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1、生物安全保护生物安全保护级级 SARS 尸体解剖实验室的建立和使用尸体解剖实验室的建立和使用摘要摘要 目的： 在北京地坛医院建立具有生物安全保护级（BSL-3）尸体解剖 实验室，进行 SARS 尸体病理解剖、标本采集和发病机制研究，以确保工作人 员的安全、确保周围环境的安全、标本的传送的安全。材料和方法：BSL-3 尸 体解剖室实行区域隔离，将实验室分为污染区、缓冲区、半污染区和清洁区。 通过对送风和排风的严格控制，清洁区为正常大气压区，半污染区为负压区 （约-10pa） ，污染区为更小的负压区（约-30pa） 。实验室内气流按照气压梯度自 清洁区向污染区定向流动，送入实验室内是经高效过滤的新
2、风，排出实验室的 空气经过高效过滤器净化处理。缓冲区 1 位于污染区与半污染区之间，为解剖 后工作人员的外防护服的多方位药液消毒、自消毒风淋再消毒区域。缓冲区 2 位于污染区与太平间之间，也是污染物品外通道。半污染区设有自消毒风淋系 统，随时杀灭可能进入半污染区的微量病毒。全部进入污染区的工作人员都穿 戴防毒面具和无渗漏防化服。进入半污染区的工作人员必须戴防毒面具，穿隔 离服。结果：将模拟 SARS 的污染物大量弥散于污染区，在污染区内穿戴防 毒面具和无渗漏防化服的工作人员经过缓冲区 1 的多方位药液消毒、自消毒风 淋再消毒后，并进入半污染区和清洁区，在半污染区和清洁区检测不到污染物。 经高效
3、过滤后，实验室内排出周围环境的空气洁净度为 7 级（0.5m 的尘 粒数为35200 粒/m3， 352000 粒/m3； 3m 的尘粒数为300 粒 /m3，3000 粒/m3） 。在 SARS 肆虐期间，共完成了 15 例临床疑似 SARS 和 SARS 死亡病例的病理解剖工作，其中 7 例为病理确定诊断的 SARS 死亡病例。 参加 SARS 死亡病例的病理解剖的工作人员共 23 人，2003 年 5 月到 7 月连续 工作 2 个月余，无 1 人发生交叉感染。结论：规范化的 BSL-3 尸体解剖实验室 的建立和管理，可以在确保工作人员的安全、确保周围环境的安全、确保标本 的传送的安全的
4、前提下，对 SARS 死亡病例的尸体的系统、全面的病理学检查、 标本采集，将为 SARS 的病原学、发病机制，病理学，诊断、治疗和预防研究 提供保障。关键词关键词 严重急性呼吸综合征； 尸体解剖；生物安全保护级尸体解剖实验 室The Establishment and Application of Biosafety Level 3 Autopsy Laboratory For SARSAbstract Objective: To ensure the safety of the staffs, the environment of the surroundings and the trans
5、portation of the specimens, Biosafety Level 3（BSL-3） Autopsy Laboratory For SARS，in which complete autopsy for SARS was performed, was established in Beijing Ditan Hospital. Materials and Method: BSL-3 Autopsy Laboratories For SARS was divided into five sections: clean area, buffer zone, semi-contam
6、ination area, buffer zone, and contamination area. Clean area was in normal pressure state. semi-contamination and contamination area were in specific underpressure state, about 10pa and 30pa respectively. The pressure gradient between different areas was realised mainly by controlling the volume of
7、 delivered and discharged air flow of each section. Air flow delivered into each section was prefiltered by fine filter, Air flow delivered into outside of the laboratory was purified by fine filter and gas filter. Buffer zoneas a special passage for goods was built for the sake of avoiding cross-in
8、fection. Impermeable protective clothing and protective mask must be worn during the process of autopsy. After autopsy, decontamination procedure by special agent and circle clean air must be carried out for each staff in buffer zone. Results: When a certain concentration of simulation of SARS virus
9、 was created in contamination area. A stuff , Who wore impermeable protective clothing and protective mask in contamination area, then went through buffer zone, semi-contamination area, clean area. After decontamination procedure by special agent and circle clean air, simulation could not be detecte
10、d in semi-contamination area and clean area. The cleanness of air flow discharged from the laboratory reach class 7(the number of particles larger than or equal to 0.5m in diameter 35200/m3，300/m3，352000 粒/m3， 3520000 粒/m3； 3m 的尘粒数为3000 粒/m3，30000 粒/m3） 。通过送风和排风量的调节和控制， 从污染区、半污染区、到缓冲区 2 和清洁区形成负压梯度。污
11、染区为负压区约- 40pa，半污染区的负压约-10pa。缓冲区 2（更衣、淋浴）和清洁区为正压区。 全部从实验室排出的空气都需要经过军用 C 类高效过滤器（military high efficency particulate air filter）和毒气过滤器过滤后排放，确保排放空气达到洁 净度 7 级（cleanness class 7） 。军用 C 类高效过滤器可以将 99.9999%的3m 的尘粒过滤在系统内，将 99.99%的 0.1m 的尘粒过滤在系统内。确保排出 的气体无害、无毒、无污染（图 1） 。图 1 区域隔离、通风和空气净化系统污染区内中央为尸体解剖台，新风自解剖台上方排
12、下，外排风在周围墙根 部抽出，在解剖人员和遗体之间形成气幕隔离（图 2） 。 个体防护和个体消毒：进入污染区的工作人员必须穿内消毒衣、裤，外 层穿军用无渗漏防化服和防毒面具，戴三层橡皮手套，最外层手套用不干胶带 封闭。解剖完毕，必须在解剖室内用消毒液清除手套和防化服的血渍，然后进 入缓冲区 1，先经过多方位洗涤消毒室，用消毒液冲洗全身各部位 5m，擦干后， 进入自消毒风淋室，经臭氧消毒 5m。进入半污染区，脱去外防化服、手套和防 毒面具。半污染区设置负氧离子发生器，随时杀灭空气内的病原体。在缓冲区 2 脱去区内消毒衣、裤，淋浴、更衣。进入半污染区的遥控工作人员必须穿隔 离服，戴手套和防毒面具。
13、 人流与物流分离：缓冲区 2 为污物（遗体和标本）走廊，联结停尸房和 污染区。 污物和污水处理：解剖室内污物随遗体进行活化处理。解剖室内不设置 上下水，地面清洁使用 3000mg/L 含氯消毒液清擦。缓冲间内冲洗后消毒液、 淋浴间的废水进入地坛医院污水消毒处理系统，经过消毒处理后排放。 完全系统的尸体解剖检查：每个遗体的病理检查必须按照常规进行各系 统的全面检查，大体标本照相，解剖过程全部录象。解剖检查结果进行录音记 录，解剖后进行文字整理记录。解剖室内进行常规石蜡切片、超薄切片、冷冻 组织取材。 日常管理：解剖完毕后，实验室紫外线消毒 1h,将空气过滤系统切换到 值班风机状态，用 3000m
14、g/L 含氯消毒液，按照 20ml/m3气溶胶喷雾消毒后，待新鲜空气解 剖 台出风口出风口图 2 气幕隔离下次使用。 标本管理制度：所有标本的使用，尤其冷冻标本的使用，必须经对使用 单位进行资质审查后，由课题负责人审查、签字，实验室负责人复查后，存档。 由 2 人按照规范程序进入实验室取标本。发出的标本按照相关规范包装、消毒， 专车传送。 常规石蜡切片处理：SARS 尸体解剖取材标本经过 10%福尔马林固定 24h 后，石蜡包埋、切片、染色均使用单独的整套设备，专人负责进行，并采 用防护措施（穿防护服、戴口罩和橡皮手套、淋浴等） 。 工作人员隔离制度：为确保安全，全部工作人员进行集体隔离，每日
15、进 行体温检查。结结 果果 实验室内模拟实验检测结果：将模拟 SARS 的污染物大量弥散于污染区， 在污染区内穿戴防毒面具和无渗漏防化服的工作人员经过缓冲区 1 的多方位药 液消毒、自消毒风淋再消毒后，进入半污染区和清洁区，在半污染区和清洁区 检测不到污染物。 实验室排放检测结果：经高效过滤后，实验室内排出周围环境的空气洁净 度为 7 级（0.5m 的尘粒数为35200 粒/m3， 352000 粒/m3； 3m 的 尘粒数为300 粒/m3，3000 粒/m3） 。 实验室使用结果：在 SARS 肆虐期间，共完成了 15 例临床疑似 SARS 和 SARS 死亡病例的病理解剖工作，其中 7
16、例为病理确定诊断的 SARS 死亡病例， 为完成科技部的课题提供了可靠的安全保障。参加 SARS 死亡病例的病理解剖 的工作人员共 23 人，2003 年 5 月到 7 月连续工作 2 个月余，无 1 人发生交叉 感染。 全部解剖病例均获得了肉眼检查、显微镜检查、电镜检查、分子生物学检 查的完整资料，达到了课题设计要求。 讨论讨论传统尸体解剖室的建设思路简单、设施陈旧、装备落后，对工作人员的防 护、环境保护、防止传染病病原体的扩散等方面缺乏现代理念，在建筑布局、 设施和设备的配套建设中，只能满足了尸体解剖检查的需要，完全不能承担 SARS 等危险组 4 类传染病遗体的病理解剖工作。在 2002 年冬季到 2003 年春 季 SARS 肆虐期间，一些病理学家不顾个人安危，在传统尸体解剖室进行了少 数 SARS 遗体的病理解剖工作，为人类对 SARS 的病理变化和发病机制的研究 作出了积极的
