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1、分类号：2 三2 ：2 U D C ：一密级：一重庆医科大学博士学位论文论文题目W n t 2 p c a t e n i n 信号在乳腺癌中作用机制的探讨作者姓名郭变琴指导教师姓名( 职称、单位名称)涂植光教授重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室重庆市重点实验室申请学位级别博士学科、专业名称I 临床检验诊断学论文答辩年月2 0 1 3 年5 月2 0 1 3 年5 月重庆医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。也不包含为获
2、得重庆医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。学位论文作者签名：印甥日期：t3 o c ，D学位论文版权使用授权书本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阌和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容( 保密内容除外) ，并编入有关数据库进行检索，
3、可以采用影印、缩印或其他手段保存论文。保密论文在解密后适用太授权书。论文作者签名：指导教师签名：日期：2 - , t 3 铆，口目录英汉缩略语名词对照。1中文摘要。4英文摘要。8论文正文：W N T 2 B C A T E N I N 信号在乳腺癌中作用机制的探讨。1 3前言1 3第一部分W N T2 在乳腺癌及患者血清中的表达及意义1 61 材料与方法1 62 结果2 93 讨 仑3 34 小结3 6参考文献3 7第二部分W N T 2 及B - C A T E N I N 在乳腺癌组织及配对癌旁组织中的表达及I I 缶床意：i 之4 l1 材料与方法4 12 结果4 63 讨 念5 14
4、小结5 3参考文献5 4第三部分C A F S 中W N T 2 的表达及对乳腺癌细胞M C F 一7 功能的影响。5 61 材料和方法5 62 结果6 03 讨 念6 54 小结6 9参考文献7 0全文总结7 2文献综述7 3读学位期间撰写、发表的论文及获科研资助情况8 2英文缩写英文全称Aa b s o r b a n c eb pA P S1 3 - a c t i nb a s ep a i r重庆医科大学博士学位论文英汉缩略语名词对照a m m o n i u mp e r s u l f a t eb e t aa c t i n1 3 - c a t e n i nB S Ab
5、o v i n es e r u ma l b u m i nc e n t i d e g r e ec D N Ac o m p l e t e m e n t a r yD N AC 0 2c a r b o nd i o x i d eC A F sc a r c i n o m a a s s o c i a t e df i b r o b l a s t sC A 15 3c a r b o h y d r a t ea n t i g e n 1 5 3D A B3 ，3 - d i a m i n o b e n z i d i n eD E P CD M S 0D N Ad
6、 N T Pd i e t h y lp y r o c a r b o n a t ed i m e t h y ls u l f o x i d ed e o x y r i b o n u c l e i ca c i d中文全称吸光度碱基对过硫酸铵B 一肌动蛋白D 连接素牛血清白蛋白摄氏度与m R N A 互补的D N A二氧化碳肿瘤相关成纤维细胞糖类抗原一1 5 3二氨基联苯胺焦碳酸二乙酯二甲亚砜脱氧核糖核酸d e o x y r i b o n u c l e o s i d et r i p h o s p h a t e脱氧核糖核苷三磷酸盐E C L I Ae l e c t
7、r o c h e m i l u m i n e s c e n c eE L l S AE B电化学发光免疫分析e n z y m e l i n k e di m m u n o a d s o r b e n ta s s a y酶联免疫吸附试验e t h i d i u mB r o m i d eE pe p p e n d o r f溴化乙锭微量离心管重庆医科大学博士学位论文E M TF C Mhe p i t h e l i a l - m e s e n c h y m a lt r a n s i t i o nI - & - 问叶转化f l o wc y t o m e
8、t r yh o u rh e m a t o x y l i na n de o s i nH R Ph o r s e r a d i s hp e r o x i d a s ei m m u n o h i s t o c h e m i s t r y流式细胞术小时苏木精一伊红辣根过氧化物酶免疫组织化学I Fi m m u n o f l u o r e s c e n t免疫荧光m R N Am e s s e n g e rR N AM T TM M T Vn mN F sP B SP C RP A G E信使R N A3 - ( 4 ，5 d i m e t h y l t h
9、 i a z o l 一2 - y 0 5 一d i p h e n y l四甲基偶氮唑盐m o u s em a m a r yt u m o rv i r u sm I n u t en a n o m e t e r小鼠乳腺肿瘤病毒分钟纳米n o r m a lf i b r o b l a s t s正常成纤维细胞p h o s p h a t eb u f f e r e ds o l u t i o np o l y m e r a s eC h a i nR e a c t i o n磷酸盐缓冲液聚合酶链反应p o l y a c r y l a m i d e g e le l
10、 e c t r o p h o r e s i s聚丙烯酰胺凝胶电泳p Hp o w e ro fh y d r o g e n酸碱度P M S FR N AR N a s eR P M I l 6 4 0p h e n y l m e t h a n e s u l f b n y lf l u o r i d er i b o n u c l e i ca c i dr i b o n u c l e a s er o u n dp e rm i n u t eR o s w e l lp a r km e m o r i a li n s t i t u t e16 4 0R T -
11、P C Rr e v e r s et r a n s c r i p t i o nP C RS D Ss o d i u md o d e c y ls u l f a t e苯甲基磺酰氟核糖核酸核糖核酸酶转分R P M l l 6 4 0 培养基反转录聚合酶链反应f J 二烷基硫酸钠重庆医科大学博士学位论文S C ST B ET B ST B S TT r i sT E M E DW Bs p e n tc u l t u r es u p e r n a t a n tT r i s b o r i ca c i d E D T AT r i sb u f f e r e ds a l
12、 i n e培养上清液三羟甲基氨基甲烷一硼酸 一乙二胺四乙酸 三羟甲基胺基甲烷缓冲液T r i sb u f f e r e ds a l i n ew i t hT w e e nT B S 一吐温缓冲液t r i s h y d r o x y m e t h y la m i n o m e t h a n e三羟甲基氨基甲烷N ，N ，N ，N ，t e t r a m e t h y l - e t h y l e n ed i a m i n eN ，N ，N ，N ，四甲基乙二胺W e s t e r nb l o t t i n g免疫印迹分析重庆医科大学博士学位论文W n t
13、 2 I c a t e n i n 信号在乳腺癌中作用机制的探讨目的：摘要1 研究W n t 2 在人乳腺癌细胞株( M D A M B 一2 3 1 、Z R 一7 5 3 0 和M C F 一7 ) 及患者血清中的表达情况，并探讨在乳腺癌患者血清中W n t2与C A 一1 5 3 的相关性。2 探讨W n t 2 及1 3 - c a t e n i n 在乳腺癌组织及配对癌旁乳腺组织中的表达及临床意义。3 探讨肿瘤相关成纤维细胞( c a r c i n o m a - a s s o c i a t e df i b r o b l a s t s C A F s ) 及培养上清中W n t 2 含量及其培养上清对人乳腺癌细胞M C F 一7的增殖、细胞周期及细胞侵袭力的影响；以及对t 3 - c a t e n i n 在M C F 7 中的表达及细胞内分布的影响。方法：1 采用R T P C R 技术检测3 种人乳腺癌细胞( M D A M B 一2 3 1 、Z R 7 5 3 0 和M C F 一7 ) 株W n t 2 基因m R N A 转录水平，采用蛋白免疫印迹检测3 株人乳腺癌细胞中W n t 2 蛋白表达水平；此外，采用酶联免疫吸附试验检测3 0 例乳腺癌患者及1 5 名健康成人血清中W n t 2 蛋白含量，电化学发光技术检测C A
