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1、1 用鋼環將三層材料（試驗材料在下，菌片居中，高密度聚乙烯膜在最上面）卡在一起，將此環套件置於轉盤上的瓊脂培養皿上，試驗指以能在整個培養皿表面上移動的方式使材料受到壓力和摩擦的綜合作用(15min)，以此模擬在實際應用過程中屏障材料可能發生的受力情況和濕態條件下的微生物穿透。菌片上的微生物穿透試驗材料後會遷移到瓊脂培養基表面，通過對瓊脂培養皿的培養和菌落計數，可對試驗材料的穿透性能進行定量評價23 性能監視試驗用於評價實驗室性能，包括如下兩項試驗。 3.1 用複寫紙檢查儀器性能的方法 將一個 14cm 培養皿底面朝上放在轉盤上，用內外鋼環將一層白紙、一層複寫紙和一層 HDPE 膜按順序組裝在一
2、起，將環套件放在培養皿上，試驗指放在 HDPE 膜上開機運行 15min，取出白紙，檢查實驗指在整個培養皿表面是否留下均勻連貫的接觸印記。 3.2 用對照材料檢查實驗精確性的方法 3.2 用對照材料檢查實驗精確性的方法 (1)瓊脂培養皿的製備 在試驗開始前 244h，取 6 個一次性無菌培養皿，注入營養瓊脂至離皿口30.2mm 處，在水的上方貯存，以使瓊脂的品質損失最小。試驗開始前將每一培養皿除蓋室溫乾燥 20min,使瓊脂表面無冷凝水（2 ）菌片的製備 製備濃度為 1104 4cfu/mL4104 4cfu/mL 的金黃色葡萄球菌 ATCC29213 菌懸液.取 1mL 菌液均勻塗布在載菌材
3、料片的可浸濕聚酯膜面，置 56乾燥約 30min，當日使用。 （3 ）材料應用 將圓柱體放在內環的中央，將對照材料覆蓋內環和圓柱體，然後將菌片染菌面向下放在試樣上，最後在上面覆蓋一層 HDPE 膜，向下推緊外環，使三層材料牢固地夾在兩個鋼環之間。 （4 ）試驗過程 調節儀器控制杆上的配重，使實驗指施加到瓊脂上的力為 30.02N。將第一個瓊脂培養皿除蓋放在儀器轉盤上，將環套件放在培養皿上，將實驗指放在皿口內側的 HDPE 膜上，使儀器運行 15min 。 然後取下第一個培養皿並放上皿蓋，馬上將第二個培養皿和環套件放在轉盤上，對後面的四個培養皿用同一個環套件執行上述程式。 五個培養皿完成試驗後，
4、取下菌片棄去，將對照材料反轉，上面朝下用 HDPE 膜覆蓋，在第六個培養皿上操作 15min ，完成試驗。 操作完成後，將各培養皿加蓋置 361培養 48h。編號為 16。 計數每個培養皿中金黃色葡萄球菌菌落數（培養皿中心 15mm 半徑區域內的菌落數不計）（5）结果表征 国际标准 ISO22610 规定，以对照材料为试验样品进行试验，1 至 5 号培养皿的累积穿透率 RCUM5 须在 0.70 0.96 范围内。 1 至 5 号培养皿累积穿透率，RCUM1 ，RCUM5 可按如下公式计算： RCUM1= X1 1/TRCUM2 2= (X1 1+X2 2)/T RCUM3=(X1 1+X2 2+ +X3 3)/TRCUM4=(X1 1+X2 2+ +X3 3+ +X4)/TRCUM5=(X1 1+X2 2+ +X3 3+ +X4+X5)/T其中 T 为估计的挑战菌总数，按下式计算： T=X 1X2X3X4X5 Z Z 为 5 个琼脂培养皿试验后，在第 6 个琼脂培养皿上测得留在对照材料上的菌落数；X1，X2，X5 为前 5 个琼脂培养皿上各自的菌落数。
