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1、培养根霉培养根霉 自制优质甜酒曲自制优质甜酒曲根霉的培养和观察 目的 认识根霉的形态特征，了解根霉的培养方法。 实验前的思考 根霉有怎样的“根”？它的孢子跟青霉、曲霉的孢子的着生方式有何不同？它在什么条件下生长？ 材料器具 馒头或面包，浓缩甜酒药粉；显微镜，载玻片，盖玻片，滴管，镊子，解剖针，吸水纸，喷壶，塑料袋或培养皿，针或接种环，恒温箱，酒精灯，三脚架。石棉网，棉絮，无菌接种箱，烧杯，三角烧瓶。 方法一 用馒头或面包培养根霉 步骤 1取一片馒头或面包，厚一二厘米，暴露在空气中一二小时，然后放入小塑料袋里，用喷壶喷湿，再把袋口扎紧。放在黑暗的地方。 如温度在 20以上，二三天后馒头的表面甚至
2、沾有馒头屑的塑料袋壁会长有疏松的白色绒毛，在白色绒毛上散布一点一点的小黑灰，像煤灰大小，这就是根霉的菌落。 2观察菌丝和假根（图示） 用解剖针从馒头上挑出一些带有黑点的根霉，尽量不带或少带馒头屑。放在载玻片的水滴中，仔细摊开，但不要拉开连着的菌丝。盖上盖玻片，在显微镜下可以看到根霉的菌丝没有横隔（见图） 。 菌丝向四方蔓延，跟馒头或基质接触的地方，长在像根一样的突起，但没有像种子植物根一样的复杂结构，所以叫假根。联系两处假根的菌丝叫匍匐菌丝。 3观察孢子囊 从假根处找到丛生的直立菌丝，在它们的顶端长有孢子囊。长孢子囊的菌丝叫孢子囊柄。移动玻片，寻找几个处于不同发育阶段的孢子囊，再做比较，可以了
3、解它的成熟过程。原来根霉的孢子囊的顶端膨大呈球形，孢子都聚生在孢子囊柄顶端膨大处，外面被以薄膜，孢子囊成熟后，薄膜裂开，散出孢子。可以在根霉菌落里看到孢子完全散落，只剩膨大顶端的孢子囊柄。 注意事项 培养根霉时水分不要加得过多，否则馒头或面包会湿烂，细菌就会大量繁殖。 分析和讨论 1根霉孢子色黑，多寄生在馒头或面包上。在西方，人们常叫它面包霉，或黑霉。在室内空气中常飘浮着根霉的孢子。在温暖潮湿季节，面包暴露在空气中时间稍久，沾上根霉孢子就会长出根霉。 2在基质上常见到不止一种霉菌，青绿色的菌落多属青霉，黄绿色而菌丝密集似绒毯的是曲霉，凭肉眼就能区分。 方法二 用培养基培养根霉 马铃薯蔗糖培养基
4、的配制法见本书第 842 页。 步骤 1把盛有马铃薯蔗糖培养基的容器隔水加热，熔化后，在接种室倒入消过毒的培养皿里，任其凝固。 2在火焰上把接种环烧红，灭菌。冷却后，用环蘸取浓缩甜酒药粉在培养基上接种，只要把接种环在培养基上涂抹几下，不必戳穿培养基（见图） 。 3. 倒置培养皿，使培养基接触空气的一面向下，把灭菌的载玻片放在皿盖中，以盛培养基的皿底作盖（见图） 。 4把培养皿放入恒温箱中，温度控制在 20左右。 5三天后取出培养皿，从皿外就能透过玻璃看到培养基上已长出黑霉菌丝，有许多菌丝倒挂着，有的已碰到载玻片，并在载玻片上分化出假根。 6打开培养皿，取出载玻片，把片子两端揩净，在中间有根霉的
5、地方滴一滴水，盖上盖玻片，制成装片观察。 用载玻片培养根霉，因载玻片上没有杂质，可以看得更加清楚甜酒曲甜酒曲中起主要作用的是根霉，根霉是藻菌纲、毛霉目、毛霉科的一属，它能产生糖化酶，将淀粉水解为葡萄糖。根霉在糖化过程中还能产生少量的有机酸（如乳酸） 。甜酒曲最主要的用途是用于制作甜酒酿，但甜酒曲以及用它制作的甜酒酿还有更广泛的作用，下面就将这些用途一一作一个简要的介绍。 甜酒曲主要用于制作甜酒酿，在甜酒酿制作过程中，甜酒曲是主要的发酵制剂。甜酒曲是糖化菌及酵母制剂，其所含的微生物主要有根霉、毛霉及少量酵母。在发酵过程中糖化菌首先将糯米中的淀粉分解成葡萄糖，蛋白质分解成氨基酸，接着少量的酵母又将
6、葡糖糖经糖酵解途径转化成酒精。这样就制成了香甜可口、营养丰富的甜酒酿。 甜酒酿是米酒曲的最初产品，它是各类酒类制作的雏形，除了食用外，还有两种用途，一是作为料酒使用，如川式火锅，豆瓣酱中添加；二是制作馒头，如河南周口的米酒馒头、浙江金华的米酒馒头。另外，甜酒曲还可以在调料发酵中使用，因此，甜酒曲的用户有甜酒酿工厂、家庭、餐饮单位、调料生产单位。 甜酒酿作为料酒使用，主要是利用其良好的口感的独特的风味，在调味的过程中，它既具有一定的酒香，又有酸、甜的口味，能起到处腥膻异味、提鲜增香等作用，使菜肴风味独特，口味柔和，已经成为烹饪菜肴时不可缺少的调味品。川菜的调味名甲天下，甜酒酿也功不可没，如川味凉
7、菜葱酥鲫鱼的制作。 甜酒酿在制作馒头中使用，最主要的代表在河南周口和浙江金华，具有很强的地方传统色彩，一般都称之为米酒馒头。米酒馒头的制作方法有很多种，有的是直接利用甜酒曲长时间发酵面团，制作馒头；有的是利用甜酒酿中的酒水作为面团用水，在添加适当的酵母，制作馒头，这种发方法在金华最典型；还有的是将甜酒酿和面粉共同长时间发酵，制作馒头。虽然方法不尽相同，但这些馒头都具有甜酒酿特有的醇香风味，而且口感细腻，是非常具有民族传统特色的食品。 甜酒曲用于调料发酵，主要是利用甜酒曲中根霉极强的糖化性能。例如酱品的制作，它是以淀粉质和蛋白质材料作为主要原料，在制作过程中起主要作用的是根霉菌株产生的糖化霉系和
8、蛋白酶系，通过糖化作用，将淀粉质分解成糖；通过蛋白酶系对蛋白质的水解发酵作用，产生各种氨基酸，这样就形成了酱类的甜味和鲜味。然后再通过酵母的酒精发酵作用和细菌的乳酸发酵作用，就得到了风味各异的酱品。 自制优质甜酒曲配方编辑本段 新鲜尖叶辣蓼草 150-200 克。采摘辣蓼草时，选上部带白色的嫩茎叶，并以农历八月前后采摘为好。然后洗净晾干、切碎待用。大米 750 克。将大米用温水泡 15-20 分钟，至手指捏能成粉状即可，再滤干水。选比较甜的陈甜酒曲两粒。制作编辑本段 将米倒人臼（农村舂米的工具）内，边舂边用粉筛过筛。舂至臼内只剩下半碗碎米时，再加入辣蓼草一起舂。待舂碎后，将筛出的米粉统统倒人臼
9、内继续舂，直舂到辣蓼草与米粉混匀了，方可取出。用手将米粉紧紧捏成小丸子，严防松散。如捏不拢，可掺少量水再捏。每 0.5 千克大米可做小丸子 100 粒。小丸子做完后，用筛子盛着。然后将两粒陈酒曲碾成粉末，撒在新做的小丸子上，敷盖一层，轻轻团动几下，盖上较厚的干净毛巾。经 24 小时发酵后，揭开毛巾，若每个小丸子（新酒曲）像枫树球一样，长长了一层淡白色茸毛，并闻着有香味，证明制作成功。最后一道关键工序是晾酒曲，开始 2-3 天内晒半天，阴半天，以后整天晒，一般一星期左右晒干。制好的酒曲用袋盛着，置于生石灰缸内，保持干燥。 (江苏植药志) 【来源】为蓼科植物柳叶蓼的全草。 【植物形态】柳叶蓼，又名
10、：绵毛酸模叶蓼。 【附注】同属植物辣蓼、水蓼、假长尾蓼和本品的全草，在不同地区均作辣蓼入药。 【药理作用】辣蓼(品种未鉴定)煎剂 2060%对各种痢疾杆菌于试管内均有抑制作用。新鲜或干燥辣蓼全草的流浸膏或煎剂涂于皮肤，能预防小白鼠感染血吸虫尾蚴。 【性味】辛，温。编辑本段原形态柳叶蓼，又名：绵毛酸模叶蓼。 一年生草本，高0.52.5 米。茎直立，多分枝，表面有多数紫红色小斑点，被绵毛，节稍膨大。叶互生，有短柄或近乎无柄；叶片披针形，先端渐尖，基部楔形，全缘或微波状，上面深绿色，被疏绒毛，下面密被灰白色绒毛；托鞘膜质，筒状。圆锥花序顶生或腋生，长 26 厘米；花小，绿白色或粉红色，密生；花被 4
11、5 裂，有脉，无腺点；雄蕊通常 6 枚；子房卵圆形，花柱 2 歧。瘦果卵圆形，扁平，两侧面中部微凹，褐黑色而光亮，包于宿存的花被内。花期初夏。果期秋季。编辑本段药用价值【生境分布】生于近水草地、流水沟中，或阴湿处。分布南北各地。 【功用主治】消肿止痛。治肿疡，痢疾腹痛。 【用法与用量】内服：煎汤，13 钱。外用：捣敷。 【性状】性状鉴别 茎直径约至 6mm；表面有紫红色斑点。叶上面中央常有黑褐色新月形斑，无毛或被稀白色绵毛，下面密被白色绵毛，有腺点；托叶鞘无缘毛。圆锥花序，花密生；花被 4 裂，有腺点。气微，辛、辣。 以叶多、带花、味辛辣浓烈者为佳。 显微鉴别 粉末特征：上表皮多列性非腺毛较多
12、，长 80-273m；单细胞非腺毛较少，长约至 1120m，直径约 7m，基部常有一短细胞并生；腺毛较多，头部类圆形或椭圆形，4-15 个细胞，直径 27-36m。下表皮单细胞非腺毛众多，腺毛偶见。叶肉细胞含草酸钙簇晶。 【选方】治痢疾：辣蓼一把。晒干，浓煎温服。(性味以下出江苏药材志) 辣蓼草（水蓼） 特征及用途：一年生草木，高约半米，多分枝，节部膨大，茎红色或青绿色。叶互生，披针形，长 57 厘米，上面中肪两旁常有人字形黑纹，揉之辣味。花淡红色，顶生或腋生总状花序。果小，熟时褐色，扁圆形或略呈三角形。喜生于湿地、路旁、沟边。夏秋采集。全国各地均有分布。可防治肠炎、烂鳃病。 用使方法：50
13、公斤鱼每天用干草 0.5 公斤（鲜草 1.5 公斤） ，切碎用水煎煮，拌入饲料投喂，每日一次，连喂 36 天为一疗程。50 公斤鱼或每万尾鱼种，每日用0.51 公斤干粉拌饲料或制成颗粒药丸投喂，每日一次，投喂36 天为一疗程。小曲制造技术除了北方的麦曲外，至迟在晋代南方已出现了团状的米曲。晋人嵇含在中记载了南方的草曲，也即米曲，这是关于南方米曲的最早记载。小曲一般是南方所特有，从晋代第一次在文献中出现以来，名称繁多，宋代 中共有四例。其制法大同小异:采用糯米或粳米为原料， 先浸泡蓼叶或蛇麻花，或绞取汁。取其汁拌米粉，揉面米团。传统小曲的生产流程：陈酒药 水 米粉 辣蓼草末 拌料 打实 切块 滚
14、角 接种入缸保温培养入匾培养,换匾,并匾装箩,出箩晒干图 2.2 传统小曲生产流程传统的麦曲，完全采用天然接种微生物的方式。小曲的接种在宋代以前， 也不例外。但在中则记载了一种人工接种的方式，即:“团成饼子，以旧曲末逐个为衣“。也就是说把新制成的曲团在陈曲粉末上滚动一下， 陈曲末便粘在新曲团的表面，陈曲末中有大量的根霉孢子，可以在曲团上迅速繁殖，形成生长优势。由于可以人为地选择质量较好的陈曲作为曲种，这就可以择优汰劣。通过年复一年的人工选育，自然淘汰，质量优越的曲种(实际上是微生物菌种)就保留下来了。而天然接种的酒曲，酒曲中微生物的来源主要是水源，原料本身所带入，或者制曲场所及用具。性能优良的
15、菌种无法代代相传，酒质也就无法恒定。明清时期，小曲中加入种类繁多的中草药，成为这一时期的特点。明代中说:“其入诸般君臣与草药，少者数味，多者百味，则各土各法，亦不可殚述“。这种传统做法一直延续至现代。周恒刚先生在 1964 年搜集的四川邛崃的药曲配方中，有一例，其配方中用药达 72 味，合计 50 多公斤，可配 1460 公斤的原料( ，1964 年，中国财经出版社)。但小曲也有少加甚至不加药的。如明代的东阳酒曲中只加辣蓼。宁波白药也是如此。故明代以来，小曲向药小曲和无药小曲两个方向发展。小曲中的微生物主要是根霉，据有关科技工作者分离鉴定，在分离到的 828 株毛霉科的霉菌中，其中根霉占 643 株。根霉不仅具有糖化作用，还具有酒化酶， 故具有酒化作用。小曲中还有许多其它微生物，现代工业微生物从中得到不少有益的菌种，继续为人类做出贡献。酒酿制作：工艺流程糥米 清洗 浸泡 蒸饭 淋饭 拌药 搭窝 发酵各工序要点：(1) 糥米浸泡和般以 10到 13为宜，时间约 24 小时，可因温度不同而调整浸泡时间。(2) 蒸饭即糊化过程，也称为淀粉的熟化，对蛋白质而言可使其变性，时间一般为上汽后半小时左右，要求饭粒熟而不烂，饭粒完整。(3) 淋饭目的在于：降温；去除饭粒表面粘物以免发酵中粘连成团不利发酵。用洁净自来水冲淋至 35左右。(4) 拌药
