《RANKLOPG在强直性脊柱炎外周关节骨质破坏病理机制中的作用》由会员分享，可在线阅读，更多相关《RANKLOPG在强直性脊柱炎外周关节骨质破坏病理机制中的作用（91页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、中国人民解放军军医进修学院博士学位论文RANKL/OPG在强直性脊柱炎外周关节骨质破坏病理机制中的作用姓名：赵伟申请学位级别：博士专业：内科学（风湿病学）指导教师：黄烽2003.6.1军医进掌院博士学位论文R m r 山，唧在强直性脊柱芰外月拳蕈! 堕塑苎型竺堡璺缩写A SC R PC T RE S RF D C R lH L AI H CI L0 AO BO CO C I F0 D A RO D F0 P GO P G L原文【缩略词表】中文A n k y l o s i n gs p o n d y l i t i s强直性脊柱炎Cr e a c t i v ep m t c i nC a
2、 I c i t o n i nr e c e p t o rC 反应蛋白降钙素受体E r y t h r o c y t es e d i m e n t a t i o nm t e血沉F o I l i c l l i a rd e n d r i t i cc e l Ir e c e p t o r I滤泡树状细胞受体H 啪a nk u c o c y t e 锄t i g e n人白细胞抗原I m m l H l o l l i s t c l c h e m i s t r y免疫组织化学I n t e r l e I l l d n0 s t e o a r t h r i t
3、 i sO s t e o b l a S tO s t e o c l a s t白细胞介素骨关节炎成骨细胞破骨细胞O s t e o c I a S t o g e n e s i si n K b i t o r yf a c t o r破骨细胞生成抑制因子0 s 蝴d i i 酬撕锄d a 甜狐磁e p 盼破骨细胞分化和活化受体O S t c o c l 鹊td i 舵r e n t i 砒i o nf k t o r破骨细胞分化因子0 s t e o p r o t e g e r i n护骨素O s t e o p r o 把g e r i nl i g a n d护骨素配基军医进
4、学院博士学位论文I 加皿，唧审E 垦i 苎! 坚叁竺墨苎! ! 堕苎苎苎兰垫塑塑堡!R AR A N KR A N K LR FS O E 久S p A sT N FT N F S F l lR h e 岫a t o i da r t 埘t i s类风湿关节R e c e p t o ra c t i v a t o ro f N FKB 细胞核区肾KB 受内耐矧州J R e c e p t o ra c t i va _ 旧o f N FKBl i g a n d 绷蜊f 日于KB 受懈西似 m U 占R h e u ma 1 D i df h c t o r类风湿因子s 仃o m ls t
5、 e o c l 觞tf o H n i n ga c t i v i t y基质破骨细胞形成沂叶S p o n d y l o a r t h r o p a t h i e s脊柱关节病T u m o u rn e c r o s i sf a c t o 肿瘤坏死因子T N F 超家族l l1 N F R s F l l AT N Fr e c e p t o rs u p e 概n i l y11 AT N F 受体超家族11AT N F R S F l l BT N Fr e c e p t o rs u p e 加i l yl l BT N F 受体超家族T R lT R A N
6、C ET R A PT N Fr e c e p t o rl i k em o l e c u l elT N F 受体样分子n 师r e l a t e d 删v 拍o n i I l d l | c e dc y t o 妇1 eT N F 相关活化诱导细胞凶fT 积a r i cr e s i s t 锄ta c i dp h o s p h a t a s e抗酒石酸酸性磷酸酶2军医进学院博士学位论文_ N I L ，o 阳在叠直性眷拄支外月羡节骨质萎芝塞兰垫塑! 堕竺苎【中文摘要】目的：本研究拟通过检测R A N K L 、0 P G 和c D 6 8 蛋自在强“r ：脊炎( A
7、S ) 外周关节滑膜组织中的表达，并以类风湿关 r 炎( R A ) 、骨关节炎( 0 A ) 患者和健康对照者的外周关节滑膜射lf ： 为刈_ f ! ( ，了解细胞核因子KB 受体活化因子配基( R A N K L ) 、护骨索( O P G ) 年代表单核巨噬细胞标记的C D 6 8 蛋白表达与A S 患者炎性关侮病州改变及疾病活动性的相关性，试图从炎性关节局部R A N K L O P G 、| ，衡调节这一角度进一步探讨A S 关节炎症及骨质破坏的发病机制，为A s 病情评判与治疗提供理论基础。方法：应用单克隆抗体，通过免疫组织化学方法检测l3 例A s 、16例R A 、1 7 例
8、O A 及6 例健康对照关节滑膜组织中R A N K L 、O P G 、c D 6 8 蛋白表达及分布状况；鉴于抗酒石酸酸性磷酸酶( T R A P ) 足破骨细胞或| j i 体细胞的一种标志酶，本研究还采用酶组织化学法分析各组滑膜组织T R A P 染色阳性细胞表达及分稚状况，通过计算机辅助图象分析系统和半定量分析方法确定R A N K L 、O P G 、C D 6 8 以及T R A P 在各滑膜组织中表达量之问的差异，分析各因子发达j 炎性指标及关节x 线分期之间的相关性。结果：( 1 ) 0 P G 蛋白在所有13 例A s 滑膜组织中均有阳性表达，阿f 性细胞主要分布于滑膜衬罩
9、层、衬罩下层区域，滑膜软骨交界I 爱0 P G表达明显低于滑膜衬里层和衬罩下层；2 例健康对照滑膜自l l ： t l 仃军医进警学院博士学位论文置 N 【L o 雕在疆直挂眷拄文外一关节t 煎苎塑兰垫塑! 堕竺盟阳性表达，但明显低于A S 患者组。R A 及0 A 患者组未见0 P G 性表达。( 2 ) A S 患者组滑膜组织R A N K L 表达水平明显升商，r f ：细胞蔓要见于滑膜组织衬罩层和滑膜软骨交界廖。A S 患者匀lR A N K L蛋白与R A 患者组无明显差异，O A 患者组和健康对照组滑膜纠I 织- 1 ，未见阳性表达信号。( 3 ) A s 和R A 滑膜组织中R
10、A N K L 表达量与关节x 线分l n J - I ：相关( 相关系数r 分别为0 7 3 ，0 4 1 ，P 值分别为0 0 0 3 ，O 0 2 1 ) 。( 4 ) C D 6 8 蛋白在各组滑膜组织中滑膜细胞中均有表达，卜受表达于滑膜衬罩层，A S 及R A 患者组滑膜组织中表达强度娃并商于O A 和健康对照组。( 5 ) T R A P 染色结果表明，R A N K L 丰富表达的A S 和R A 心彬滑膜组织中，T R A P 染色阳性细胞数量增加，A S 患者组滑膜组织T R A P 阳性细胞百分数显著低于R A 组。在滑膜软骨交界区域，T R A P 着色强度明显增加，O
11、A 及正常对照组滑膜中T R A P | 5 f r ：细胞少见。( 6 ) R A 组R A N K L 表达与滑膜组织中的T R A P 阳性细胞九分数呈正相关( 相关系数r = O 4 4 2 ，P = 0 0 4 3 ) 。结论：( 1 ) A s 患者组滑膜组织中0 P G 表达水平明显高于健康对照组( P O 0 5 ) 。R A N K L 在健康人及0 A 患者滑膜组织中几乎没有阳性表达细胞( 参见附图2 1 4 及表2 6 ) 。表2滑膜组织衬里层R A N K L 平均光密度值比较IA s 蛆和R A 姐之问P o ，3 3 lA s 赶和O 姐之阿P t - o o o
12、o ，：R A 蛆和o A 蛆之问P健一o 0 0 0 ，O lA s 蛆和N c 粗之啊P t - o o o o 口：R A 曩和N c 粗之P t 0 O O o o A 和N c 蛆之闽P ；0 3 3 4 表3滑膜组织衬里下层R A N K L 平均光密度值比较 病例数均值标准差 A S13l3 8 4 6 l 1 7 6 5 9 + R A1 611 6 3 5 2 2 1 9 7 0 O A1 73 0 17 1 2 9 966N C66 1 7 6 5 2 2 1 。+tA s 组和R A 搬之一P t - o 1 5 2 IA s 蛆和O A 囊之知P t - 0 0 0 0
13、 ：R 越和O A 蛆之一P t= o O O o o l s 曩和N c 组之对P t = o o o o 口：R A 矗和N c 越之一P 一o o o o ，o 和N c 董之两P 簋= 0 3 6 1 表4滑腆组织中滑族软骨交界区R A N K L 平均光密度值比较一tA s 蛆和R A 粗之阿P t o 0 7 ， IA s 瓤和o 粗之一P t - o o o o ，：R A 蛆和o A 姐之哪P 值= o o o o o l s 衄和N c 瓤之冈P t o o o o 口：R A 量和N c 蛆之栩P t = o 0 0 0 ，IO A 和N c 担之问P 值= o 3 7 4
14、2 4军医进学院博士学位论文R l I I L ，衄6 在强直性等柱交外月关节骨质磕坏囊蔓机翻中的作用表5R A N K L 在滑膜衬里下层平均染色阳性面积百分率比较o IA s 蛆和R A 粗之闻P 值；o 10 5 A ，A s 姐和O A 粗之间P 慷= o 0 3 3 ：R 蛆和0 A 姐之问P 值= o 0 3 2 A s 和N c 蛆之间P 啦= o 0 4 l ，口：R A 蛆和N c 粗之阿P 值；o o l6 Io 和N ( 1 蛆之阃P 值t 01 1 1 表6R A N K L 在滑膜软骨交界区平均染色阳性面积百分率比较- lA s 瓤和R 蛆之栩P 位一o 2 3 7
15、t s 电和o 瓤之一P t - o 0 2 l ，：R A 赶和( ) A 粗之阿Pt = o 0 4 3 。O t s 氲和N c 粗之村P - o 0 4 6 ，口：R A 蛆和N c 姐之一P t - o 0 1 1 Io A 和N ( 、蛆之哪P t = 0 3 0 5 3 20 P G 在A s 及各对照组滑藤组织中的表达及分布：免疫组化方法检测结果显示，A s 滑膜组织中，O P G 蛋白( D A B显色，阳性细胞为棕褐色) 表达量( 平均光密度值和平均染色| j r |性面积百分比) 明显高于R A 、O A 及健康对照组( P O 0 5 ) 。由于T R A P 是破骨细
16、胞及其6 H 体细胞的一种标志酶，因此，T R A P 阳性细胞百分数和R A N K L 表达之n 1 J的这种讵相关关系是对R A N K L 能够刺激滑膜细胞向破骨细胞进行分化理论的支持。表1 7A s 滑膜衬里层I 认N 加P G 表达与1 R A P 阳性细胞数之间相关性分析P e a r s 相关系数( n _ 7 ) 滑膜组织T R A P 阳性细臆百分数( o 3 2 O 2 1 ) P 值表1 8 弛滑膜衬里层m 蝌蚴P G 表达与黜阳性细胞数之间相关性分析P e 2 H 相关系数( n = 1 1 ) 滑囊组织T R A P 酣性舞囊百分囊( 0 5 5 土0 2 3 ) P 值
