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1、1液质联用仪液质联用仪 液质液质 AB4500AB4500 操作规程操作规程导读：就爱阅读网友为您分享以下导读：就爱阅读网友为您分享以下“液质液质 AB4500 操作操作规程规程”资讯，希望对您有所帮助，感谢您对资讯，希望对您有所帮助，感谢您对 的支持的支持!一、一、 开关机开关机A A 、开机、开机1. 打开打开 UPS 电源，打开氮气发生器（气瓶）电源，打开氮气发生器（气瓶） ，确认，确认Curtain gas 的输入压力为的输入压力为 0.4MPa ， gas1/2 为为 0.7MPa ，exhuast 为为 0.4MPa 。2. 打开机械泵电源开关（打开机械泵电源开关（5500 系列
2、直接打开质谱主机电系列直接打开质谱主机电源，仪器自动启动机械泵）源，仪器自动启动机械泵）3. 等机械泵工作至少等机械泵工作至少 30min5. 打开质谱主机电源开关打开质谱主机电源开关6. 过夜抽真空过夜抽真空B B 、关机、关机1. 停止输液：关停针泵或液相泵，或断开输液管线（一停止输液：关停针泵或液相泵，或断开输液管线（一2般质谱主机般质谱主机 Standby 后液相系后液相系 统也自动待机，输液泵自动统也自动待机，输液泵自动关停，但建议操作人员再次确认，必须保证没有任何液体关停，但建议操作人员再次确认，必须保证没有任何液体 再泵入质谱）再泵入质谱）2. 使仪器待机，并灭活配置使仪器待机，
3、并灭活配置2. 关闭质谱仪主机电源开关（关闭质谱仪主机电源开关（5500 系列只需按下电源开系列只需按下电源开关旁的关旁的 VENT 按键排放真空）按键排放真空）3. 机械泵继续工作至少机械泵继续工作至少 30min4. 关闭机械泵上的电源开关（关闭机械泵上的电源开关（5500 系列会自动关停机械系列会自动关停机械泵，待机械泵停止后即可关闭泵，待机械泵停止后即可关闭 5500 系列主机上的电源开关）系列主机上的电源开关）5. 关闭气体发生器或气瓶关闭气体发生器或气瓶二二 . 仪器校准与调谐仪器校准与调谐本节包括如何在本节包括如何在 Analyst 软件中进行手动质量校准，一软件中进行手动质量校
4、准，一般仪器在开关机后才需要般仪器在开关机后才需要 做调谐或每个季度例行调谐。做调谐或每个季度例行调谐。1 1 、打开、打开 analyst 软件，双击软件，双击 Hardware Configure，在硬件配置在硬件配置 Hardware Configure 菜菜 单下单下 单击单击 ma ssSpecOnly ( 只连质谱机只连质谱机 ) ， 单击单击 Active profile 激活仪激活仪器。硬件配置器。硬件配置 表中表中 massSpecOnly 出现绿勾后，表示质谱出现绿勾后，表示质谱仪主机与计算机通讯正常，关闭仪主机与计算机通讯正常，关闭 Hardware Configurat
5、ion Editor。3、双击左边工具菜单、双击左边工具菜单 Navigation Bar 中的中的 Manual 3Tuning， 打开一个空白质谱参数设打开一个空白质谱参数设 置及运行窗口，进入置及运行窗口，进入手动调谐模式：手动调谐模式：4、在、在 project 工具条中选择工具条中选择 installation- -开头的项目开头的项目文件夹文件夹5、点击、点击 File open6、选择、选择 Acquisition Method 打开四极杆校准方法文件打开四极杆校准方法文件列表列表(如：如：Q1PosPPG.dam ， Q1NegPPG.dam ，Q3PosPPG.dam ，Q3
6、NegPPG.dam 方法文件，文件名方法文件，文件名有可能不同有可能不同) 。根据要校准的目标根据要校准的目标(Q1 正离子、正离子、Q1 负离子、负离子、Q3 正离子、正离子、Q3 负离子负离子) 选择相应的方法打选择相应的方法打 开。开。7、该方法会出现在质谱参数设置及运行窗口：、该方法会出现在质谱参数设置及运行窗口：8、 用针泵进质量校准溶液，调离子源喷雾针位置到用针泵进质量校准溶液，调离子源喷雾针位置到5mm 处。对于不同仪器、测定极性，要用不同的处。对于不同仪器、测定极性，要用不同的 PPG 校校4准溶液，针泵流速准溶液，针泵流速 10ul/min9、 采集采集 PPG 标准品质谱
7、数据：在质谱参数设置及运标准品质谱数据：在质谱参数设置及运行窗口中点击行窗口中点击 Start ，数据采集时在窗口下部出现两个实，数据采集时在窗口下部出现两个实时数据图：左边时数据图：左边 TIC(总离子流图总离子流图) ，右边质谱图。待采集，右边质谱图。待采集完成后，点击完成后，点击 resolution ，再点击，再点击 advanced ，弹出分辨，弹出分辨率窗口，再在右边质谱图中按鼠标右键出现一菜率窗口，再在右边质谱图中按鼠标右键出现一菜 单，选菜单，选菜单中单中 Open file：10、单击其中任一个、单击其中任一个 PPG 质谱峰的图质谱峰的图(此图边框变蓝此图边框变蓝) ，然后
8、在在工具条下点击，然后在在工具条下点击 Calibrate from spectrum 按钮按钮（ ）11、在出现的、在出现的 Mass Calibration Options 窗口中，从窗口中，从 Standard 下拉菜单选择合适的标准品下拉菜单选择合适的标准品 类型：类型：PPGs Pos(正正离子离子) 或或 PPGs Neg (负离子负离子) ；然后点击；然后点击12、仪器校准、仪器校准结果图中有三栏结果图中有三栏: 上栏显示此次校准与理论值的质量偏差上栏显示此次校准与理论值的质量偏差5( mass shift )，中栏显示所，中栏显示所有有 PPG 校准峰的半峰宽校准峰的半峰宽 (
9、 分辨率分辨率) ，下栏显示此次校，下栏显示此次校准与上次校准所有准与上次校准所有 PPG 校准点峰强度校准点峰强度 变化的百分比。变化的百分比。A A 、手动调整分辨率、手动调整分辨率目标是让每个数据点都应该落在两条虚线之间，如果某目标是让每个数据点都应该落在两条虚线之间，如果某些些 PPG 峰宽超出分辨率范围，峰宽超出分辨率范围， 应进行手动调整。应进行手动调整。调整调整 Offset 值会影响分辨率，以中心实线为基准，半峰值会影响分辨率，以中心实线为基准，半峰宽偏大的调大宽偏大的调大 offset 值（考值（考 虑正负）虑正负） ，半峰宽偏小的调小，半峰宽偏小的调小 offset 值（考
10、虑正负）值（考虑正负） ，对，对 Offset 值调整幅度为每次值调整幅度为每次 0.003，改变，改变 offset 值以后按值以后按 Apply 钮。钮。关闭当前其他窗口回到采集窗口，重新点击关闭当前其他窗口回到采集窗口，重新点击 start 采集数采集数据（在开始采数据时按据（在开始采数据时按 Yes 确确 认要保存这些修改）认要保存这些修改） ，重复，重复9-12 步直到所有点的分辨率合乎分辨率范围。步直到所有点的分辨率合乎分辨率范围。B 、 质量校正质量校正当当 offset 值设定合适，所有值设定合适，所有 PPG 离子的分辨率在俩虚离子的分辨率在俩虚线范围内后，进行最后的质量线范
11、围内后，进行最后的质量校准。再采集一次校准。再采集一次 PPG 数据（重复数据（重复 9 到到 11 步）步） ；在；在 Mass Calibration Report 按按 Update mass calibration 按按钮进行更新，软件系统会提示是否用新的校准曲线替换已钮进行更新，软件系统会提示是否用新的校准曲线替换已6存在的校准存在的校准 曲线，当出现提示时，回答曲线，当出现提示时，回答“YES ”三三 . 化合物参数化合物参数 优化优化本节描述如何用针泵连续进样本节描述如何用针泵连续进样(10ul/min)，在，在 Manual Tuning 窗口下优化化合物参数。窗口下优化化合物
12、参数。 1 1 、找、找 母离子母离子 ： Q1 MS 全扫描全扫描A 、选择你的、选择你的 project ；双击；双击 Navigation Bar 下的下的 Manual- - Tuning； 从从 ScanType 下拉菜单中选择：下拉菜单中选择： Q1 Scan (Q1)；选择极性：；选择极性：Positive(正离子正离子) 、Negative（负离子）（负离子） ；勾选；勾选 Center/with 选项；设置采集时间选项；设置采集时间Duration: 5min ；在表格中；在表格中 Center （Da ）栏填入待优化）栏填入待优化化合物的分子量，化合物的分子量，With(D
13、a)栏填栏填 6，Time （sec ）填）填 1；左侧左侧 Source/Gas 项用以下推荐值：项用以下推荐值：CUR 10，IS:5500(正离正离子子) 或或-4500（负离子）（负离子） ，TEM GS1 15，GS2 0，ihe on； Compound 项用以下推荐值：项用以下推荐值：DP 60，EP 10 或默认值；或默认值；B 、运行针泵（、运行针泵（10ul/min）, 点击点击 start 采集数据，待左采集数据，待左侧窗口侧窗口 TIC 序号稳定后再继续采序号稳定后再继续采 集集 1min ，点击，点击 stop ，在在 TIC 图上按住鼠标左键托选最后图上按住鼠标左键
14、托选最后 1min 谱图，再双击选谱图，再双击选7中的谱中的谱 图，在下方弹出窗口记录目标化合物峰的中心对应图，在下方弹出窗口记录目标化合物峰的中心对应的横坐标分子量作为该化合物的准的横坐标分子量作为该化合物的准 确分子量。确分子量。2 、找子离子：、找子离子： Product Ion Scan（MS2）A 、在、在 当前方法文件的当前方法文件的 Scan Type 下选择下选择 Product Ion Scan （MS2） ；去除；去除 Center/with 选选 项；在项；在 Product of 栏栏填入上一步找到的母离子的准确分子量；在表格中填入上一步找到的母离子的准确分子量；在表格
15、中 start(Da)栏栏填填 50， stop(Da)栏填入质量大于母离子分子量即可，栏填入质量大于母离子分子量即可，Time （sec ）填）填 1；检查检查 Source/Gas 项是否与项是否与 Q1 扫描时相同（扫描时相同（CAD 默认默认值即可值即可) ； Compound 项设定项设定 DP 60， EP 10 或默认值，或默认值，CE 5，CXP 15 或默认值；或默认值；B 、点击、点击 start 采集数据，手动调节采集数据，手动调节 CE 值（每次增加值（每次增加5） ，直到右侧质谱图中母离子的信号约，直到右侧质谱图中母离子的信号约 只有最强碎片离子只有最强碎片离子信号三
16、分之一左右，再保持继续采集信号三分之一左右，再保持继续采集 1min ，点击，点击 stop ，在左侧在左侧 TIC 图上按住鼠标左键托选最后图上按住鼠标左键托选最后 1min 谱图，再双谱图，再双击选中的谱图，在下方平均谱图中记录两个最强的碎片离击选中的谱图，在下方平均谱图中记录两个最强的碎片离子分子量。子分子量。83、优化离子对参数：、优化离子对参数：MRMA 、在、在 当前方法文件的当前方法文件的 Scan Type 下选择下选择 MRM ；在；在表格中表格中 Q1 栏填母离子分子量，栏填母离子分子量，Q3(Da)栏子离子分子量，栏子离子分子量，Time （msec ）填）填 50，ID 栏填化合物名称（信号强的离栏填化合物名称（信号强的离子对名称后空格加子对名称后空格加 1，信号弱的为，信号弱的为 2） ，每个离子对填一行；，每个离子对填一行；检查检查 Source/Gas 项是否与项是否与 Q1 扫描时相同（扫描时相同（CAD 默认值即默认
