化了修饰酶浓度和电化学检测条件后，乙醇传感器表现出高的灵敏度( 6 7 2 8n A m M ) 、宽的线性范围( O 5 1 5m M ) 、低的检测限( 8 0 脚) 、良好的稳定性( 4 0 天) 和重现性( 批内、批间差异R S D 9 9 ) ，尿酸( U A ， 9 9 ) ，多巴胺( D A ， 9 9 ) ，壳聚糖( C S ，脱乙酰度：9 0 9 5 ) ，三羟甲基氨基甲烷( T r i S ， 9 9 9 ) ，过氧化氢( H 2 0 2 ，3 0 ) ，氯化钠( N a C I ， 9 9 ) ，氯化钾( K C l ， 9 9 ) ，无水氯化钙
