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1、两种超低温冷冻方法对人卵巢组织活性的影响研究生艾尔代尼指导教师丁岩于艳玲学科专业名称妇产科学研究方向辅助生殖2 0 1 5 年0 3 月T h ee f f e cto ft w ocr y o p r e s e r v a t io nm e t h o d so nt h ea ct iv it yo fh u m a no v a r ia nt is s u eAD is s e r t a t io nS u b m it t e dt oX in j ia n gM e d ica lU n iv e r s it yI nP ar t ia lF u llf illm e n
2、to f t h eR e q u ir e m e n t sf o rt h eD e g r e eo fM a s t e ro fM e d icin eB yA ie r d a in iO b s t e t r icsa n dG y n e co lo g yD is s e r t a t io nS u p e r v is o r :D in g y a n ;Y u y a n lin gA p r il,2 0 1 5论文独创性说明本人申明所呈交的学位论文是在我个人在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包
3、含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名:懈衙励签字日期:生堕:量! 丝导师签名:j 鎏掣签字日期兰! :主尘关于论文使用授权的说明本人完全了解学校关于保留、使用学位论文的各项规定, ( 选择“同意不同意”) 以下事项:1 学校有权保留本论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文;2 学校有权将本人的学位论文提交至清华大学“中国学术期刊( 光盘版) 电子杂志社”用于出版和编入C N K I 中国知识资源总库或其他同类数据库,传播本学位论文的全部或部分内
4、容。学位论文作者签名:心忿钟国签字日期:五尘,t 乡导师签名:辽墨型垒签字日期:丝! 查:重:沙中英文缩略词对照表英文缩写英文全名中文译名D M S OD im e t h y ls u lf o x id e二甲亚砜E GE t h y le n eG ly co l乙二醇F C SF e t a lca ifs e r u m胎牛血清F o llicle s t im u la t in g F S H垂体分泌卵泡刺激素 h o r m o n eln s u liir r a n s f e r r in S e I T S胰岛素转铁蛋白硒 le n iu mL 1 5L e ib o
5、v it z培养基L g lu t a m in eL g lu t a m in eL 谷氨酰胺M y cillinM y cillin青链霉素P h o s p h a t eB u f f e r e dP B S磷酸缓冲液 S a lin eP R o HP r o p y le n eG ly co l丙二醇S u cS U C r O S e蔗糖T r a n s f o r m in gg r o wT G FB转化生长因子 f a ct o r - J 3V e s e u la re n d o t h e lia l V E G F血管内皮生长因子 g r o u t hf
6、 a ct o rV it a m inCV c维生素Ca - m in im u me s s e n t ia l a M E MM E M 培养基 m e d iu m目录摘要 1A B S T R A C T 2前言 3内容与方法 51 研究内容 5I I 标本来源 51 2 标本采集与分组 51 3 实验仪器、耗材 51 4 实验试剂 t61 5 配液 62 实验方法 62 1 材料预处理 62 2 程序化冷冻 ImlQtD , 82 3 玻璃化冷冻 82 4 新鲜组体外培养 82 5 组织学检查 r82 6 雌二醇测定 92 7 统计学处理方法 9结果 1 1讨 仑 1 5小结 2
7、 3致谢 2 4参考文献 2 5综述 2 8攻读硕士学位期间发表的学位论文 3 4导师评阅表 3 5新疆医科大学硕士学位论文两种超低温冷冻方法对人卵巢组织活性的影响研究生:艾尔代尼导师:丁岩教授;于艳玲主任医师摘要目的:探讨程序化及玻璃化两种超低温冷冻处理人卵巢皮质后对卵泡活性的影响从而评估,比较两种冷冻方案的冷冻效果。方法:收集7 0 例人卵巢组织,每例皮质组织修剪成大小约2 m m 5m m lm m 的小条,分别随机分配到新鲜对照组( A 组) 、玻璃化冷冻组( B 组) 、程序化冷冻组( c组) ,分析比较冷冻处理前后3 组卵泡组织学形态学变化,并对新鲜组及复苏后的两组皮质小条进行体外
8、培养1 4 天,检测培养液( 每4 8 h 测一次) 中雌激素水平,从而评估冻融后卵泡的活性。结果:B 组( 6 8 8 )冷冻复苏率显著高于和C 组( 6 4 8 ) ,差异有统计学意义( P 0 0 5 ) 。结论:人卵巢皮质组织使用超低温生物技术冻融后复苏,卵巢组织仍具有活性,但影响其效果的因素较多,此实验结果提示玻璃化冷冻效果优于程序化冷冻法。关键字:卵巢皮质,玻璃化冷冻,程序化冷冻,卵泡活性T h ee f f e cto ft w ocr y o p r e s e r v a t io nm e t h o d s0 1 1t h ea ct iv it yo fh u m a
9、no v a r ia nt is s u eP o s t g r a d u a t e :A ie r d a in is u p e r v is o r :D in g y a np r o f e s s o rY u y a n linch ie fp h y s icia nA b s t r a ctO b j e ct iv e :T oin v e s t ig a t et h ep r o g r a m m e df r e e z in ga n dv it r if ica t io no ft w ou lt r alo wt e m p e r a t u
10、r ef r e e z in gt r e a t m e n te f f e cto nt h ef o llicu la ra ct iv it yino r d e rt oe v a lu a t et h eco m p a r is o no ft w of r e e z in gm e t h o d so ff r e e z in ge f f e ct M e t h o d s :C o lle ct io no fca s e so fh u m a no v a r ia nt is s u e ,e a chclipin t ot h eo v a r ia
11、nt is s u ea n ds iz ea b o u t2 m m X 5 m m X lm m ,w e r er a n d o m lya s s ig n e dt ot h eco n t r 0 1g r o u p ( g r o u pA )讯s h ,v it r if ica t io nf r e e z in gg r o u p ( g r o u pB ) ,p r o g r a m m e df r e e z in gg r o u p ( g r o u pC ) ,a n a ly z in ga n dco m p a r in gt h r e
12、eg r o u p sf o llicleh is t o lo g ica lm o r p h o lo g y , a n dt h ed e t e r m in a t io no ft h r e eg r o u p so fs p e cim e n sa f t e rO V a r ia nt is s u ecu lt u r einv it r o cu lt r u es u p e m a t a n t so fe s t r o g e n ,a s s e s st h ef o lliclea ct iv it y R e s u lt :G r o u pAn o r m a