甲基化调节DRGμ片受体表达介导吗啡在神经病理性疼痛中的镇痛效应变化

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1、研究生个人简介基本信息姓名:周学龙出生年月:1 9 8 8 年0 4 月籍贯:皖滁性别:男教育经历2 0 0 5 年1 0 月_ 2 0 1 0 年0 7 月2 0 1 0 年0 9 月2 0 1 3 年0 7 月工作或实习经历2 0 0 9 年0 6 月2 0 1 0 年0 6 月2 0 1 2 年0 2 月2 0 1 2 年0 9 月参与课臣民族:政治面貌:英语水平:计算机:汗团员六级国家二级就读于安徽医科大学就读于徐州医学院研究生院安徽医科大学附属医院实习浙江大学医学院附属第二医院实习阿片药物在神经病理性疼痛的中的表观遗传学调控发表文章1 P 1 3 Kc o n t r i b u t

2、 e dt om o d u l a t i o n o fs p i n a ln o c i c e p t i v ei n f o r m a t i o nr e l a t e dt oe p h r i n B s E p h B s P L o SO n e 2 0 1 2 ;7 ( 8 ) :e 4 0 9 3 0 2 P 1 3 K A k t 信号转导通路在E p h B 受体介导大鼠神经病理性痛中的作用中华麻醉学杂志,2 0 1 2 ,3 2 :0 2 5 4 1 4 1 6所获奖励无目录缩略词表1中文摘要。2A b s t r a c t 8前言1 4月吾l 第一部分

3、腹腔注射吗啡对慢性炎性疼痛和慢性神经病理性疼痛小鼠痛行为的影响材料和方法1 61 材料OJOQ 1 62 方法1 6结果2 0第二部分侧脑室、鞘内和足底注射吗啡对慢性神经病理性疼痛小鼠痛行为的影响材料和方法2 31材料2 32 方法2 3结果2 6第三部分外周神经损伤对小鼠脊髓和背根神经节中“阿片受体蛋白和m R N A 表达的影响材料和方法2 91材料2 92 方法3 l结果3 5第四部分背根神经节中p 阿片受体蛋白贡献于外周神经损伤对小鼠脊髓中p 阿片受体蛋白表达的影响材料和方法3 71材料3 72 方:法3 8结果4 0第五部分背根神经节中肛阿片受体亚细胞定位材料和方法4 21材料4 2

4、2 方法4 3结果4 5第六部分斗阿片受体基因启动子甲基化状态对外周神经损伤引起的小鼠背根神经节“阿片受体表达的影响材料和方法4 71材料4 72 方法4 8结果5 4第七部分离体研究甲基化p 阿片受体基因启动子对其转录活性的影响材料和方法5 71材料5 72 方法5 7结果6 0第八部分鞘内注射5 - a z a - d C 对外周神经损伤小鼠足底、鞘内、全身应用吗啡镇痛效应的影响材料和方法6 21材料6 22 方法6 2结果6 5第九部分鞘内注射5 - a z a - d C 对外周神经损伤引起的l a 阿片受体基因启动子甲基化状态和小鼠背根神经节p 阿片受体表达的影响材料和方法6 91材

5、料6 92 方法6 9结果7 l第十部分鞘内注射5 - a z a - d C 对外周神经损伤小鼠脊髓和背根神经节中斗阿片受体蛋白和m R N A 表达的影响材料和方法7 51材料7 52 方法7 5结果7 7第十一部分背根神经节中肛阿片受体蛋白贡献于鞘内注射5 - a z a - d C 对外周神经损伤小鼠脊髓中斗阿片受体蛋白表达的影响材料和方法7 91材料7 92 方法7 9结果8 l讨论OO Q 一8 3结论O0OJ g 8 7参考文献一8 9综述9 4参考文献1 0 0攻读硕士学位期间发表学术论文一1 0 5临床培i ) l l ,J , 结一1 0 6致谢一1 0 8论文独创性声明一

6、1 0 9论文使用授权声明一1 0 9论文审阅认定书一1 1 0徐州医学院硕士学位论文缩略词5 a z a d CB S PC C IC G I 心C N SC p GD PD R GI B 4i C v i p 1 i t M O RN F 2 0 0N PP PP W LS C 缩略词表A b b r e v i a t i o n英文全称5 - A z a - 2 - d e o x y c y t i d i n eb i s u l f i t eg e n o m i cs e q u e n c i n gc h r o m cc o n s t r i c t i v ei n

7、 j u r yc a l c i t o n i ng e n e r e l a t e dp e p t i d ec e n t r a ln e r v o u ss y s t e mc y t o s i n eg u a n i n ed i n u c l e o t i d ed i s t a lp r o m o t e rd o r s a l r o o tg a n g l i o nl e c t i nB 4I n t r a c e r e b r o v e n t r i c u l a ri n t r a p l a n t a r l yi n t

8、 r a t h e c a lm uo p i o i dr e c e p t o rn e u r o f i l a m e n t - 2 0 0k dn e u r o p a t h i cp a i np r o x i m a lp r o m o t e rp a ww i t h d r a w a ll a t e n c ys u b c u t a n e o u s中文全称5 杂氮- 2 - 脱氧胞苷亚硫酸氢盐修饰后测序法慢性缩窄性坐骨神经损伤降钙素基因相关肽中枢神经系统胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸远端启动子背根神经节植物凝集素侧脑室注射足底注射鞘内注射p 阿片受体2 0

9、 0 k d 神经纤维神经病理性疼痛近端启动子热缩足潜伏期腹腔注射徐州医学院硕士学位论文甲基化调节D R G I t 阿片受体表达介导吗啡在神经病理性中的疼痛镇痛效应变化中文摘要目的神经病理性疼痛是由躯体感觉神经系统的损伤或疾病而直接造成的疼痛。研究表明尽管应用强效的阿片类镇痛药物,但仍然有约半数的神经病理性疼痛患者疼痛程度没有得到缓解。研究报告,p 阿片受体在镇痛药物如吗啡的临床效应以及长时间和大量使用阿片类药物所引起的耐受和生理依赖的发生发展过程中均起着关键的作用。近些年,越来越多的证据证明,外周神经损伤后,脊髓以及背根神经节神经元( D R G ) 中肛阿片受体的表达水平降低。这就为吗啡

10、在治疗神经病理性疼痛时镇痛效应降低提供了一个合理的解释。但是,具体的表达降低的位置仍然存在争议以及外周神经损伤后“阿片受体动态变化的分子机制却并不清楚。有研究报道指出斗阿片受体基因受到D N A 甲基化修饰的调控。本实验的目的旨在探讨外周神经损伤后“阿片受体表达变化的具体位置以及D N A 甲基化修饰调控是否参与了外周神经损伤引起的“阿片受体的表达。方法l 、为观察全身应用吗啡对慢性神经病理性疼痛的镇痛效应,分别于慢性坐骨神经缩窄性损伤( c o x ) 模型建立后l d 、3 d 、7 d 、1 4 d 腹腔注射3 m g k g 吗啡,检测每次给药后3 0 m i n 时损伤侧的热缩足反射潜伏期;在模型建立以后7 d 腹腔给予V e h i c l e 或l m g k g 、3 m g k g 、1 0 m g k g 吗啡,检测每次给药后1 0 n f i n 、2 0 m i n 、3 0 m i n 、4 0 m i n 、5 0 r a i n 、6 0 m i n 时损伤侧的热缩足反射潜伏期。2 、为观察侧脑室、鞘内、外周应用吗啡对慢性神经病理性疼痛的镇痛效应,于模型建立后7 d 侧脑室给予V e h i c l e 或0 0 5 n m o l

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