《生化检测系统性能验证》由会员分享，可在线阅读，更多相关《生化检测系统性能验证（60页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 生化检测系统性能验证生化检测系统性能验证 赵钰玫赵钰玫 联系电话联系电话:023-63510942 邮箱邮箱: 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 2012.07.12 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 我国的医疗机构临床实验室管理办法和国际 标准化组织针对医学实验室颁布的ISOl5189一医学 实验室质量和能力认可准则的国际标准中都要求 ，设备在临床应用之前必须要进行性能验证，以 确定设备能达到所要求的性能指标。 设备的性能是否合格，对检验的结果起决定性的 作用。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 性能评价 自行研究或开发了一个检测方法，为了使
2、方法的 检测结果符合临床要求，必须对方法的性能作详 细而全面的实验，这时的实验是对性能的评价。 通常是生产厂家完成 性能验证 对他人或厂商的评价资料中的几个主要性能的证 实。 实验室自己完成 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 性能验证试验 对配套系统（什么是配套系统），一般验证下列 指标： 准确度(accuracy)-EP-15 精密度(precision)-EP-5 可报范围(reportable range)-EP-6 参考区间(reference interval)-C28-A2 对非配套系统，验证更为广泛。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 什么时候做 方法/系统首次在实验室使
3、用； EQA/PT 结果未通过，采取纠正措施后； 达到文件规定周期 性能验证试验 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 性能验证试验 实验条件 仪器的维护保养 仪器校准 室内质控 试剂、校准品（有效期、批号等） 人员（SOP） （仪器的最佳状态） 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 一、精密度实验 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 精密度试验 精密度(precision): 在规定条件下获得的独立测量 结果之间的接近程度。 重复性(repeatability) 中间精密度(intermediateprecision) 重现性(reproducibility) 实验室内精密度（within
4、-labprecision) 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 精密度试验 基本概念 重复性是指在相同条件(时间、校准、操作者、仪器等)下 获得的精密度,即所谓的批内精密度; 中间精密度是指在一种或几种条件因素发生变化,但在同一 实验室内获得的精密度; 重现性则是在不同实验室、不同条件下获得的精密度,故又 称实验室间精密度。 实验室内精密度：同一实验室内，使用同样的设备，由不 同操作者在不同时间内获得的精密度，以前曾被称为总精 密度（不包括大的设备维护、仪器校准和更换试剂批号） 。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 精密度试验 文件依据 CLSI （原NCCLS）颁布的EP5-A2文件
5、定量测量方 法的精密度性能评价-批准指南第二版 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 精密度试验 实验方法 批内精密度 在最大限度的相同测量条件下，在最短时间内 ( 常是在同一测量批次内)对同一样品测量20次，由 此计算出批内精密度。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 批间精密度 特指在同一实验室，由同一（组）操作者在同一 仪器上，使用同一方法和同种、同一批号试剂， 在一段时间内(一般为一个月或20个工作日) 对同 一样品（常为质控品），每天2次，每次双份测定 ，测量结果的精密度。如果取得稳定样品有困难 ，也可改为测5日，每批每个水平作4次重复检测 ，计算出批间精密度。 重庆市临床检验中心
6、重庆市临床检验中心 精密度试验 用于评估试验的样品 一般常采用临床实验室收集的稳定和冷冻贮存的 血清(浆)库;当实验室收集的样品不稳定或不易得 到时，也可考虑使用稳定的、以蛋白质为基质的 商品，如厂家的校准品和质控品。本试验采用日 常工作中的室内质控品。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 精密度试验 样品浓度 一般而言，精密度大小和样品浓度有关，样品浓度高时， 虽然标准差的绝对值会较大，但变异系数往往变小。反之 亦然。所以评估精密度时，建议评估高低二个浓度的精密 度。当二个浓度的精密度有显著差异时，建议增加为三个浓度。 所选浓度应为在测量范围内有医学意义的值，即至少有一个浓度在医学决定水平
7、(medical decision levels)左右。不要 为了得到较小的精密度，都选用较高值的样品，甚至超出甚至超出 测量范围测量范围。也不应选用靠近最低检出限的样品，此时所得的精密度往往偏大。 如没有医学决定水平，可在参考区间上限左右选一个浓度。此外再根据检验项目的性质在线性区间内选择一个值。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 精密度试验 试剂和校准品 评估批内精密度时，要求在整个评估阶段，尽可 能使用相同条件，应使用同一种类同一批号的试 剂和校准物,如有可能,只进行一次校准。使用不同 批号试剂和多次校准都会增加检验结果的变异程 度。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 精密度试验
8、 质量控制 检验时应同时至少测一个质控品。当质控品结果 超出规定的失控限，不论实验结果是否满意都应 弃去不用，重新进行试验以取得实验数据。要保 存所有的质控数据和失控处理记录。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 精密度试验 数据收集 在进行数据分析前，检查数据中有无由于偶然差错引起的 离群值(outliers)，可用下述离群值的标准:任何结果和总均 值的差超过4个标准差。 为了能收集到至少20个有效数据。除补充由于质控失控 而增加的测试外，还应再增加由于离群值不用于精密度的 计算所需增加的检验次数。在进行这种批内精密度评估实 验时，一次只能有一个离群值，当不接受数据超过2个， 应怀疑是否为
9、方法不稳定或操作者不熟悉所致。此时应不 用此次试验数据。检查问题和解决问题后重新开始新的评 估实验。 必须保留任何离群值和室内质控失控的记录。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 精密度试验 结果分析结果分析 计算均值、标准差和变异系数。从CLIA 88允许误 差表中查阅评价的该项目的允许误差范围。 1、判断标准、判断标准 批内精密度CV值要求低于1/4 CLIA 88允许误差， 批间精密度CV值要求低于1/3 CLIA 88允许误差 。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 2、没有CLIA 88允许误差范围的项目； EQA的允许误差 试剂说明书提供 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心
10、精密度试验 应用实例 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 二、准确性验证实验二、准确性验证实验 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 准确性验证实验准确性验证实验 准确度(accuracy): 一次测量的结果与被测量真值的 接近程度。 正确度(trueness): 真实度，大量测量的均值与真值 的接近程度。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 准确性验证实验准确性验证实验 文件依据 CLSI 颁布的EP15-A文件用户对精密度和准确度 性能的核实指南 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 准确性验证实验准确性验证实验 实验方法 参加卫生部临床检验中心室
11、间质评 测定具有溯源性的标准物质物质 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 准确性验证实验准确性验证实验 应用实例 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 三、可报告范围验证实验三、可报告范围验证实验 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 可报告范围验证实验可报告范围验证实验 基本概念 线性范围（Linear Range)是指系统最终的输出值（浓度或 活性）与被分析物的浓度成正比的范围。 分析测量范围（Analytical Measurement Range）方法直接 测量标本，而不需要任何的稀释、浓缩或者其它预处理等 过程下，测量结果总误差符合要求的分析物浓度的范围。 临床可报告范围（Clin
12、ically Reportable Range)是方法可采 用对标本的稀释、浓缩或者其他预处理用于扩展直接分析 测量下的分析物值的范围。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 可报告范围验证实验可报告范围验证实验 可报告范围（Reportable Range）：实验室可建立 或验证仪器或检测系统测量相应的准确度实验结 果值的范围。（CLIA） 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 可报告范围验证实验可报告范围验证实验 文件依据 CLSI 颁布的EP6-A文件定量测量方法的线性评价定量测量方法的线性评价 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 可报告范围验证实验可报告范围验证实验 仪器 应有较好的
13、测定精密度及不存在明显的携带污染 等。对仪器应进行定期维护及校准，保证其处于正常状态。 试剂 应注意试剂有效期及批号，不可采用过期试剂或 不同批号的试剂。 校准品 可采用与评价试剂配套的校准品。校准品的使用 应严格按照产品说明，仪器校准步骤与间隔应按照本室的标准操作程序进行。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 可报告范围验证实验可报告范围验证实验 样品类型 为避免基质效应对结果的影响，选用的样品应与 临床实验样品相似，但不可采用含有对测定方法 具有明确干扰作用物质的样品，如溶血、脂血、 黄疸或含有某些特定药物的样品。样品物浓度应 包括试剂厂商提供的试剂所能达到的线性范围。 重庆市临床检验中
14、心重庆市临床检验中心 可报告范围验证实验可报告范围验证实验 样品制备 收集临床检测过程中的高值样品（H）和低值样 品(L)，若收集不到低值样品，可用生理盐水或蒸 馏水替代。将H和L样品按：1L、3L+1H、2L+2H、 1L+3H、1H关系各自配制(必要时可改变比例)混合 ，形成系列评价样品。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 可报告范围验证实验可报告范围验证实验 样品测定 在进行线性范围确立时，应进行7-11个浓度水平 的样品测定，每个样品重复测定2-4次。进行可报 告范围验证时，应进行5个浓度水平的样品测定， 每个样品重复测定2次。如果测定方法本身存在明 显的携带污染，应根据实际情况采
15、取恰当措施尽 量避免对测定结果的影响。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 可报告范围验证实验可报告范围验证实验 结果分析结果分析 1、以预期值为横坐标，以实测值为纵坐标进行 线性回归，得到直线回归方程YaX+ b ， a在0.97 1.03范围内，r20.95 ； 2、偏倚在允许误差范围之内。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 可报告范围验证实验可报告范围验证实验 应用实例 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 四、参考区间的验证四、参考区间的验证 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 参考区间的验证 实验目的实验目的 验证已知参考区间在本实验室应用的可接受性。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 参考区间的验证 实验方法实验方法 1、从健康人群中抽出20个参考个体（最好能够 覆盖各个年龄段），依照实验室标准操作规程检 测样本。 2、发现离群值应弃用，并新的参考个体代替， 以确保测试结果不含离群值。 重庆市临床检验中心重庆市临床检验中心 参考区间的验证 3、如果20例参考个体中不超过2例（10的结果） 的检测值在参考区间外，则已知的参考区间可以 接受。若3例以上超出界限
