IL6对CD5B细胞淋巴瘤化疗敏感性的影响及机制研究

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1、姓名张伟研究生个人简介出生年月1 9 8 8 年0 1 月政治面貌共青团员籍贯山东泰安性别女婚姻未婚民族汉族英语大学英语六级毕业院校徐州医学院专业内科学( 血液病学)学历硕士研究生毕业时间2 0 1 3 年0 7 月联系电话1 8 7 9 5 4 2 2 6 8 8邮箱Z h l 9 8 8 0 1 3 0 1 6 3 e o m英语、自然辩证法、科学社会主义理论与实践、医学统计学、计算机应用基础、医学免疫学、医学遗传学、医学论文写作、医学文献检索、 主修课程 临床流行病学、医学实验动物学、医用电子显微镜技术、医学多元统计方法及S A S 软件应用、医学分子生物学、专业课及专业英语等受教育经历

2、:2 0 0 2 年0 9 月至2 0 0 5 年0 6 月就读于泰西中学( 山东肥城)2 0 0 5 年0 9 月至2 0 1 0 年0 7 月就读于天津中医药大学( 天津)2 0 1 0 年0 9 月至2 0 1 3 年0 7 月就读于徐州医学院( 江苏徐州)科研培训:在硕士科研培训期间,先后协助导师及指导老师承担了多项重要实验任务,期问熟练掌握了细胞培养、W e s t e r nb l o t 、分子克隆等技术,并熟练掌握病理组织观察、流式细胞术等操作,获得了可靠的实验数据,到目前为止,已撰稿1 篇S C I 文章,1 篇课题相关综述( 已发表于国际输血与血液学杂志) 。临床培训:在研

3、究生临床学习期间,熟练掌握了血液科常见疾病如缺铁性贫血、再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合症、过敏性紫癜、免疫性血小板减少症、淋巴瘤及急慢性白血病的诊断、鉴别诊断及治疗,能较好地与病人及病人家属沟通,妥善处理临床相关问题。掌握了血液病学及相关学科的理论知识,工作期间多次参加危重症患者的急救,应对突发紧急事件沉着冷静有较强的应对处理能力,对病人热情、周到、耐心,能够胜任血液科及其他内科专业的工作。目录舢舢舢0 洲川刖咖IY 2 4 3 5 15 5缩略词表1中文摘要3英文摘要5第一部分I L 6 对C D 5 + B 细胞淋巴瘤化疗敏感性的影响材料和方法2 方法1 5结果2 2第二部分I L 一6

4、 降低C D 5 + B 细胞淋巴瘤化疗敏感性的机制研究材料和方法2 方法2 9参考文献4 3综j 述4 4攻读硕士学位期间发表学术论文题目5 l徐州医学院硕士学位论文缩略词A c rA PB i sB S AC Dd N T PN CT E M E DD E P CD M S OE BE D l 、AF B SS T A T 3英文全称a c r y l i ca m i d e缩略词表A b b r e v i a t i o na m m o n i u mp e r s u l f a t e中文全称丙烯酰胺单体过硫酸铵N ,N M e t h y l e n eB i s a c r

5、 y l a m i d e甲叉双丙烯酰胺b o v i n es e r u m a l b u m i nc l u s t e ro fd i f f e r e n t i a t i o n牛血清白蛋白分化抗原簇d e o x y n u c l e o t i d et r i p h o s p h a t e三磷酸脱氧核苷n i t r o c e l l u l o s ef i l t e rm e m b r a n e硝酸素纤维膜N ,N ,N ,N T e t r a m e t h y l e t h y l e n e d i a m i n eN ,N ,N ,

6、N 一四甲基乙二d i e t h y lp y r o c a r b o n a t e胺焦碳酸二乙酯d i m e t h y ls u l p h o x i d e二甲基亚砜e t h i d i u mb r o m i d e溴化乙锭E t h y l e n e d i a m i n e t e t r a a c e t i ca c i d乙二胺四乙酸f e t a lb o v i n es e r u m胎牛血清S i g n a lt r a n s d u c e ra n da c t i v a t o ro f信号转导子及转录激活t r a n s c r

7、i p t i o n - 3子一3T r i st r i s h y d r o x y m e t h y l a m i n o m e t h a n e三羟甲基氨基甲烷徐州医学院硕士学位论文I Lp HP M S Fr p mm R N AO DP B SP C RR T P C RI n t e r l e u k i n白介素h y d r o g e ni o nc o n c e n t r a t i o n氢离子浓度指数p h e n y l m e t h a n e s u l f o n y lf l u o r i d e苯甲基磺酰氟R e v o l u t

8、i o n sp e rm i n u t em e s s e n g e rR N Ao p t i c a ld e n s i t yp h o s p h a t eb u f f e r e ds a l i n ep o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o n每分钟转速信使R N A吸光度磷酸盐缓冲液聚合酶链式反应r e v e r s et r a n s c r i p t a s ep o l y m e r a s ec h a i n逆转录一多聚酶链反应r e a c t i o nq R T - P C Rq u a n t i

9、 t a t i v eR T - P C RR N AS D ST B ED N M T lr i b o n u c l e t i ca c i d实时荧光定量P C R核糖核酸s o d i u md o d e c y ls u l p h a t e十二烷基磺酸钠t r i s b u f i e r e ds a l i n eD N Am e t h y l t r a n s f e r a s e 一12T r i s 缓冲液D N A 甲基化转移酶一1徐州医学院硕士学位论文I L 6 对C D 5 + B 细胞淋巴瘤化疗敏感性的影响及机制研究中文摘要目的检测I L 一6

10、对C D 5 + B 细胞淋巴瘤化疗敏感性的影响,并探讨I L 6 协同C D 5分子在其肿瘤耐药中的作用机制。方法( 1 ) I L 6 对C D 5 + B 细胞淋巴瘤化疗敏感性的影响: R T - P C R 、E L I S A 法检测人源C D 5 + B 细胞淋巴瘤细胞系( H o5 0 5 T 细胞和J e k o l 细胞) 及C D 5 。B 细胞淋巴瘤细胞系( W S U F S S C L 细胞和D B 细胞) C D 5 一E 1 A 、C D 5 E 1 B 、I L 1 0 、I L 6及其受体( I L 一6 R a 、g P 一13 0 ) 的表达水平。 M T

11、 S 法检测四种细胞自身及I L 6( 10 n g m 1 ) 预处理后对柔红霉素、长春新碱的化疗敏感性。 W e s t e r nB l o t 检测柔红霉素作用后J e k o 1 细胞及I L 6 预处理后J e k o 1 细胞中凋亡抑制蛋白( B c l 2 、B c l X L 、M c l ) 的表达的影响。( 2 ) 选择C D 5 + B 细胞淋巴瘤系J e k o l 细胞及I L 一6 预处理J e k o 一1 细胞( I L 6 一J e k o 一1 细胞) 为研究对象,探索I L 6 协同C D 5 分子在B 细胞淋巴瘤肿瘤耐药中的作用机制:荧光定量P C R

12、 及E L I S A 法检测I L 一6 预处理前后J e k o 1 细胞C D 5 一E 1 B 、D N A 甲基转移酶一1 ( D N Am e t h y l t r a n s f e r a s e - I ,D N M T l ) 和I L 1 0 的表达变化。利用a n t i I L 一6 R 处理阻断I L 一6 信号通路,荧光定量P C R 及E L I S A 法检测阻断前后I L 6 J e k o l 细胞C D 5 一E 1 B 、D N M T l 和I L 一1 0 的表达变化。结果 H o5 0 5 T 细胞、J e k o 1 细胞表达C D 5 一E

13、 l A 、C D 5 一E 1 B ,自分泌I L 一1 0 ;W S U F S S C L 细胞、D B 细胞不表达C D 5 E 1 A 、C D 5 一E 1 B ,不分泌I L 1 0 。四种淋巴瘤细胞系均自分泌I L 一6 ,表达I L 一6 受体。J e k o l 细胞I L 6 表达量最高,H 0 5 0 5 T 细胞和D B 细胞自分泌I L 一6 的水平次之,W S U F S S C L 细胞自分泌I L 一6的水平最低。I L 一6 可不同程度地降低淋巴瘤细胞对柔红霉素、长春新碱的化疗敏感性:化疗敏感性依次为W S U F S S C L 细胞 D B 细胞 H 0

14、 5 0 5 T 细胞徐州医学院硕士学位论文J e k o 1 细胞,C D 5 + 淋巴瘤细胞较C D 5 一淋巴瘤细胞化疗敏感性降低更明显( P 0 0 5 ) W i t ht h et r e a t m e n to fI L 一6 ,l e v e lo f气徐州医学院硕士学位论文D N M T l w a sd o w n r e g u l a t e d ,l e v e l so fC D 5 - E 1BW a su p r e g u l a t e d ,a n dt h el e v e lo fI L 一1 0s e c r e t i o nw a si n c

15、 r e a s e di nJ e k o 1c e l l s ( P o暑UBJ e k o - lH o5 0 5 TD BW S U F S S C LX D a b图3 四种淋巴瘤细胞对柔红霉素( A ) 、长春新碱( B ) 的I c 5 0 值( X s ,n = 3 ) 。六表示与J e k o 一1 细胞相比,P 0 0 5 ) ( 图6 ,表6 ) 。结果提示,a n t i I g M 能活化J e k o l 细胞,放大I L 一6 对J e k o 1 细胞的作用。表5J e k o 二l 细胞及J L 一6 预处理的J e k o I 细胞C D 5 E 1 A 、C D 5 E 1 B m R N A 的相对表达量( i 土s n = 3 ) L e v e lo f C D 5 一E l Aa n dC D 5 一E l Bm R N Ai nJ e k o 一1c e l l sa n dJ e k o

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