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1、柠檬酸分离提取实验发酵工艺学实验中国海洋大学 食品科学与工程学院一一、实验目的实验目的一一、实验目的实验目的 1 1、了解柠檬酸的提取原理；、了解柠檬酸的提取原理； 2 2、掌握从发酵液中提取柠檬酸的步骤；、掌握从发酵液中提取柠檬酸的步骤；二二、实验原理实验原理二二、实验原理实验原理 柠檬酸有称枸枸橼酸，学名柠檬酸有称枸枸橼酸，学名2 2- -羟基丙烷三羟基丙烷三 羧酸或羧酸或2 2- -羟基丙烷羟基丙烷- -1 1，2 2，3 3- -三羧酸，是水果三羧酸，是水果 中含量极为丰富的一种有机酸。柠檬酸因无毒中含量极为丰富的一种有机酸。柠檬酸因无毒 水溶性好、酸味适度、易被吸收和价格低廉的水溶性
2、好、酸味适度、易被吸收和价格低廉的 优点，被广泛的应用于食品、医药、化工、洗优点，被广泛的应用于食品、医药、化工、洗 涤等工业部门。涤等工业部门。 本实验以玉米淀粉为原料，采用黑曲霉通本实验以玉米淀粉为原料，采用黑曲霉通 过摇瓶发酵产生柠檬酸，柠檬酸发酵经过过滤过摇瓶发酵产生柠檬酸，柠檬酸发酵经过过滤 出去菌丝体和残有物质，滤液中加入碳酸钙使出去菌丝体和残有物质，滤液中加入碳酸钙使 柠檬酸生产沉淀，将获得柠檬酸钙混合液离心柠檬酸生产沉淀，将获得柠檬酸钙混合液离心 后保留沉淀，家硫酸酸化形成柠檬酸和硫酸钙后保留沉淀，家硫酸酸化形成柠檬酸和硫酸钙的沉淀，过滤得粗柠檬酸液，将粗柠檬酸的沉淀，过滤得粗
3、柠檬酸液，将粗柠檬酸 液进行液进行 蒸发结晶得到柠檬酸晶体，进一步纯化柠蒸发结晶得到柠檬酸晶体，进一步纯化柠 檬酸。檬酸。三三、实验仪器及试剂实验仪器及试剂三三、实验仪器及试剂实验仪器及试剂 试剂：柠檬酸发酵醪液试剂：柠檬酸发酵醪液碳酸钙固体、碳酸钙固体、 Ca(OH)Ca(OH)2 2、98%98%浓硫酸浓硫酸仪器：滤纸、离心机、纱布、电炉、恒仪器：滤纸、离心机、纱布、电炉、恒 温水浴锅温水浴锅四四、实验步骤实验步骤四四、实验步骤实验步骤粗提取：将醪液加热至80，保温一段时间用8层纱布过滤 除去菌丝体：对照组中因加入了2gCaCO3需要加入配制的20% 的硫酸10ml充分酸化；洗涤纱布，将柠
4、檬酸充分洗下，保留 滤液沉淀：将滤液放在80恒温水浴锅保温一段时间后，加入 Ca(OH)Ca(OH)2 2调调phph至至6 6- -8 8，并在，并在80下保温30min，于5000r/min下离 心10min的柠檬酸钙沉淀80酸化结晶：将沉淀移至三角瓶中，加入20%的硫酸调节ph 至2.0，用滤纸过滤得清液，取清液进行蒸发结晶，注意控制 结晶的温度和时间，不要使之被焦糖化，冷却后的到柠檬酸 晶体五五、结果及思考题结果及思考题五五、结果及思考题结果及思考题1 1、发酵醪液气味如何？、发酵醪液气味如何？ 2 2、两种发酵醪柠檬酸产率有无差别？为什么、两种发酵醪柠檬酸产率有无差别？为什么 3 3、柠檬酸提取方法的讨论、柠檬酸提取方法的讨论
