《泛耐药时代细菌要试验的重要性》由会员分享，可在线阅读，更多相关《泛耐药时代细菌要试验的重要性（75页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、泛耐药时代泛耐药时代泛耐药时代泛耐药时代 - -医院药敏试验的重要性医院药敏试验的重要性医院药敏试验的重要性医院药敏试验的重要性朱德妹朱德妹朱德妹朱德妹复旦大学附属华山医院抗生素研究所复旦大学附属华山医院抗生素研究所复旦大学附属华山医院抗生素研究所复旦大学附属华山医院抗生素研究所 Zhu_Zhu_主要内容主要内容? 细菌耐药性的现状 ? 什么是药物敏感性试验 ? 如何报告药敏试验的结果 ? CLSI近年的重要改变 ? 做好细菌耐药性监测，提高临床诊治水平一一.细菌耐药性的现状细菌耐药性的现状?革兰阳性菌增多 MRSA(60%)、儿童中的检出率低于成人中的检出率 儿童中的PSSP的检出率低于成人
2、，但PNSP的检出率高于成人 肠球菌属细菌中VRE粪肠球菌和VRE屎肠球菌的检出率分别为0.4%和 3.2%，基因型为vanA和vanB，并以vanA 型VRE屎肠球菌为主 ?革兰阴性菌中葡萄糖不发酵菌增多 不动杆菌属(11.0% ，其中鲍曼不动杆菌86.8%) 嗜麦芽窄食单胞菌（3.8% ，占非发酵菌10%以上）等 ?出现新的病原菌和耐药菌 VISA和CA-MRSA 肺孢菌(Pjirovecii) 艰难梭菌(毒力增强) VRE、hVISA 、VRSA、泛耐药菌(已经出现大肠埃希菌和肠杆菌属的 泛耐药株)细菌耐药性的现状细菌耐药性的现状? 肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感，总耐药 率2
3、%，较2008年（ 1% ）略有增加? 铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为 30.5%和25.2%;鲍曼不动杆菌对两者的耐药率均已超过 50%。糖不发酵革兰阴性杆菌对测试抗菌药的耐药率除 头孢哌酮/舒巴坦（20.5%）外，在36%-44%，敏感率在 50%-59%。提示单药治疗此类细菌所致全身性感染，疗 效可能不够满意。? 与2008年相比，肺炎克雷伯菌(1.8% VS 0.3%)和鲍曼不动 杆菌(17.0% VS 10.9%)中的泛耐药株显著增多，并且已出 现个别的大肠埃希菌和肠杆菌属的泛耐药株对耐药菌有效的新药对耐药菌有效的新药耐药革兰阳性球菌耐药革兰阳性球菌耐药革兰阳性球菌耐
4、药革兰阳性球菌耐药革兰阴性菌耐药革兰阴性菌耐药革兰阴性菌耐药革兰阴性菌万古霉素万古霉素万古霉素万古霉素Tigecycline(Tigecycline(Tigecycline(Tigecycline(绿脓无效绿脓无效绿脓无效绿脓无效) ) ) )喹奴普丁喹奴普丁喹奴普丁喹奴普丁/ / / /达福普汀达福普汀达福普汀达福普汀Ertapenem(Ertapenem(Ertapenem(Ertapenem(绿脓无效绿脓无效绿脓无效绿脓无效) ) ) )利奈唑胺利奈唑胺利奈唑胺利奈唑胺(Linezolid)(Linezolid)(Linezolid)(Linezolid)多立培南多立培南多立培南多立培南
5、(Doripenem)(Doripenem)(Doripenem)(Doripenem) 粘菌素粘菌素粘菌素粘菌素/ / / /多粘多粘多粘多粘B B B B 达托霉素达托霉素达托霉素达托霉素(Daptomycin)(Daptomycin)(Daptomycin)(Daptomycin)含舒巴坦的复方制剂含舒巴坦的复方制剂含舒巴坦的复方制剂含舒巴坦的复方制剂( ( ( (不动不动不动不动) ) ) )糖肽类糖肽类糖肽类糖肽类- - - -OritavancinOritavancinOritavancinOritavancin奥他凡星奥他凡星奥他凡星奥他凡星 DalbavancinDalbava
6、ncinDalbavancinDalbavancin达巴凡星达巴凡星达巴凡星达巴凡星 TelavancinTelavancinTelavancinTelavancin 替加环素替加环素替加环素替加环素 TigecyclineTigecyclineTigecyclineTigecycline粘菌素粘菌素粘菌素粘菌素/ / / /多粘菌素多粘菌素多粘菌素多粘菌素B B B B 联合：联合：联合：联合： 碳青霉烯类、氨基糖苷类、碳青霉烯类、氨基糖苷类、碳青霉烯类、氨基糖苷类、碳青霉烯类、氨基糖苷类、 FQFQFQFQ、内酰胺类内酰胺类内酰胺类内酰胺类正确的药敏试验及报告 非常重要！正确的药敏试验及报
7、告 非常重要！?细菌耐药性仍呈增加趋势细菌耐药性仍呈增加趋势 ?加强对耐药菌的检测、耐药菌带菌者的筛查 和耐药机制研究加强对耐药菌的检测、耐药菌带菌者的筛查 和耐药机制研究 ?正确合理选用抗菌药和控制耐药菌感染正确合理选用抗菌药和控制耐药菌感染2007-上海地区部分医院二二.抗菌药物的敏感性试验抗菌药物的敏感性试验? 定义、目的、方法 ? 培养基、接种菌量、培养条件 ? 结果阅读 ? 判断标准（一）什么是抗菌药物的敏感性试验？（一）什么是抗菌药物的敏感性试验？测定抗菌药物在体外抑制病原微生物生长的效力，称抗菌药物对细菌的抑菌试验，或称细菌对药物的敏感性试验。（二）为什么要做药物敏感性试验？（二
8、）为什么要做药物敏感性试验？? 供临床医师选用抗菌药物时的参考 ? 细菌耐药性监测和耐药性变迁 ? 评价新抗菌药物的药效学特征 ? 对细菌耐药谱分析和分型有助于某些菌种 的鉴定 ? 作为医院内感染流行病学调查的手段之一(三三)如何进行药物敏感性试验？如何进行药物敏感性试验？1、标准化的药敏方法、标准化的药敏方法?稀释法 试管稀释法（肉汤稀释法） 平板稀释法（琼脂稀释法）?扩散法（纸片法） Kirby-baure(K-B)法 Stockes法?E-Test?联合药敏稀释法稀释法原理：以一定浓度的抗菌药物与含有被测 菌株的培养基进行一系列的对倍稀释经培 养后，观察最低抑菌浓度（Minimal in
9、hibitory concentration MIC）。 104cfu350C，18-24h实验室中常用的几种实验室中常用的几种MIC测定方法测定方法肉汤微量稀释法肉汤微量稀释法肉汤微量稀释法肉汤微量稀释法肉汤肉汤肉汤肉汤( (试管试管试管试管) )稀释法稀释法稀释法稀释法2g/ml1g/ml0.5g/ml琼脂琼脂琼脂琼脂( (平板平板平板平板) )稀释法稀释法稀释法稀释法几个重要的指标几个重要的指标MIC(最低抑菌浓度最低抑菌浓度 minimal inhibitory concentration) 在体外能够抑制细菌生长的最低药物浓度在体外能够抑制细菌生长的最低药物浓度 MBC(最低杀菌浓度
10、最低杀菌浓度 minimal bactericidal concentration) 在体外能够使细菌总数减少在体外能够使细菌总数减少(杀灭杀灭)99.9%以上的最低药物浓度。以上的最低药物浓度。 MIC50、MIC90 在一批实验中能抑制在一批实验中能抑制50%或或90%受试菌所需的受试菌所需的MIC。 MBC50 MBC90 在一批实验中能使在一批实验中能使50%或或90%受试菌的活菌数减少受试菌的活菌数减少99.9%所需的所需的MBC。 临界浓度（临界浓度（breakpoint） 根据抗菌药物抑制细菌生长所需要的根据抗菌药物抑制细菌生长所需要的MIC，结合常用剂量时该药所能 达到的血药浓
11、度，划定细菌对各种抗菌药物敏感或耐药的界限。，结合常用剂量时该药所能 达到的血药浓度，划定细菌对各种抗菌药物敏感或耐药的界限。扩散法扩散法原理：将浸有抗菌药物 的纸片贴在涂有细菌的 琼脂平板上，抗菌药物 在琼脂内向四周扩散， 因此敏感细菌在纸片周 围一定距离内的生长受 到抑制，根据抑菌圈的 大小即可推知该药物的 最低抑菌浓度（MIC）。 CLSI 临床微生物实验 室药敏试验的常规方法临床微生物实验 室药敏试验的常规方法耐药中敏 高敏Log2MICMIC7128最664 532 低416 38 抑24 12 菌01 -10.5浓-2 0.25-30.12 5 度-4 0.06-5 0.03-60
12、.01 5100株临床菌株 100对MIC和DD 负相关（r =-0.9）E-试验（试验（E-Test）? 原理：基本同扩散 法，即浓度呈连续 梯度的抗菌药物从 塑料纸条中向药敏 琼脂中扩散，在试 条周围浓度范围内 检测菌的生长被抑 制，从而形成透明 的抑菌圈。 ? E-test综合了稀释 法和扩散法的原理 和特点，直接定量 测出药物对测试菌 的最低抑菌浓度 （MIC）。?菌液， 药敏平板 同K-B法 ?E-Test条 宽5mm， 长60mm ?抑菌圈 -椭圆形 ?结果 -MICCommercial AST SystemsCommercial AST SystemsVitek 2Vitek 2
13、MicroScanMicroScanSensititreSensititrePhoenixPhoenixEtesEtest tBIOMICBIOMIC自动化仪器的优缺点自动化仪器的优缺点? 优点 具有多种用途：菌种鉴定、药敏 快速，灵敏 计算机记录，减少人工记录的错误 结果客观，不带有人为的偏见 软件可以更新 专家系统? 缺点 药物是组合的板，药敏试验的药物不能根据需要进 行选择， 缺乏灵活性和机动性 快速的结果对某些细菌不能检出耐药性菌株，造成 假敏感，不能及时监测和发现耐药菌株的产生 仪器要求占有一定的空间 药敏试验的药物浓度是以“Breakpoint”设置的，不是 浓度系列，不能反映抗菌
14、药物对受试菌株真正的MIC 值自动化仪器的优缺点自动化仪器的优缺点什么时候可以使用什么时候可以使用E-试验试验? 临床治疗要求了解某种抗菌药物确切的MIC值以及 MIC的范围? 当某种抗菌药物对某种细菌的纸片法药敏结果不可靠 时,如万古霉素对MRSA? 要核实常规方法获得的药敏结果正确性 ? 苛养菌 肺炎链球菌 -溶血性链球菌 流感嗜血杆菌 ? 厌氧菌当进行以下检测时，需用当进行以下检测时，需用MIC法而不能用纸片扩 散法法而不能用纸片扩 散法? 葡萄球菌万古霉素；达托霉素 ? 肠球菌万古霉素“中介”结果；达托霉素 ? 不动杆菌属，洋葱博客霍尔德菌，嗜麦芽窄食单胞菌 许多药 ? 肺炎链球菌青霉
15、素，头孢噻肟/头孢曲松 ? 草绿色链球菌青霉素 ? Beta 溶血链球菌达托霉素MIC结果和敏感，中介，耐药的解释对下 列疾病相关的分离菌种是有用的：结果和敏感，中介，耐药的解释对下 列疾病相关的分离菌种是有用的：? 心内膜炎? 脑膜炎 ? 败血病? 骨髓炎? 免疫抑制? 假体装置? 虽然“敏感”，但是对抗菌药无反应的病人举例：举例：? 肺炎链球菌肺炎链球菌 苯唑西林纸片法直径19mm,需要明确受 试菌对青霉素的敏感性，必须做青霉素的E-试验 ? 革兰阳性球菌革兰阳性球菌 万古霉素对MRSA的药敏试验、万古霉素 不敏感革兰阳性球菌（中介或耐药），必须做万古霉素 的E-试验确认受试菌对万古霉素的
16、敏感性（包括替考拉 宁、利奈唑胺等） ? 草绿色链球菌草绿色链球菌对青霉素、氨苄西林 纸片法药敏结果不可靠，必须做上述 两药的E-试验举例举例: 囊性纤维化患者中分离的铜绿假单胞菌 对托布霉素需要雾化处理时：囊性纤维化患者中分离的铜绿假单胞菌 对托布霉素需要雾化处理时：? 囊性纤维化患者有时需要雾化托布霉素治疗 托布霉素的浓度: ? 肺雾化吸入雾化吸入32-64 g/mg ? 血清静脉给药静脉给药410 g/ml 自动化仪器常规 托布霉素MIC 通常 16 g/ml E-试验和稀释法: E-试验可以达到256 g/ml (此外粘液状生长的菌株肉汤培养液内生长较慢)原则：针对靶细菌设计药敏试验的抗菌药物的品种 和数量原则：针对靶细菌设计药敏试验的抗菌药物的品种 和数量 ? CLSI抗菌药物选择的原则（抗菌药物选择的原则（A、B、C、
