大鼠三叉神经本体觉中枢通路中PAG、PV样阳性神经元和VGluT1样阳性终末的分布、发育及联系

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1、第四军医大学硕士学位论文大鼠三叉神经本体觉中枢通路中PAG、PV样阳性神经元和 VGluT1样阳性终末的分布、发育及联系姓名:庞有旺申请学位级别:硕士专业:人体解剖与组织胚胎学指导教师:李金莲2003.4.1独剑性声明秉承学校严谨的学风与优良的科学道德本八声明所呈交i i 论文是我个八在导师指导下进行的研究工f f7 趸取得的研究成果尽我所知除了文中特别加以标注和致谢的地方9 论文中不笆舍其他八已经发表或撰写过的研究成果不包含本八或他八已申请学i 立或其他用途使用过i i 成果与莪一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢申请学位论文与资料若有不实之处本八承担一

2、切相关责任黻旧蔓各礁鱼兰日期i 文作者蔓各7 生! ! 二二:日期保护知识产权声明本八完全了解第四军压大学肓关i 呆护知识产权的规定,即:研究生在校攻读学位期问论文工作i i 知识产杖单1 立属第四军医大学本八保证毕业离较后,发表论文或使用论文工作戚累I i 署各单垃仍然为第四军医大学学校有权保留送交论文的夏印件,允许论支被查问和借间:学校可以公布论文的全部或部分内容( 保密内容除9 ) 可联采用影印、缩印或其他复制手段保存论文论文作者蔓各互i ! 二导师蔓名二i 三垒边日期:坌r 61第四军医天学硬士学位论文大鼠三叉神经本体觉中枢通路中P A G 、P V 样阳性神经元积V G I u T

3、l 样阳性终末的分布、发商及联系硕士研究生导师庞有硅李金莲教授接要f 率教研室以往的研究已证实:传递三叉神缀本体感觉傣息的中枢通路 、 为存在于三叉神经中脑核( m e s e n c e p h a l i ct r i g e m i n a ln u c l e u s ,V i n e ) 葺珏丘膝黢螽内铡核( v e n t r a lp o s t e r o m e d i a ln u c l e u s ,V P M ) 之阉的分别农三级秘露缀牢率经元缮残酌两条平行遴路。在该遴路中,谷氨酸( g l u t a m a t e ,G l u ) 是主瑟的兴脊住神经递质,雹!

4、自粪鱼( p a r v a l b u m i n ,P V ) 是主要的钙缩台蛋白,它们在口面部本伴感觉信息的传递中超着壅婺作厢。毒 璧鳇擞适鲤签氯毯膪酶( p h o s p h a t ea c t i v a t e dg l u t a m i n a s e ,P A G ) 能催化冰解谷氨酰胺产生G l u 和氨,是中枢G l u 的主要来源。目前P A G 已被用作研究G l u 自2 神经霾的特异性标识物。p V 是生物体内的一种钙结合蛋白,在躯抟取兰叉享孛经本体觉通路巾大量袭达。尽管其功黢曩裁还痒在争议,僵是许多辫究忍经涯实在发窍过稷孛P V 熬表达与穗经元懿功9 2 戚

5、熬稻一致。箍两特殊豹辩a + 依赣的盂狐磷酸转运体( b r a i n - s p e c i f i cN d d e p e n d e n ti n o r g a n i cp h o s p h a t et r a n s p o r t e r , B N P I ) 憝一种囊泡簇谷氨酸转运体,已被命名为! 型塞渔堕查氦醒挂重釜( v e s i c l eg l u t a m a t et r a n s p o r t e ro f t y p e1 V G I u T l ) 。最近的研究表明:V G l u T I 主要分布予脑内大部分非对称性突触的突触前囊泡麒上,而

6、在对称性突触的突触前囊泡膜上没有分销四军医大学硕= b 学位论文大鼠脑干内三叉神经本体觉中枢通路中P v样阳性神经元的分布和发育jf 本研究应用免疫组织化学方法对大鼠脑干内三叉神经本体觉中枢通路中P V 样阳性神经元的分布和发育进行了观察。结果如下:早在胚胎1 3 天时,首先在V m e 内观察到P V 样阳性神经元,主要为太的假单极神经元,呈中等阳性反应。生后3 天,V m e 内P V 样阳性神经元的数量明显增多,免疫反应呈强阳性。生后1 0 天,三叉神经脊束核吻侧亚核背内侧部( t h ed o r s o m e d i a lp a r tc ft h es u b n u c l

7、e u so r a l i so ft h es p i n a lt r i g e m i n a ln u c l e u s ,V o d m ) 及三叉神经感觉主核背内侧部( t h ed o r s o m e d i a lp a r to ft h ep r i n c i p a l2第四军医大学硕士学位论文s e n s o r yt r i g e m i n a ln u c l e u s ,V p d m ) 均出现少量中等强度的P V 样阳性神经元;生后1 4 天,三叉神经脊束核吻侧亚核邻接的外侧网状结构( t h el a t e m lr e t i c u

8、 l a rf o r ma t i o n ,L R F ) ,三叉上核尾外侧部( t h ec a u d o l a t e r a lp a r to ft h es U p r a t r i g e m i n a ln u c l e u s ,V s u p C L ) ,三叉神经运动核腹侧区( a r e av e n t r a lt ot h em o t o rt r i g e m i n a ln u c l e u s ,A V M ) 及上橄榄核背侧区( a r e ad o r s a lt ot h es u p e r i o ro l i v e r )

9、 , n u c l e u s ,A D O ) 均出现P V 样阳性神经元。生后2 1 天,V o d m L R F区及由V p d m V s u p 。C L 、A D O 和A V M 组成的“带状区”内P V 样阳性神 经元及纤维舶分布均达成年水平。、 以上结果提示:V m e 内P v 样阳性神经元的功能成熟发生于胚胎1 3天到生后3 天,而V o d m - L R F 和“带状区”内P V 样阳性神经元的功能成熟则发生于生后1 0 天到2 1 天。第二舌芦分大鼠脑干内三叉神经本体觉中枢通路中P A G样阳性神经元的分布和发育jf 为了探明大鼠脑干内三叉神经本体觉中枢通路中G

10、 l u 能神经元的功能成熟时程,本研究应用免疫组织化学方法对P A G 样阳性神经元的分布和发育进行了观察。结果显示:于胚胎1 7 天,首先在V i n e 内观察到P A G样阳性神经元胞体大,呈中等强度免疫阳性,随着发育其免疫阳性逐渐增强。并于生后1 0 天达到成年水平。在二级和三级核团内,直到生后1 0 天才在A V M 和A D O 内观察到中等强度的P A G 样阳性神经元;在生后1 2 天,V o d m 和V p d m 内也观察到P A G 样阳性神经元。随着发育进展,二级和三级核团内越来越多的神经元呈P A G 样免疫阳性,并于生后2 1 天,笫心车氏人学硕J 学位论文n

11、:I 。R F 刺V s u p C L 内观察到P A G 样阳性神经元。山于发育过程- ” 绎元表达P A G 意味着其合成G l u 能力的成熟。此以上结果提示:V m e 内G I u 能神经元的功能成熟发生存胚胎1 7 天到生后1 0 入,V o d mL R F 和“带状区”内G l u 能神经元的功能成熟发, i 在牛后1 0 灭到2 1 天。-第三部分生后大鼠脑干内三叉神经本体觉中枢通路中V G l u ! 、l 样阳性终末的分布、发育以及与P A G 或P V 样阳性神经元之间的联系f应用免疫 I l 织化学不免疫荧光组织化学技术,在光镜和激光共聚焦显微镜下观察了生后人鼠脑丁

12、内三义神经本体感觉中枢通路中V G I u T I 样阳性纤维终术的分斫J 和发育,以及与P A G 或P V 杼阳性神经兀建曲联系的叫程,;在刈卜| f I 彳发育过程r p 大鼠脑干内三又神经本体觉中枢通路c p 兴_ 仓性联系的建立进行形态学研究。结果显示:生后0 天,V o d m 。L R F 和V p d m 内已有V G I u T l 样阳性纤维和终木分布。随着发育于牛后2 灭,V G I t ( I 1 样阳性纤维和终术丌始出现于A V M 、A D O 和V s u p C L 。生后10灭,相:V i n e 尾侧段观察到V G l u T l 样阳性纤维和终末,但分布较

13、稀疏。激光共聚焦显微镜下,于牛后1 2 天在V m e 内观察到一些V G I u T I 样性纤维终术与P A G 或P V 样阳性神经元建立密切接触;而在V o d m 。L R F和“带状区”内,P A G 或P V 样1 5 F I J 陛神经元一出现,即可观察到这些神经元的胞体或突起与V G I u T ! 样阳性纤维终末形成密切接触。以上结果提示:人鼠三叉神经本体觉中枢通路巾的兴奋性联系可能4第四军医大学硕士学位论文参与头面部本体感觉信息的传递和调控;其中参与头面部本体感觉信息传递的兴奋性联系的建立时间较早。J L 一墨婴兰堕查堂堡主堂垫堡壅D i s t r i b u t i

14、o n ,D e v e l o p m e n ta n dC o n n e c t i o n so fP A G o rP Vl i k eI m m u n o r e a e t i v eN e u r o n sa n dV G l u T l 1 i k eI m m n u o r e a e t i v eT e r m i n a l si nt h eR a tC e n t r a lP a t h w a yo fT r i g e m i n a lP r o p r i o c e p t i v eS e n s a t i o nP o s t g r a

15、 d u a t e :P a n gY o u w a n gS u p e r v i s o r :P r o f e s s o rL iJ i n l i a nA b s t r a c tI th a sb e e np r o v e db yo u rp r e v i o u ss t u d i e st h a tt h ec e n t r a lp a t h w a yo ft d g e m i n a lp r o p r i o c e p t i v es e n s a t i o nc o n s i s t so ft w op a r a l l

16、e lp a t h w a y sw h i c ha r ec o m p o s e do ft h r e e o r d e ra n df o u r - o r d e rn e u r o n s ,r e s p e c t i v e l y , l o c a t e db e t w e e nt h em e s e n c e p h a l i ct r i g e m i n a l n u c l e u s ( V i n e ) a n dt h ev e n t r a lp o s t e r o m e d i a ln u c e 1 3 s ( v P M ) o f t h a l a m u s I nt h i sp a t h w a y , g l u t a m a t e ( G l u ) a st h em a i ne x c i t a t o r yn e t t r o t r a n

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