红茂草生物碱的提取与体外抑菌研究

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1、中草药及天然产物资源开发与保护相关技术研讨会红茂草生物碱的提取与体外抑菌研究赵强1 ,王廷璞扣,孙国禄1 ,杨明3 ( 1 甘肃工业职业技术学院化学与环境工程系,甘肃天水7 4 1 0 2 5 ; 2 天水师范学院生命科学与化学学院,甘肃天水7 4 1 0 0 1 ; 3 甘肃省畜牧兽医研究所,甘肃平凉7 4 4 0 0 0 )捅要:采用醇提法提取红茂草生物碱,经石英色谱柱层析分离,对析出晶体进行T L c 检测、 紫外光谱和红外光谱检测。将该晶体对五种供试菌进行体外最小抑制浓度( M I C ) 、最低杀菌浓度 ( M B C ) 、半数抑菌浓度( I C ) 测定,L S D 法多重比较分

2、析。结果表明:红茂草生物碱除对奇异变形 杆菌抑制效果不显著外,对大肠埃希氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、粪肠球菌等的M I C 分别为:0 2 2m g m L 、0 1 8m g m L 、0 1 8m g m L 、0 3 0m g m L ;M B C 分别为:0 1 8m g m L 、0 1 8m g m L 、0 1 4m g m L 、0 3 0m g m L :I C m 分别为:0 1 8 0 7m g m L 、0 1 4 0 7m g m L 、0 。4 0 7m g m L 、0 2 6 0 5m g m L 。关键词:红茂草;生物碱;提取;抑菌活性E x t r a

3、 c t i o na n da n t i b a c t e r i a la c t i v i t i e so fD i c r a n o s t i g m al e p t o d u m ( m a x i m ) F e d d e sa l k a l o i dZ H A O0 i a n g ,W A N GT i n g - p u 4 ,S U NO u o l u l ,Y a n gM i n 9 4( 1 D e p a r t m e n to fC h e m i s t r ya n dE n v i r o n m e n t a lE n g i

4、n e e r i n g ;G a n s uI n d u s t r yP o l y t e c h n i cC o l l e g e :T i a n s h u i7 4 1 0 2 5 :C h i n a :2 C o l l e g eo fL i f eS c i e r i c ea n dC h e m i s t r y ,T i a n s h u iN o r m a lU n i v e r s i t y ,T i a n s h u iG a n s u7 4 1 0 0 1 ,C h i n a :3 G a n s uI n s t i t u t

5、eo fA n i m a lS c i e n c ea n dV e t e r i n a r yM e d i c i n e ,P i n g l i n g ,G a n s u ,7 “0 0 0 ,C h i n a )A b s t r a c t :T of u r t h e ru n d e r s t a n dD c r a n o s t i g r n al e p t o d u m ( m a x i m ) F e d d e ( D L F ) sa l k a l o i d 。m i n i m a li n h i b i t o r yc o n

6、 c e n t r a t i o n ( M I C ) ,m i n i m a lb a c t e r i c i d a lc o n c e n t r a t i o n ( j c ) a n dh a l fi n h i b i t o r yc o n c e n t r a t i o n ( I C ) w e r em e a s u r e db ym e a n so fb a c t e r i o s t a s i st e s t si nv i t r ot o t h eD L Fa l k a l o i d ,w h i c hw e r ee

7、 x t r a c t e db ya l c o h o la n dq u a r t zc h r o m a t o g r a p h i cc o l u m n C r y s t a lo fD L Fa l k a l o i dw e r et e s t e dt h r o u g hT L Ct e s t ,u l t r a v i o l e ts p e c t r u ma n di n f r a r e ds p e c t r u m T h ec r y s t a lw a su s e di nd e t e r m i n a t i o n

8、o nf i v ek i n d so fb a c t e r i a T h e nt h em u l t i p l ec o m p a r i s o n ( L S D ) w a sc a r r i e do u t T h er e s u l t ss h o w e dt h a tt h ee f f e c to fD L Fa l k a l o i dt oP r o t e u sm i r a b il i sw a sn o ts i g n i f i c a n t M I Co f t h eD L Fa l k a l o i da g a i

9、n s tE s c h e r i c h i ac o l LS t a p h y l o c o c c u sa u T e u s , B a c i l l u ss u b t i l i s , a n dE n t e T o c o c c u sf a e c a l i s , w a s0 2 2 ,0 1 8 ,0 1 8a n d0 3 0m g m L r e s p e c t i v e l y M B Co ft h eD L Fa l k a l o i da g a i n s tEc o l Ls a u T e u s , B s u b t i

10、 l i s , a n dE n 五a e c a l i s , w a s0 1 8 ,O 1 8 ,0 1 4a n d0 3 0m g m L ,r e s p e c t i v e l y I c ! ;0o ft h eD L Fa l k a l o i da g a i n s tE c o l LS a u T e u $ , B - s u b t i l i s , a n dE n f a e c a l i s , w a s0 1 8 0 7 0 1 4 0 7 。0 1 4 0 7a n d0 2 6 0 5m g m L ,r e s p e c t i v

11、 e l y K e yw o r d s :D i c r a n o s t i g 嬲al e p t o d u m( m a xi m )F e d d e ( D L F ) :a l k a l o i d :e x t r a c t i o n ;a n t i m i c r o b i a la c t i v i t y红茂草 B i c r a n o s t i g m a1 e p t o p o d u m ( m a x i m ) F e d d e ,D L F 又名秃疮花、秃子花、勒马同( 陕两) , 为罂粟科秃疮花属二年生或多年生草本植物,在甘肃省秦岭

12、南北、渭水流域分布“泛。该植物春、 夏两季均可采挖带根全草,阴干或鲜H j 。全国中草约汇编载:“苦、涩、凉,有毒”;陕两中基金项日:甘肃省科技厅科研基金资助项目( 0 3 ! - 2 3 ) ,l 于肃省5 5 5 人才资金资助项目( 2 0 0 3 1 6 7 ) 阶段性成果。作青介绍:赵强( 1 9 8 2 ) ,男,I r 肃灭水人,甘肃下业职业技术学院化学与环境T 程系讲师,硕士研究方向:药物分析化学j 兽医医药学宰通讯作者:J :廷璞( 1 9 6 5 ) ,男,甘肃秦安人,天水师范学院生命科学j 化学学院研究员。研究方向:分子生物学与免疫学中草药及天然产物资源开发与保护相关技术研

13、讨会草药载:“味苦、涩,性凉”; 民间兽医本草载:“味苦,性寒,有小毒”。全草有清热解毒、 消肿止痛、杀虫等功效;主治扁桃体炎、牙痛、咽喉痛、淋巴结核,外用于秃疮、疮疖疥癣、痈疽、 顽固性口炎、化脓性中耳炎、外伤、带状疱疹、阴囊癣、阴户肿痛、霉菌性阴道炎等症;对结核病 及羊口疮等有显著疗效嵋1 。 红茂草主要活性成分为多种异喹啉类生物碱,具有广泛的生物学活性。其生物碱有抗溶血和改 善微循环、抑制中枢和平滑肌、能提高心肌细胞的自我保护、能有效保护对小鼠C C I 。引起的肝损伤、能提高机体免疫功能等药理作用,可治疗多种结核病、外科创疡、对机体进行免疫调节,有保肝功 能,且安全无毒副作 用,但目前

14、国内外有关红茂草生物碱对致病菌的抑菌活性却一直未曾有过研究和 报道陋耻。因此,本实验旨在通过所提取的红茂草生物碱,对选用的5 种供试菌进行体外抑菌活性研究,为红茂草在临床应用及开发天然抗菌药物提供一定的理论依据。1 材料与方法1 1材料1 1 1 药材 红茂草干草粉末( 初夏采集于天水师范学院生物园规范化种植的红茂草,自然风干,粉碎,过 8 0 目筛) 1 1 2 仪器设备 R E 5 2 - 9 9 旋转蒸发器( 上海弧荣生化仪器厂产品) 、K Q - 5 0 0 D 型数控超声波清洗器( 昆山市超 声仪器有限公式产品) 、Z D P - 2 1 2 0 型电热培养箱( 上海智城分析仪器制造

15、有限公司产品) 、U v 一9 2 0 0 型紫外可见光分光光度计( 北京瑞利仪器分析有限公司产品) 、A B l 0 4 - S 精密电子分析天平( 瑞士 梅特勤公司产品) 、L a m b d a3 5 型紫外可见光光度计( P e r k i n E l m e r P r e c i s e l y 产品) 、S p e c t r u m o n e B 型傅立叶变换红外光谱仪( P e r k i nE l m e rP r e c i s e l y 产品) 1 1 2 药品及试剂 柱层析用( 2 0 0 - - 一3 0 0 目) 中性A 1 2 0 3 ( S i n o p

16、 h a r mC h e m i c a lR e a g e n tC o ,L t d 产品) 、碘化铋 钾溶液、硅钨酸溶液、苦味酸溶液、无水乙醇、9 5 乙醇、C W C N a 、冰乙酸、三重蒸馏水、浓氨水活 性炭、氯仿,其余试剂均为国产或进口分析纯。 1 I 3 培养基牛肉膏蛋白胨培养基,按规定方法配制,分装灭菌备用 1 1 4 菌种 大肠埃希氏杆菌( E s c h e r i c h i ac o l i ) 、金黄色葡萄球菌( S t a p h y l o c o c c u sa u F e u s ) 、枯草杆菌 ( B a c i l l u ss u b t i l i s ) 、粪肠球菌( E n t e r o c o c c u sf a e c a l i s ) 、奇异变形杆菌( P r o t e u s m i r a b i

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