芒果叶多酚的提取

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1、1超声波辅助提取芒果叶多酚的工艺研究超声波辅助提取芒果叶多酚的工艺研究陈娇莲 陈银珠 郑楚萍（ 韩山师范学院化学系 2008 级化学 2 班 ）摘要：摘要：本实验对超声波法辅助提取芒果叶中多酚类化合物的工艺研究条件进行了研究。通过单因素提取实验和正交实验。结果表明，芒果叶多酚的提取最佳条件为：乙醇浓度 40%、料液比 1：23、超声波功率 240w、超声时间 28min。在此条件下，我们将进行芒果叶多酚的提取。此法提取率高，操作简便、省时。关键词：关键词：超声波 芒果叶 多酚 提取工艺1 前言前言1.11.1 简介简介 芒果又名望果，即取意“希望之果” ，营养价值很高。芒果是重要的热带和亚热带

2、水果，其香味浓郁，风味独特，深受国内外消费者的欢迎1。芒果除食用外，具有极大的药用价值，其果皮也可入药，为利尿、浚下剂，其核仁肥大，含蛋白质6 %，脂肪16 %，碳水化合物69 %，仁与芒果叶均可入药2。芒果叶作为芒果的副产品，富含许多活性成分，其中多酚类化合物具有广泛的生理活性，包括抗氧化、抗菌、抗衰老、治疗心脑血管疾病、抗癌等。多种植物多酚已经被商业化开发利用，如葡萄多酚、松树皮多酚（碧罗芷，Pycnogenol）、茶多酚、苹果多酚等3，国外对此类研究方兴未艾，尤其是侧重于从农副产品废弃物中提取多酚类物质。芒果叶含有相当的生物活性成分，又因为它资源丰富，目前基本上作为废弃物被抛弃，若能变废

3、为宝，将芒果叶进行深加工，将会具有十分重大的经济价值和现实意义。本实验在单因素实验、正交实验选择最佳提取条件下，对芒果叶多酚进行提取，具有重要的理论价值和实践意义。1.2 超声波的优点超声波是一种高频机械波，频率范围在 1560 kHz 的超声，常被用于过程强化和引发化学反应。超声场主要通过空化相体系提供能量，瞬间空化可实现 5000的高温和50 MPa 的局部高压，它具有提取速度快，收率高等优点，已被许多中药分析过程选为供试样处理手段。超声波细胞粉碎机是一种利用强超声在液体中产生空化效应，对物质进行超声处理的多功能、多用途的仪器，能用于多种动植物细胞、病毒细胞的破碎，同时可用来乳化、分离、提

4、取、消泡、脱气、清洗及加速化学反应等等。被广泛应用于生物化学、微生物学、药物化学、表面化学、物理学、动物学、农学、制药等领域的教学、2科研及生产。本研究主要采用超声波辅助提取芒果叶中的多酚类化合物，用络合-分光光度法测定其含量，确定芒果叶多酚提取的最佳条件，为芒果叶的开发利用提供科学的理论依据。2 2 实验目的实验目的 芒果叶含有相当的生物活性成分，又因为它资源丰富，目前基本上作为废弃物被抛弃，若能变废为宝，将芒果叶进行深加工，将会具有十分重大的经济价值和现实意义。3 3 实验原理实验原理根据芒果叶多酚性质特点，在完成其最优提取条件探究下对其进行提取。3.13.1 含量测定方法的建立含量测定方

5、法的建立 3.1.1 酒石酸酒石酸亚铁亚铁的配制的配制准确称取硫酸亚铁 1.00g、酒石酸钾钠：5.00g，混合、烧杯中溶解，转移至 1000ml容量瓶中，加蒸馏水定容。3.1.2 pH=7.5 的的 KH2PO4- Na2HPO4缓缓冲溶液的配制冲溶液的配制4A 液：称取十二水合磷酸氢二钠 23.87g，烧杯中溶解，转移至 1000ml 容量瓶中，加蒸馏水定容B 液：称取 110C 烘干 2h 的磷酸二氢钾 9.07g，烧杯中溶解，转移至 1000ml 容量瓶中，加蒸馏水定容取上述 A 液 85ml、B 液 15ml 混合均匀。3.1.3 标标准曲准曲线线的的绘绘制制称取 0.2000g 焦

6、性没食子酸标准样品，移入 100mL 容量瓶中，加 50%乙醇溶液定容至 100mL，得 2mg/mL 焦性没食子酸储备液。分别吸取焦性没食子酸储备液 0 mL、1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5mL、6 mL、7 mL、8 mL、9 mL 、10 mL、11 mL 、12mL，移入 50mL 容量瓶中，加 50%乙醇溶液定容至 50mL。取 1mL 移入 25mL 比色管中，加 4mL 水和 5mL 酒石酸亚铁溶液，加 pH 值 7.5 的 KH2PO4- Na2HPO4 缓冲溶液定容至 25mL，室温静置 5min,用 1cm 玻璃比色皿于 540nm 处测定吸光度，绘制标准曲线。

7、表 1 标准曲线绘制数据浓度（mg/ml）0.040.080.120.160.200.240.280.320.360.400.440.48吸光度0.0260.0480.0750.0960.1250.1530.1780.2050.2260.2560.2810.3123以吸光度为纵坐标，标准液浓度（mg/mL）为横坐标，绘制标准曲线：焦性没食子酸标准曲线y = 0.6486x - 0.0035R2 = 0.999400.050.10.150.20.250.30.3500.10.20.30.40.50.6浓度（mg/ml）吸光度吸光度 线性 (吸光度)图 1 焦性没食子酸标准曲线3.23.2 单因素

8、实验单因素实验5-14称取芒果叶粉末 1.00g 于 150 mL 锥形瓶中，加入一定量的乙醇溶解，经超声波处理后水浴浸提一段时间，固液离心分离，得测定样液。准确吸取 1mL 测定样液，加乙醇稀释到 25mL，再吸取 1mL 于 25mL 具塞比色管中，再加入 4mL 水和 5mL 酒石酸亚铁溶液，加 pH 值 7.5 KH2PO4-Na2HPO4缓冲溶液定容。采用比色法，以焦性没食子酸为标准液，以试剂空白作对照，于 540 nm 波长处测定吸光度，以焦性没食子酸的相当值表示。根据标准曲线，计算出芒果叶样品中的总多酚含量。3.2.1 乙醇乙醇浓浓度度选择实验选择实验（浸提（浸提 30min、料

9、液比、料液比 1： ：20、超声、超声时间时间 15min、超声功率、超声功率 240W） ）表 2 乙醇浓度选择实验乙醇浓度多酚提取率（mg/g）吸光度样品质量（g）10%30.84800.1571.002930%48.37460.2481.001350%43.53890.2541.003070%46.18070.2361.001590%46.86410.2461.00694多酚提取率（mg/g）0.000010.000020.000030.000040.000050.000060.00000%20%40%60%80%100% 乙醇浓度多酚提取率（mg/g）多酚提取率 （mg/g）图 2 乙

10、醇浓度选择实验3.2.2 料液比料液比选择实验选择实验（浸提（浸提 30min、超声、超声时间时间 15min、超声功率、超声功率 240W、乙醇、乙醇浓浓度度 50%） ）表 3 料液比选择实验料液比多酚提取率（mg/g）吸光度样品质量（g）1：1037.76870.1921.00031：1545.35580.2321.00211：2053.35600.2751.00641：2548.58010.2491.00271：3040.29400.2071.0090多酚提取率（mg/g）01020304050601:101:151:201:251:30 料液比多酚提取率（mg/g）多酚提取率 （mg

11、/g）图 3 料液比选择实验53.2.3 超声功率超声功率选择实验选择实验（浸提（浸提 30min、超声、超声时间时间 15min、乙醇、乙醇浓浓度度 50%、料液比、料液比 1： ：20） ）表 4 超声功率选择实验超声功率（W）多酚提取率（mg/g）吸光度样品质量（g）8050.19630.2581.004816051.45410.2641.002624053.35600.2751.006432051.89830.2681.008840048.87370.2501.0006多酚提取率（mg/g）484950515253540100200300400500 超声功率（W）多酚提取率（mg/g

12、）多酚提取率 （mg/g）图 4 超声功率选择实验3.2.4 超声超声时间选择实验时间选择实验（浸提（浸提时间时间 30min、乙醇、乙醇浓浓度度 50%、料液比、料液比 1： ：20、超声功率、超声功率240W） ）表 5 超声时间选择实验超声时间（min）多酚提取率（mg/g）吸光度样品质量（g）546.52140.2401.00761050.38320.2591.00481550.75480.2601.00362051.56280.2641.00062552.16140.2711.00053051.14770.2661.00206多酚提取率（mg/g）464748495051525301

13、0203040 超声时间（min）多酚提取率（mg/g）多酚提取率 （mg/g）图 5 超声时间选择实验3.2.4 乙醇乙醇 PH 选择实验选择实验（浸提（浸提时间时间 30min、乙醇、乙醇浓浓度度 40%、料液比、料液比 1： ：23、超声功率、超声功率240w、超声、超声时间时间 28min） ）表 6 乙醇 pH 选择实验乙醇 pH多酚提取率（mg/g）吸光度 样品质量（g）3.0154.21310.2781.00114.0253.88700.2771.00365.0155.20810.2841.00395.9856.26460.2901.00557.0255.13210.2841.0

14、0537.9954.10750.2791.00667多酚提取率（mg/g）53.55454.55555.55656.50246810 乙醇PH多酚提取率（mg/g）多酚提取率（mg/g）图 6 乙醇 PH 选择实验3.2.5 浸提次数浸提次数选择实验选择实验表 7 浸提次数选择实验浸提次数多酚提取率（mg/g）吸光度样品质量（g）152.73860.2701.0010249.92390.2561.0026350.01540.2571.0046449.74750.2551.0023多酚提取率（mg/g）49.55050.55151.55252.553012345 提取次数多酚提取率（mg/g）多

15、酚提取率（mg/g）图 7 浸提次数选择实验83.33.3 正交实验正交实验选择 L9（34）正交表，即 4 因素 3 水平 9 次实验正交试验表 8 正交试验数据安排表因素乙醇浓度（%）料液比超声功率（w）超声时间（min）1401：17200222501：20240253601：2328028表 9 正交实验结果及数据处理实验号乙醇浓度（%）料液比超声功率（w）超声时间（min）多酚含量（mg/g）11（40）1（1：17）1（200）1（22）50.010422（1：20）2（240）2（25）58.2768313（1：23）3（280）3（28）60.348042（50）12349.3

16、5435223152.52586231254.515673（60）13249.46858321354.14289332154.9890K1168.6352148.8332158.6688157.5252K2156.3957164.9454162.6201162.2609K3158.6003169.8526162.3423163.8451k 156.211749.611152.889652.5084k 252.131954.981854.206754.0870k 352.866856.617554.114154.6150优水平A 1B3C2D3R4.07987.00641.31712.1066主次顺序DBAC影响因素乙醇浓度时间温度料液比最优水平A2B2C3D2正交试验数据显示最佳提取条件为乙醇浓度 40%、料液比 1：23、超声功率9240w、超声时间 28min,乙醇 pH=6。在此条件下对芒果叶多酚提取，优水平下测的总多酚含量为 65.6534mg/g 本实验在以上的研究前提下，运用超声波细胞粉碎技术提取芒果叶多酚蒸发浓