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1、曲阜师范大学硕士学位论文复方滋阴中药对训练大鼠抗疲劳能力影响的研究姓名：葛仁锴申请学位级别：硕士专业：运动人体科学指导教师：刘洪珍200604018 8 2 8 6 l中文摘要1 研究目的通过实验观察复方滋阴中药和运动训练对大鼠血清I G F I 、骨骼肌能量代谢相关酶、抗氧化酶及运动能力的影响，探讨复方滋阴中药在抗运动性疲劳方面的作用及机制。为复方滋阴中药在竞技体育中的应用与开发奠定一定的理论基础。2 研究方法将1 2 8 只雄性w i s t a r 大鼠随机分为安静对照组( A 组) 、单纯运动组( B组) 、安静服药组( C 组) 、运动服药组( D 组) ，C 、D 组每天灌胃服用一
2、定剂量中药制剂，B 、D 组进行8 周的跑台训练。8 周后每组再随机分成安静、定量负荷、力竭即刻、力竭恢复1 2 小时4 个亚组处死后取材。分别测定血清I G F I 含量和骨骼肌中丙二醛( h l D A ) 含量及乳酸脱氢酶( L D H ) 、苹果酸脱氢酶( M D H ) 、超氧化物歧化酶( s 0 D ) 、谷胱甘肽过氧化物酶( G s H P x ) 的活性，并进行相关统计学检验。3 实验结果在安静、定量负荷、力竭即刻及力竭恢复1 2 h 状态下，B 组大鼠骨骼肌M D H 活性均显著性高于A 组( P 0 0 5 ) ；B 、e 、D 组大鼠骨骼肌除B 组L D H 活性显著高于
3、A 组外，其余各组L D H 、M D H 活性均极显著性高于A 组( P 0 0 5 ) ，说明长期运动训练可引起骨骼肌M D A 含量的增加，即骨骼肌组织产生自由基增多。图4 不同状态下M D A 含量出现这种结果的原因可能是不同实验所采用的运动强度及运动方式不同引起的：而复方滋阴中药可明显降低运动引起的M D A 含量的增加，说明本实验复方滋阴中药具有明显提高机体抗氧化能力，抑制脂质过氧化的作用。定量负荷运动、力竭运动即刻，B 、C 、D 组大鼠M D A 含量均显著性高于A 组( P O 0 5 ) ，也说明了本实验的运动强度对骨骼肌S O D 活性影响不大。对于大强度、急性运动、力竭
4、运动对骨骼肌S O D 活性的影响结论不一致。大部分人研究指出，在上述状态下骨骼肌s O D 活性应较对照组显著升高。吴小平等研究表明，大鼠5 0 m i n 游泳后即刻，无论是训练或未训练鼠腓肠肌S O D 均显著上升1 。袁建琴等人观察到，力竭运动后大鼠骨骼肌S O D 活性持续升高，运动后第2 天达峰值”“。贺洪等研究观察到，力竭或大强度运动后骨骼肌s 0 D 活性升高”1 。刘晓莉等人的实验结果显示，间歇性无氧运动各组小鼠骨骼肌S O D 酶的活性均较对照组显著增高( P o 0 5 ) ”。熊正英等通过建立力竭游泳训练模型，结果显示，运动后即安静定量力竭恢复：+ 组一。一B 组：一C
5、 组一 ：r ? 缉j图5 不同状态下S O D 活性刻和恢复2 4 h 小鼠骨骼肌S O D 活性高于安静组( P O 0 5 ) ，但其变化峰值出现在运动后即刻( P 0 0 5 ) 删；也有研究表明，骨骼肌S O D 活性在上述状态下显著下降。叶春等人研究指出，亚力竭性运动下，室温运动组大鼠骨骼肌中s 0 D活性较室温安静组下降( P 0 0 1 ) 3 。陈理标等人实验观察到，力竭游泳组小鼠骨骼肌s O D 、L D H 活性显著下降“”。陶占泉等人研究指出，骨骼肌s o D的活力在运动后即刻、1 2 h 、1 6 h 及2 0 h 均显著下降删。本实验结果中，在力竭状态及力竭恢复1
6、2 h 时，B 组大鼠骨骼肌中S O D 活性较对照组有所升高，但无显著性差异。这提示力竭运动对骨骼肌s O D 活性变化的影响不大。这与许云霞等人研究的结果相一致”。出现上述这些不同结果的原因可能有以下几点：( 1 ) 实验采用的训练方式不同。实验中有的采用跑台训练：有的采用2 4| 瞢姗啪瑚= o B m o游泳训练，游泳力竭时，老鼠处于求生的本能力竭比较彻底。跑台训练力竭标准主要靠人的主观判断，老鼠往往不能真正达到力竭状态。( 2 ) 实验采用的训练强度不同。力竭过程中运动速度、负重的不同都可能影响实验结果。( 3 ) 实验对象标准的差异。实验对象的年龄、性别、体重等条件的不同，也可能是
7、结果不同的原因之一。季丽萍等人的实验结果显示，经过6 周训练后2 0 月龄大鼠s O D 活性与同龄对照组相比均显著升高，结果还显示，经过训练后3 月龄和1 2 月龄大鼠骨骼肌内s O D 活性下降，作者认为出现这种结果可能是该训练强度对中青年大鼠骨骼肌刺激较小，未能引起机体产生适应性变化，抗氧化能力未得到较大提高。同时S O D 因清除由于运动而产生的过多氧自由基而被大量消耗o ”。由此可知，同一运动对不同年龄组来说负荷是不同的，所以效果也不同。中药在提高骨骼肌S O D 方面的作用已被许多实验证实。本实验结果中，四个状态下，c 、D 两组骨骼肌s 0 D 活性，显著的高于A 、B 组，力竭
8、状态、力竭恢复1 2 h 下D 组骨骼肌S O D 活性较C 组也显著增加。这表明，实验用复方滋阴中药能够提高骨骼肌S O D 活性，提高氧自由基的清除效率，减少其对机体组织的破坏作用，从而提高机体的抗疲劳能力。复方滋阴中药的这种作用与运动具有协同作用，可明显提高运动机体骨骼肌s 0 D 的活性。吴宏军等实验指出，壳寡糖能非常显著的促进骨骼肌s O D 活性的增加( P o 0 1 ) 1 。熊正英等人实验观察到，安静时芦荟组小鼠骨骼肌s O D 、G S H P X 活性高于安静对照组( P O 0 5 ) ；运动后即刻和恢复2 4 h 芦荟组小鼠骨骼肌s O D 、G s H P x 活性
9、显著高于相应对照组口 o 0 5 )“。韩醅等人通过实验观察蒙药复方丹参溶液( 丹参、降香、自檀香、山奈等) 对大鼠肢体缺血一再灌注多脏器损伤中的作用时指出，复方丹参溶液能够提高缺血一再灌注损伤组织的s O D 活性，从而加速因缺血一再x显。谷胱甘肽过氧化物酶( G s H P x ) 是体内广泛存在的一种催化过氧化氢分解的重要酶，主要处理来自线粒体、内质网的过氧化氢，它可以催化脂质氢 过氧化物( 删1 ) 或H 2 0 2 与还原型谷胱甘肽( G s H ) 反应生成氧化型谷胱甘肽( G s s H ) ，起到保护细胞膜结构和功能完整性的作用。本实验结果中( 如图6图6 不同状态下G S H
10、 P X 活性所示) ，安静状态、定量负荷、力竭恢复1 2 h 三种状态下，B 组大鼠骨骼肌G S H P X 活性较对照组有明显的升高，力竭状态下有所升高但没有显著性差异。这说明长时间的运动训练、定量负荷运动可以提高大鼠骨骼肌G s H _ P x活性，提高抗氧化能力，促进机体对运动产生的过氧化氢分解，减少其对机体的损伤作用，提高机体抗疲劳能力。郭海英等报道，耐力训练使大鼠骨骼肌安静状态G s H P x 活性升高”1 。Q u i n t a n i l h a 等研究表明，经耐力训练的大鼠血s o D 、G s H P x 的活性提高1 。韩春华等研究证实，急性运动引起骨骼肌线粒体G S
11、 H P X 活性明显增高。任昭君实验观察到，大鼠骨骼肌中谷胱甘肽过氧化酶活性在安静状态下，小、中及大强度训练3 组明显高于对照组”1 。但也有学者研究表明，低强度的有氧耐力训练对提高肌组织的抗氧化能力效果不够明显。刘洪珍等采用两种不同的有氧训练方式对大鼠进行7 周的运动训练后，结果发现安静时小腿三头肌中，s 0 D 和G s H P x 活性略有下降。“。这可能与实验采用的运动方式、运动强度、运动时间等有关。短时间、小强度的运动训练对机体来说是种强度比较小的刺激，这种情况下机体不会产生大量的自由基，也就不能引起抗氰化酶的显著升高。相反，长时间、大强度的训练时机体产生自由基明显增多，通过各种途
12、径刺激机体抗氧化酶活性的增加，加速过量自由基的清除。当然时间、强度也需要有一定的度，力竭运动作为一种损伤比较大的运动强度，可引起自由基的大量增加，机体抗氧化酶活性的增加不足以满足消除大量自由基的需要。本实验结果也表明，机体力竭运动即刻组大鼠骨骼肌G S H P X 活性有所升高，但较对照组没有明显的差异。郭林等报道，大鼠在跑台运动至力竭时，骨骼肌红肌匀浆中S o D 活性升高不显著。G S H P X 活性下降较显著“”。这说明力竭运动对骨骼肌G S H - P x活性提高不明显，出现这种现象的原因主要是，力竭运动时组织产生大量自由基G S H P X 被大量消耗；另外力竭运动时组织损伤加重，
13、骨骼肌G S H P X 大量释放到血液中。实验结果中，力竭恢复1 2 H 组大鼠骨骼肌G s H P X 明显回升，并恢复到较高的水平，加速体内大量自由机的清除。另外，实验结果中四种状态下，c 、D 组大鼠骨骼肌G s H P X 含量显著性高于A 、B 组，说明实验用的复方滋阴中药能够很好的促进机体骨骼肌G S H P X 活性增加，提高机体对自由基的清除效率，从而提高机体抗疲劳能力。任昭君o ”等实验指出，补充复方抗氧化制剂( 人参、枸杞、核桃、芦笋、石榴、芦荟等) 组、补充训练组大鼠骨骼肌中S O D 、G s H P x 活性都高于对照组。熊正英等实验观察到，安静时芦荟组小鼠骨骼肌S
14、 O D 、G s H P x 活性、总抗氧化能力高于安静对照组，运动后即刻和恢复2 4 h 芦荟组小鼠骨骼肌S o D 、G s H P X 活性、总抗氧化能力显著高于相应对照组( P O 0 5 ) “”。贺洪等报道，人参皂甙R g l 给药组在游泳后l h 的G s H P X 活性与安静组的差异有显著性意义”1 。从上述的讨论可以看出，本实验所用复方滋阴中药自身或协同运动训练，可有效的提高机体在不同状态下的抗氧化酶的活性，增强机体的自由基清除能力，减少因过量自由基对机体的损伤作用，从而提高机体抗疲劳能力，增强运动能力。 4 4 复方滋阴中药及运动训练对大鼠运动能力的影响本实验结果中(
15、如图6 ) ，运动训练组、单纯用药组力竭时间均明显长于对照组( P O 0 5 ) ，说明长时间运动训练及本实验所用中药均可提高机体运动能力。中药运动组大鼠力竭时间非常显著性的高于对照组，并且较运动训练组、单纯用药组大鼠力竭时间也有明显提高( P 0 0 5 ) 。这充分说明，本实验所用复方滋阴中药能够很好的提高大鼠的运动能力，并且和运动训练有协同作用，两者同时使用对提高机体运动能力有非常显著的作用。图6 各组大鼠力竭时间周志宏等人实验提出，补肾益元方组小鼠游泳至力竭时间较运动对照组明显延长( P 0 0 5 ) 。1 。丁莉等人实验表明，枸杞能显著提高小鼠运动耐力时间，提示枸杞具有提高小鼠耐
16、力及抗疲劳的作用汹1 。综上所述，运动训练和复方滋阴中药制荆可通过影响大鼠骨骼肌能量代谢、自由代谢相关酶的活性，提高骨骼肌能量供应，加速运动引起的过量自由基的消除，减少过量自由基对机体的损伤作用；并通过调节骨骼损伤修复相关环节，提高机体微损伤修复，提高机体抗疲劳能力，进而提高运动能力。但中药具体是通过什么方式提高骨骼肌能量代谢、自由代谢相关酶活性的，目前还不清楚，有待继续研究。5 、结论，5 1 运动训练对血清I G F I 的影响不大，而复方滋阴中药制剂能够提高血清I G F I 含量，促进微损伤修复，提高机体运动能力和抗疲劳能力。5 2 运动训练能够有效提高骨骼肌能量代谢相关酶L D H 、M D H 及自由基代谢相关酶G S H _ P x 、s o D 的活性，提高机体的能量供应和抗氧化能力，增强机体抗疲劳能力。5 3 复方滋阴中药制剂能够并协同运动训练提高骨骼肌能量代谢相关酶L D H 、M D H 及
