如何申请国家自然科学基金

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1、 如何申请 国家自然科学基金 第一部分 基金委面上项目 评审基本程序及重要环节 初 审： 由各学科处组织实施。 申请者不具备申请资格或违反有关规定； 手续不完备或申请书不符合要求 ; 内容不符合资助范围或超出资助能力 ; 申请者以往资助项目执行不利。 查 重： 由基金委信息中心组织实施。 高职申请与承担（含参加）面上、重点、重大 累计不超过 3项； 在职研究生不作为限项申请的条件但只可申请 面上项目； 申请者同期只能申请一项，每个项目申请者限 为一人 ; 高职申请者当年申请及承担的在研面上项目累 计不超过 3项 ; 不具有高职的申请者申请及负责的在研面上项 目不超过一项 ; 青年基金只能获得一

2、项资助。 同行评议（一审）： 由基金委各学科处组织实施。 基本程序： 每份申请书选择同行评议专家（ 5位）； 函请同行评议：对项目进行定性定量评价； 收回评议卡； 对定量部分进行计算机判读、打分、排序； 据学科资助项目数 130确定第二轮评审项目。 专家评审组或专业委员会评审（二审）。 主要对一审推荐项目进行评议，筛除 30。 再次对二审会确定资助项目进行审查： 进一步查重； 以往承担项目是否按期完成； 是否有违反基金委有关申请规定。 基金委员会委务会审议。 下发批准、未批准通知。 第二部分 如何撰写国家自然科学基金 申请书 一、摘 要（限 400字） 包括： 研究方法、内容、目标、科学意义等

3、 如：“用 方法（手段）进行 研究，探索 /证明 问题，对阐明 机制 揭示 规律有重要意义，为 奠定基础提供 思路 ” 探索肺炎链球菌感受态形成 对毒力表达的影响 细菌在自然状态下可获得感受态而发生转化，这种基因重组方式是许多重要生命现象和生命过程的起始和源头。 本研究通过插入复制失活或替代失活的方法，构建肺炎链球菌感受态缺陷菌株，用体内环境信号 探讨肺炎球 菌的致病是否与其感受态的形成和转化有关。为揭示转化过程对于肺炎链球菌致病能力的影响机制提供理论依据。 二、立论依据 对基础研究 ， 着重结合国际科学发展趋势 ， 论述项目科学意义 对应用基础研究 ， 着重结合学科前沿 ， 围绕国民经济和社

4、会发展中的重要科技问题论述其应用前景 在研究领域（疾病防治）层面 从研究方向展开 围绕本项目拟解决的问题 进行归纳分析 提出设想 从研究领域 （疾病防治） 切入 研究意义 1、项目的研究意义 存在问题： 对科学意义阐述不足或夸大。 撰写方法： 从疾病入手，简述其特点、危害，目前 主要的治疗方法及其存在的问题。 简要分析该病发病机理和主要研究热点，引出目前存在的主要问题，也就是本项目要解决的问题，以此为切入点提出假设，阐述如果实现预期目标，对该病甚至相关疾病的预防、治疗具有的理论意义和临床价值。 基因的转移 ， 是基因重组最原始的方式 。我们可以从肿瘤组织中找到病毒的基因 ， 也可以发现某些病原

5、体的 例如耐药性在细菌中的传播 ， 这都是 自然界中普遍存在的基因转移现象 。 而细菌基因的转移包括结合（ 、 转导 （ 、融合 （ 及转化 （ 种方式 ， 我们这里所要讨论的是转化 。 什么叫做转化呢？它是指细菌在一定状态（感受态 可以在实验室中诱导产生，也可发生于细菌自然生长的某一阶段）下摄取外来 发现有五种细菌可以在自然状态下产生感受态而发生转化： 肺炎链球菌 (枯草杆菌（ 流感嗜血杆菌（ 血链球菌（ 淋病奈瑟氏菌（ ， 其中肺炎链球菌的转化效率最高 ,转化的结果是细菌的遗传特征发生变化，表现出与亲代不同的遗传性状。 1928年 S. 膜转化的现象， 1944年 明生命的遗传物质是 细菌

6、转化不仅是许多重要生命现象的起始和源头，转化机理的研究也一直是生命科学中一个非常重要的问题。 本研究从肺炎链球菌的转化入手来探讨其对细菌毒力表达的影响。 尽管肺炎链球菌的转化机制尚不十分清楚， 但其过程大致可分为 6个阶段： 1）肺炎链球菌被诱导成为感受态； 2）外来 3）核酸酶与外来 4）核酸酶降解其中一条链，使之成为单链（ 5） ）进入细胞内的 肺炎链球菌作为一种 自然界广泛存在 的致病菌，肺炎链球菌可引起脑膜炎、中耳炎、鼻窦炎和败血症等疾病。 在 70年代，未经治疗肺炎球菌感染死亡率为 301，经几十年的研究，其感染引起的菌血症死亡率仍高达 252。抗生素的应用由于耐药菌的迅速增加而越来

7、越失去治疗价值。而最新的肺炎链球菌多价结合疫苗的特异性和有效性远远未达到令人满意的程度 3。 寻找体内新的毒力基因，揭示肺炎球菌致病机理，才能从根本上解决其感染的治疗问题。 2、国内外现状分析（综述） 存在问题： 文献复习不够，对国内外现状缺乏真正了解， 提出的问题别人已解决 对研究方法不熟悉，简单移植或夸大其作用， 缺乏实际应用的可行性 对国内外现状只是简单罗列，缺乏归纳分析， 缺乏逻辑性和针对性 ( 撰写方法：要 紧紧围绕 本次申请项目的主题。 1、从疾病切入， 简要论述 国内外研究成果， 并引出当前的热点研究方向。 2、从研究方向展开， 较详细地分析 国内外在 本方向的研究进展，引出阐明

8、疾病发病机理或发明 新的治疗方法的 关键问题 所在。 3、围绕关键问题， 详细论述 国内外以往的研 究结果、当前的现状及今后的发展趋势。综合分析 后提出 目前尚未解决的问题 。 4、对拟采用的技术方法进行介绍和分析。 成熟的方法要简要介绍，重点阐明可以应用于本研究的依据。 新方法要详细介绍其原理，并阐明可以应用于本研究的理论依据和实验依据。 要特别注意的问题：必须对项目中所运用的技术方法的原理、流程及在实际应用中可能出现的问题要十分清楚，绝不能是一种简单的移植。 例如：蛋白质的融合表达，理论上可以实现融合， 但存在“活性、表达载体选择、纯化”等问题。 5、提出本项目的研究设想。 肺炎链球菌在正

9、常情况下并不致病， 40%的健康人咽喉部都有寄生 2，其只是在一定条件下引起疾病，如病毒引起上呼吸道感染时、小儿高烧时常转为肺炎。已经肯定环境信号控制着细菌毒力基因表达 4。 问题是肺炎链球菌致病是否与环境因素诱导其感受态的形成和转化有关？从我们目前掌握的资料来看，国内外尚未见到类似报道或想法。 目前对肺炎链球菌转化机理的研究概况：操纵子 长阶段、细菌密度等调节其感受态发生的唯一共同调控点 5， 6， 7，也是肺炎链球菌控制许多蛋白质基因表达的开关 8。而已 有文献报道当 启动一些蛋白包括自溶素的表达 9，而自溶素是 当其被激活后可释放细胞壁毒力因子和溶血素；最新研究发现，有三个可被感受态刺激

10、蛋白（ 导表达的蛋白基因变异时，肺炎链球菌的毒力减弱 10。 根据以上研究背景， 我们的研究思路为：采用插入失活的手段，分别使基因 D、 而构建一系列感受态缺陷菌株。通过体内毒力实验及体外粘附实验比较其与野生菌株的致病能力，以确定自然条件下形成的感受态与细菌致病的关系。 本研究从转化过程中感受态的形成方面探讨其对肺炎链球菌毒力影响， 意义在于 : 其形成与多种环境因素相关，因此本课题为从体内研究环境因素对于肺炎链球菌致病性的影响开辟了一条新的途径。 能会导致外源基因的整合，使肺炎链球菌的生物性状发生改变，这也可能与其致病相关，本研究探讨转化过程对于肺炎链球菌致病能力的影响，为进一步深入理解细菌

11、的致病机理提供新的依据。 注意事项 注意逻辑性和层次感，并随时点题。 文字表达要精雕细琢，避免假大空。 参考文献必须提供作者全名、出处。 参考文献必须引用近年的文献。 要注意参考国内相关专业知名专家的论著。 文献回顾不能回避国内外最新研究进展。 三、研究方案 1、 研究目标 存在问题： 目标过大 撰写要求： 有限目标 ， 与研究内容相呼应 如：探索 问题，明确 关系，揭示 规律， 阐明 原理（机制），建立 方法等 本研究的目标是： 探讨 重点阐明 : 1） 体内环境是否诱导 感受态的发生 ） 。 2） 2、研究内容： 存在问题：内容过多，一个研究周期难以完成； 内容分散，不能集中阐明研究目标。

12、 撰写要求：内容要适当，确保研究周期内完成； 与目标相辅相成，为研究目标服务。 篇幅要适度，注意与技术路线区别。 确定研究目标、内容的依据： 回答一个科学问题； 根据研究周期、资助强度来确定。 研究内容 (一 )：通过 建含有 并通过体外转化实验以确定其感受态缺陷 。 研究内容 (二 )：构建可被荧光报告是否发生感受态的菌株。（ 外源基因的同源重组有关，因此将荧光蛋白基因接于其后，荧光表达可报告感受态的发生）1) 将绿色荧光蛋白（ 因替代 到荧光报告质粒。 2) 设计 构建含有 将 得到转化菌株 。 研究内容 (三 )：体外转化实验以验证感受态缺陷菌不能发生转化 ， 且荧光表达的确可报告感受态的发生 。 1) 做体外转化实验 ， 验证所构