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1、产超广谱酶大肠埃氏产超广谱酶大肠埃氏 菌耐药性的监测与分菌耐药性的监测与分 析析【关键词】 超广谱 摘 要 目的：通过检测产超广谱 内酰胺酶（ESBLS）大肠埃氏菌的耐药性，以便对其进行有效临床监控和治疗。方法：利用纸片扩散法确定产超广谱 内酰胺酶（ESBLS）大肠埃氏菌，并用 Microscan Walkway 40 全自动细菌鉴定仪和 NE 21 细菌鉴定板进行产超广谱 内酰胺酶（ESBLS）的药敏监测。结果：50 株大肠埃氏菌中对多种抗生素表现为高度耐药性，特别是对头孢第三代抗生素的耐药率高达 100，对头孢第四代抗生素（如马斯平）也表现为高度耐药性，但对泰能（亚胺培南）呈高度敏感。结论
2、：泰能（亚胺培南）可作为产超广谱内酰胺酶（ESBLS）大肠埃氏菌感染临床治疗的首选药物。关键词 超广谱 内酰胺酶； 大肠埃氏菌； 耐药性的分析近年来，由于第三代头孢类和超广 内酰胺类抗生素均广泛应用于临床，致使由质粒介导的产超广谱 内酰胺酶（ESBLS）细菌如大肠埃氏菌的耐药性越来越高。因此，产 内酰胺酶（ESBLS）的耐药性已成为人们广泛关注的临床问题。我们利用50 例临床标本，分离出大肠埃氏菌并进行耐药性检测，报告如下。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 菌株来源 本实验所用标本均为我院细菌室分离出的菌株，其中尿液 20 株、痰液 10 株、血液 5 株、脓液 3 株、支气管冲洗液 6
3、株、咽拭子6 株。1.1.2 仪器 Microscan Walkway 40 全自动细菌鉴定仪和 NE 21 复合鉴定板（均为美国 DATA 公司生产） ，以及 Forma 培养箱（美国Forma 公司生产） 。1.1.3 试剂 Mieller-Hinton 琼脂（中国药品生物制品检定所生产）和 9 cm细菌平板。1.1.4 药敏纸片 头孢他啶（每片 30g）和头孢噻肟(每片 30g)，均由北京天坛药物生物技术开发公司生产；头孢他啶/克拉维酸（每片30/10g）和头孢噻肟/克拉维酸(每片 30/10g)，均由英国OXOID 公司生产。1.2 方法1.2.1 菌株鉴定 按全国临床检验操作规程进行
4、细菌的分离与培养。1.2.2 ESBLS 确证试验 按 NCCLS 的标准单纸片扩散法，在 MHA 琼脂培养基上涂菌液后，选用含有抑制剂的头孢他啶/克拉维酸（每片 30/10g）和头孢噻肟/克拉维酸(每片 30/10g)的纸片，并与不含有克拉维酸的头孢他啶（每片 30g）和头孢噻肟(每片 30g)纸片同时贴入培养基上，放入 35 恒温箱内孵育 1618 h，然后观察结果：加克拉维酸纸片抑菌环直径减去不加克拉维酸纸片抑菌环直径5 mm，即可判断 ESBLS 为阳性。与此同时，标准菌株大肠埃希氏菌 ATCC25922 也应同步进行。1.2.3 药敏试验 用 Microscan Walkway 40
5、 全自动细菌鉴定仪及所配备的 NC21复合板进行药敏鉴定。2 结果2.1 50 株大肠埃氏菌分布情况 见表 1。表 1 50 株大肠埃氏菌分布情况（略）2.2 50 株大肠埃氏菌进行药敏鉴定 结果见表 2。表 2 50 株大肠埃氏菌对 20 种抗生素耐药的结果（略）注：R-耐药，I-中介，S-敏感2.3 对表 1 中 11 株产 内酰胺酶（ESBLS）大肠埃氏菌进行药敏鉴定，其结果见表 3。表 3 11 株产 ESBLS 大肠埃氏菌对 20 种抗生素耐药的结果（略）注：R-耐药，I-中介，S-敏感3 讨论3.1 目前检验 ESBLS 的方法有多种，但是只有其中 2 种方法（即纸片扩散法和标准肉
6、汤稀释法）可以确认 ESBLS。在 50 株大肠埃氏菌中检测出 11 株产 内酰胺酶（ESBLS） ，阳性率为22。3.2 从表 1 可见,主要感染区为内科 ICU、肾内科等重症病区。其原因主要有：重症病区的病人随着超广谱 内酰胺类抗生素、免疫抑制剂和进口药物的广泛应用，以及喹诺酮类抗菌药物的不合理使用，使细菌产生某些基因突变，从而引起细菌对某些药物的耐药性。由于重症病区的病人住院时间长，加上长期用药使机体抵抗力降低，细菌间容易相互传递扩散，致使细菌的耐药性普遍升高。3.3 从药敏试验结果看，在 50 株大肠埃氏菌中，对头孢西丁、阿米卡星、亚氨培南、哌拉西林/三唑巴坦敏感率为74100，尤其是
7、哌拉西林/三唑巴坦和亚氨培南（泰能）敏感率为 100，而对氨基糖苷类（除阿米卡星外） 、喹诺酮类等其他抗生素却显示极高的耐药性。另外，产 内酰胺酶（ESBLS）药敏鉴定结果显示，只有亚氨培南（泰能）对产 内酰胺酶（ESBLS）敏感率为 100，其余都为高度耐药。其原因主要有：在产 内酰胺酶（ESBLS）的细菌质粒中，可能同时携带了氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类抗菌药物等耐药基因而对多种药物耐药1 。大肠杆菌所产生的产超广谱 内酰胺酶。由于产超广谱 内酰胺酶是一类水解相当广泛的 内酰胺酶，不仅能水解青霉素和一、二代头孢菌素，还能水解三代头孢菌素及单环 内酰胺类抗生素2 。因此，对上述药物出现了多重
8、耐药，从而导致临床治疗失败 。3.4 头孢类药物耐药分析 头孢西丁对大肠埃氏菌的耐药率为 26.0，而对产 内酰胺酶（ESBLS）大肠埃氏菌其耐药率为 90.9。头孢呋肟耐药率为 56.0，对产 内酰胺酶（ESBLS）大肠埃氏菌耐药率为100%，其余头孢类药物对大肠埃氏菌都有不同程度的耐药，但对产 内酰胺酶（ESBLS）大肠埃氏菌耐药率都为 100%。因此，产 内酰胺酶（ESBLS）菌对常用的头孢类抗生素耐药率较为普遍，给临床抗菌治疗疾病带来了极大的困难。综合上述：目前对产 内酰胺酶（ESBLS）大肠埃氏菌进行临床治疗的首选药物仍然是泰能（亚胺培南） ；含有酶抑制剂的复合物和氨基糖苷类（如阿米
9、卡星）也具有一定的治疗效果。因此，掌握产 内酰胺酶（ESBLS）菌的耐药特性，建立适当的检测方法，及时、准确地检测出产 内酰胺酶（ESBLS）菌株及其耐药机制，对指导临床合理使用抗生素、延缓细菌的产生、控制耐药菌株的传播以及研究、开发新型、稳定高敏抗生素都具有重要意义3 。参考文献1杨立军，朱立华. 产超广谱 内酰胺酶大肠埃氏菌耐药株中整合子基因研究J. 中华检验医学杂志，2003，26（7）:436.2黄国兰，徐咏涛. 重庆地区产超广谱 内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃氏菌耐药观察J.国外医学临床生物化学与检验学分册, 2003，24（1）:105.3苏丹虹. 做好 ESBLS 检测指导临床合理使用抗生素J. 岭南医学检验与临床，2001，4（1）：18.(广东省人民医院 检验科 广东 广州 510080）作者：黄美群毕燕玲宁秋
