《γ连环素，α连环素，cMyc在常见类型肺癌中的表达及相关研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《γ连环素，α连环素，cMyc在常见类型肺癌中的表达及相关研究（53页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、华中科技大学硕士学位论文-连环素，-连环素，c-Myc在常见类型肺癌中的表达及相关 研究姓名：刘红云申请学位级别：硕士专业：病理学与病理生理学指导教师：吴翠环;吴人亮2003.4.1华中科技大学同济医学院硕士学位论文v - c a t ，o 【一c a t ，c - M y c 在常见类型肺癌中的表达及相关研究中文摘要恶性肿瘤的浸润、转移与肿瘤细胞间连接功能的降低有密切关系。原癌基因的持续异常表达是恶性肿瘤发生发展的关键因素。本文应用免疫组织化学方法和原位分子杂交技术检测上皮细胞间的重要连接成分Y一连环素( Y c a t e n i n ，1 t - c a t ) 、d 一连环素( q c
2、 a t e n i n ，伐一c a t ) 在常见类型肺癌中的表达变化，本题中常见类型肺癌按传统分类标准包括鳞状细胞癌( s q u a m o u sc e l lc a r c i n o m a ，S Q ) 、腺癌( a d e n o c a r c i n o m a ，A D ) 和细支气管肺泡癌( b r o n c h i o l o a l v e o l a rc a r c i n o m a ，B A C ) ( 由于B A C 在生物学行为和组织形态上均有其特殊性，故将其单独列出加以研究) ，以期发现这两个指标的表达变化与肺癌浸润转移的关系；同时检测了原癌基因c
3、 m y c 的表达变化及其与y 一连环素表达变化之间的关系。为临床诊治肺癌提供参考依据。f 实验结果如下：1 、Y c a t 表达变化：6 0 例肺癌中有3 7 例Y c a t 表达减弱或缺失( 6 1 6 7 ) 。1 9 例出现异位表达。在淋巴结转移组与未转移组之间、不同分化程度之间v c a t 异华中科技史学同许医学院硕士学位论文常表达率有显著差异( P 0 0 5 ) 。4 、a e a t 表达变化：一c a t 在6 0 例肺癌中的异常表达率为7 0 ( 4 2 6 0 ) 。在淋巴结转移组与未转移组之间、不同分化程度之间、不同组织学类型之间n c a t 的+ _表达有明
4、显差异( P 0 0 5 ) 4 T h ee x p r e s s i o nv a r i a t i o no f - e a t e n i nT h er a t i oo fa b n o r m a le x p r e s s i o no ft h e6 0c a s e so fl u n gc a n c e ri s7 0p e r c e n tA n dt h ee x p r e s s i o n sw e r es i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n tb e t w e e nw i t ha n dw i t h
5、 o u tl y m p hn o d em e t a S t a s i s ，a l s ob e t w e e nd i f f e r e n td i f f e r e n t i a t i o na n db e t w e e nd i f f e r e n th i s t o l o g i c a lt y p e sf P 7 0 为正常表达，反之为表达缺失；胞质或胞核阳性细胞数，1 0 为异位表达。细胞膜表达缺失和异位表达均称为异常表达。2 ) C t c a t 免疫组织化学染色：以细胞膜出现黄色或棕黄色颗粒判为膜染色阳性细胞。参照S h i o z a
6、k i t 2 I 等的判定标准，每张切片选取5 个高倍视野，根据阳性细胞所占的百分数判定：膜染色阳性细胞9 0 判为正常染色：1 0 9 0 判为染色减弱； 5 的癌细胞核着色为胞核表达阳性； 2 5 癌细胞质着色为胞质表达阳性，两者均称为过度表达。4 ) Y c a tm R N A 原位分子杂交：胞质出现黄色或棕黄色染色为阳性细胞。随机选择5 个高倍视野，每视野计数1 0 0 个癌细胞，( 1 ) 按阳性细胞百分率计分，阳性细胞数2 5 为0 分，2 6 7 5 为1 分，7 6 1 4华中科技大学同济医学院硕士学位论文为2 分；( 2 ) 按染色强度计分，无着色为0 分，黄色为1 分，
7、棕黄色为2 分，将两项相加，得分O O 0 5 ) ( 图3 、4 ) 。2 、Y - e a tm R N A 原位分子杂交结果( 表1 )正常细支气管、肺泡上皮细胞质内y c a tm K N A 呈弥漫性棕黄着色( 图9 - 1 0 ) 。3 8 例常见类型肺癌中Y c a tm R N A 异常表达率是6 3 1 6 低分化组明显高于高分化组( 图1 1 - 1 2 ) ，鳞状细胞癌组明显高于腺癌组有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组( P 均 O 0 5 ) ；但与肿瘤有无淋巴结转移和体积大小明显相关( P O 0 5 ) ；但在淋巴结转移组和低分化组其表达显著降低( 图2 0 )
8、( P 0 0 5 ) 。1 6华呻科技太学同济医学院- 硕士学位论文组织类型鳞癌2 4腺癌2 4B A C1 2分化程度高分化2 4低分化2 4淋巴结转移有3 5无2 5瘤体大小1 31 60 7 8 4 00 3 7 5 9492 01 0 5 4 0 80 0 0 1 22 761 6 6 4 0 70 0 0 0 l81 32 1 1 6 40 1 4 5 71 11 11 00 0 8 4 70 7 7 112 395 1 7 3 50 0 2 2 93 c m4 12 62 6三! ! 墨! ! ：! ! ! ! ：! 竺! ：墅! i! ：! ! ! 15 、c M y c 过度
9、表达与Y - c a t 异常表达的关系( 见表3 )在Y c a t 异位表达的肺癌中，有1 5 例出现c M y c 过度表达。在Y c a t未出现异位表达组中，c M y c 未出现过度表达2 4 例，两者的表达明显相关( P O 0 1 ) 。表3Y c a t 异常表达与c - M y c 过度表达的关系Y c a tY c a t异位表达非异位表达合计C M y c 过度表达1 51 73 2 C M y c 正常表达42 42 8 合计1 94 16 06 、细支气管肺泡癌中n c a t 和“ - c a t 的表达( 见表4 )细支气管肺泡癌中a e a t 和y - c
10、a t 的表达明显高于鳞状细胞癌和腺17华呻科技太学同济1 薹学院硕士学位论文癌( P 0 0 0 1 ) ( 图2 1 、2 2 ) 。表4e a t 、Y e a t 在三种类型肺癌中表达的平均光度值( x 士s )分组例数c l c a t7 - c a t 鳞癌( S Q )2 4O 3 3 3 6 + 0 0 3 1 2O 3 2 2 5 O 0 2 3 7 腺癌( A D )2 4O 3 9 1 7 O 0 2 5 3O 4 2 7 0 O 0 3 9 4 细支气管肺泡癌 ( B A C )1 20 4 2 4 4 0 0 3 2 30 4 8 6 5 0 0 2 2 4注：P 0
11、 0 0 1讨论恶性肿瘤的浸润和转移是其威胁生命的重要原因之一。近年来研究1 8华中科技土学同济医学院硕士学位论文显示，上皮组织来源的恶性肿瘤的浸润、转移与同源上皮细胞之间连接功能失常有关。同源上皮细胞之间正常连接功能的维持依赖于粘连复合体的完整性。该复合体中任何一种成分缺失都将使细胞间连接功能受到影响。目前已知该复合体中主要有四种成分：E c a d 、d c a t 、D c a t 、Y c a t 。其中Y c a t 也是桥粒的重要组成成分斑珠蛋白( p l a k o g l o b i n ) 【引。另外，Y c a t 还可作为W n t 信号途径的终末元件，能够促进某些原癌基
12、因的表达如c m y c 6 1 。肿瘤细胞从原发部位脱落是肿瘤转移的第一步，这与细胞问连接功能失常有关。y c a t 作为紧密连接和桥粒中的唯一共同元件，对维持细胞间正常连接功能十分重要。多项研究证实Y c a t 在恶性肿瘤( 主要是癌) 中表达缺失，其中包括非小细胞肺癌( N S C L C ) 。本题中所研究的常见类型肺癌包括鳞状细胞癌、腺癌和细支气管肺泡癌，占肺癌总类型的6 5 以上【7 1 。关于v c a t 与常见类型肺癌临床病理学特性之间的关系，国内尚未见报道。本研究显示在6 0 例常见类型肺癌中普遍存在y c a t 表达异常，且缺失表达部位多集中在癌巢边缘，即肿瘤侵袭性
13、较强的部分，这提示幼稚的癌细胞之间连环素表达减少显著，细胞间连接功能降低明显，瘤细胞更容易脱离母体，转移到其他部位。另外原位杂交结果显示Y c a tm R N A 表达亦有不同程度的降低，提示Y c a t 的异常表达可能起始于转录或转录前水平。虽然在蛋白表达水平Y c a t 在鳞状细胞癌和腺癌1 9华中科技大学同济医学院硕士学位论文中表达无统计学差异，但在转录水平上y c a tm R N A 在鳞癌中异常表达明显高于腺癌，提示这两种癌发生发展的机制可能不同，y c a t 表达与肿瘤的类型有关，并可能是导致鳞癌发生发展的原因之一。而在v c a t蛋白测定中，鳞癌与腺癌间表达无统计学差
14、别，可能是因为 r c a t 在翻译过程中或翻译后受到了其它因素影响，如降解因素。在不同分化程度的常见类型肺癌中，Y c a t 的异常表达率也不同，在分化程度较好的细支气管肺泡癌中其异常表达率明显低于腺癌，高分化组异常表达率明显低于低分化组，因此，我们认为Y c a t 与常见类型肺癌的恶性行为和分化程度有关，这与P i r i n e n 8 】等的研究结果一致，提示这种现象可能是常见类型肺癌获得高增殖活性和侵袭性的原因之一。另外，有淋巴结转移组Y c a t 的异常表达明显高于无淋巴结转移组，提示 r c a t 异常表达与常见类型肺癌的转移密切相关，其原因可能是_ r c a t 表
15、达降低，导致细胞间连接结构失常，细胞间连接松散，肿瘤细胞更容易脱离原发灶，转移到其它部位。原位分子杂交结果显示不同分化程度之间、有无淋巴结转移组之间y c a tm R N A 的表达水平有显著差异，进一步提示v c a t 异常表达与常见类型肺癌浸润、转移密切相关。有文献报道在非小细胞肺癌中n c a t 表达明显减低，其异常表达程度与肿瘤的分化程度、组织学类型及预后有关。本实验结果显示，在6 0例常见类型肺癌中3 3 例出现a c a t 减低或缺失表达，而且异常表达的程2 0毕中科技太学同济医学院硕士学位论文度与肿瘤分化程度有关，分化越低，表达越少，这提示Q c a t 的表达可以作为细
16、胞成熟程度或异型性的标志。另外该结果还显示，a c a t 异常表达与淋巴结转移有关，术前有淋巴结转移组a c a t 的异常表达明显高于无转移组。这一结果提示n c a t 的减低表达可能和肿瘤侵袭性有关。有关d c a t 和Y c a t 减低或缺失表达的机制目前尚不清楚，R o b b i n s 9 曾报道0 一c a t 的减低或缺失表达是由于其基因发生突变或缺失引起的而v c a t 也可能存在这个原因，因为Y c a t 所在的染色体( 1 7 1 ) 在乳腺癌和卵巢癌中常常杂和性缺失【1 0 I ；但其减低或缺失表达也可能是肿瘤细胞中产生了某些降解Y c a t 的特殊物质，从而使之分解增多造成的。除了参与细胞间黏附外，Y
