实验性自身免疫性重症肌无力小鼠滤泡辅助性T细胞的表达及其与自身抗体的相关性研究

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1、研究生个人简介辛宁,女,1 9 8 6 年1 2 月出生,江苏徐州人,党员。学习经历及任职情况:1 9 9 3 年至1 9 9 9 年江苏省徐州市马市街小学1 9 9 9 年至2 0 0 2 年江苏省徐州高级中学初中班长2 0 0 2 年至2 0 0 5 年江苏省徐州高级中学高中班长2 0 0 5 年至2 0 1 0 年徐州医学院临床医学系本科团支部书记2 0 1 0 年至今攻读徐州医学院神经内科硕士学位副班长本科获奖情况:2 0 0 5 2 0 0 6 学年度,荣获校一等级奖学金,优秀团员,团日活动先进个人等2 0 0 6 2 0 0 7 学年度,荣获校二等级奖学金,优秀团干,优秀学生干部等

2、2 0 0 7 2 0 0 8 学年度,荣获校二等级奖学金,三好学生、迎评促建先进个人等2 0 0 8 年9 月:“迎母校华诞,展徐医风采”主题党日活动中获最佳组织奖2 0 0 8 2 0 0 9 学年度,荣获校一等级奖学金,三好学生等2 0 1 0 年7 月:荣获徐州医学院优秀毕业生称号英语考试情况:C E T 0 6 级执业医师考试:己通过计算机能力:江苏省二级研究生导师及相关课题:导师:沈霞教授指导老师:张勇博士参与课题:( 10 K J D 3 2 0 0 0 3 ) 徐州医学院院长专项基金( 8 1 0 7 2 4 6 5 H 1 0 0 8 ) 国家自然科学基金研究生期间研究方向:

3、神经肌肉疾病研究生期间所发表文章:1 滤泡辅助性T 细胞( T m ) 与自身免疫性疾病的研究进展国际免疫学杂志2 0 1 3 ,3 6 ( 1 ) :2 0 2 4 2 E x p r e s s i o no fI n t e r l e u k i n - 2 2i nm y a s t h e n i ag r a v i s S c a n dJI m m u n 0 1 2 013A p r2 6 d o i :1 0 1 1 1 1 s j i 1 2 0 5 7 E p u ba h e a do f p r i n t 】3 L e n t i v i r a l - m e

4、 d i a t e dR N AI n t e r f e r e n c eT a r g e t i n gB c l - 6a m e l i o r a t e se x p e r i m e n t a la u t o i m m u n em y a s t h e n i ag r a v i s ( J o u r n a lo f N e u r o i m m u n o l ,己修回)4 O v e r e x p r e s s i o no fm i c r o R N Am i R - 14 5a m e l i o r a t ee x p e r i m

5、e n t a la u t o i m m u n em y a s t h e n i ag r a v i sv i aS u p p r e s s i n gT h l7C e l lG e n e r a t i o n ( J o u r n a lo fN e u r o i m m u n eP h a r m a c o l o g y ,已修回)5 R e s e a r c hp r o g r e s so ni n t e r l e u k i n 一2 2a n di t sr o l e si nt h en e u r o l o g i c a ld i

6、s e a s e s ( J o u r n a lo ft h eN e u r o l o g i c a lS c i e n c e s ,己修回)目录缩略词表。1中文摘要。3A b s t r a c t - - 5前言一8材料和方法1 21 材料1 22 方法1 4结果2 6讨论4 5结论5 3参考文献一5 4综述6 3攻读硕士学位期间发表学术论文7 3l 缶床培训小结7 4致谢7 6论文独创性声明7 7论文审阅认定书7 8徐州医学院硕士学位论文缩略词A c h RA c h R A bA I DB c l 6B l i m p 一1B S AC F AC X C R 5E A

7、M GE L I S AF B SF C MF D CG CI LTM GN M JO D缩略词表A b b r e v i a t i o n英文全称A c e t y l c h o l i n er e c e p t o rA c e t y l c h o l i n er e c e p t o ra n t i b o d yA u t o i m m u n ed i e a s eBc e l ll y m p h o m a6中文全称乙酰胆碱受体乙酰胆碱受体抗体自身免疫性疾病B 细胞淋巴瘤6Bl y m p h o c y t e i n d u c e dm a t u

8、r a t i o nB 淋巴细胞诱导成熟蛋白p r o t e i n1B o v i n es e r u ma l b u m i n牛血清白蛋白C o m p l e t ef f e u n d sa d j u v a n t完全弗氏佐剂C X Cc h e m o k i n er e c e p t o r5C X C 型趋化因子受体- 5E x p e r i m e n t a la u t o i m m u n em y a s t h e n i a 实验性自身免疫性重症g r a v l s肌无力E n z y m el i n k e di m m u n o s

9、 o r b e n ta s s a y酶联免疫吸附试验F e t a lb o v i n es e r u mF l o wc y t o m e t r yF o l l i c u l a rd e n d r i t i cc e l l sG e r m i n a lc e n t e rI n t e r l e u k i nI m m u n o b l o t t i n gM y a s t h e n i ag r a v i sN e u r om u s e u l a rj u n e t i o nO p t i c a ld e n s i t y胎牛血清

10、流式细胞术滤泡树突状细胞生发中心白介素免疫印迹法重症肌无力神经肌肉接头光密度徐州医学院硕士学位论文P BP B SP F AR AS L ES P S ST mT hP e r i p h e r a lb l o o dP h o s p h a t e - b u f f e r e ds a l i n eP a r a f o r m a l d e h y d eR h e u m a t o i da r t h r i t i sS y s t e m i cl u p u se r y t h e m a t o s u s外周血磷酸盐缓冲液多聚甲醛类风湿性关节炎系统性红斑狼疮

11、S t a t i s t i c a lp a c k a g ef o r t h es o c i a lS P S S 统计软件包s c i e n c eTf o l l i c u l a rh e l p e rc e l lH e l p e rTc e l l s2滤泡辅助性T 细胞辅助T 淋巴细胞徐州医学院硕士学位论文实验性自身免疫性重症肌无力小鼠滤泡辅助性T 细胞的表达及其与自身抗体的相关性研究中文摘要目的研究实验性重症肌无力( E A M G ) 小鼠体内T f l a 表型( C D 4 + C X C R 5 + T )细胞群变化以及相关分子B c l 一6 和I

12、L 2 1 的表达情况,探讨T f h 细胞在M G 发病中的作用,并分析T f l a 表达与自身抗体产生的相关性。方法1 、首先建立E A M G 模型。准备3 0 只C 5 7 B L 6 J 小鼠,雌性,6 8 周,体重1 8 2 5 9 ,S P F 级,随机分为:完全弗氏佐剂组( n = 1 2 ) ;E A M G 组( n = 1 2 ) ;以2 0 9 9t A c h R 溶于1 0 0 9 l 生理盐水( N S ) 中,然后与1 0 0 9 l 等体积C F A 充分混匀,制成抗原乳剂,分别于C 5 7 B L 6 小鼠的双后肢足垫处以及双肩部的皮下分别注射5 0 山抗

13、原乳剂,建立E A M G 小鼠模型。C F A 组仅注射等体积N S 与C F A 的混合乳剂。然后初次免疫后第3 0 天和第6 0 天进行重复免疫一次,每天观察E A M G C F A小鼠临床评分的变化。免疫后第3 0 ,5 0 ,7 0 天分别对E A M G 组和C F A 组小鼠进行尾静脉采血,E L I S A 检测血清抗A C h R 抗体总I g G 、I g G l 、I g G 2 a 、I g G 2 b 和I g G 2 c含量以及相关分子1 I - 2 1 的表达。并且进行血清抗A C h R 抗体总I g G 与血清I L 2 1表达的相关性分析。2 、初次免疫后

14、9 0 天,处死小鼠,E L I S A 检测血清抗A C h R抗体总I g G 、I g G l 、I g G 2 a 、I g G 2 b 和I g G 2 c 含量以及T t h 相关分子I L - 2 1 的表达;流式检测外周血、淋巴结及脾细胞C D 4 + C X C R 5 + T 细胞的比例;对脾细胞、淋巴结细胞进行磁珠分选,选出C D 4 + T 细胞,提蛋白,W e s t e r n b l o t 检测C D 4 + T 细胞中B c l 6 的表达;进行外周血、淋巴结、脾脏C D 4 + C X C R 5 + T 细胞比例与血清抗A C h R 抗体总I g G 、I L 2 1 的相关性分析。结果l 、在整个过程中,C F A 组小鼠无明显症状,临床评分一直在0 5 分以下;E A M G 组小鼠在免疫后第6 0 天临床评分逐渐上升,并在第8 0 天( 疾病高峰期) 与C F A 组有显著差异( P 0 0 5 ) 。在初次免疫后第5 0 天,E A M G 组较C F A 组小鼠血清中抗A C h R 抗体I g G l 、I g G 2 b 水平显著升高,差别有统计学意义( P O 0 5 ) 。初次免疫后第7 0 天,E A M G 组较C F

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