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1、实验四实验四 油脂中脂肪酸含量测定油脂中脂肪酸含量测定 气相色谱法测定大豆油中脂肪酸成分气相色谱法测定大豆油中脂肪酸成分一、目的与要求一、目的与要求油脂是食品加工中重要的原料和辅料，也是食品的重要组分和营养成分。必需脂肪酸是维持人体生理活动的必要条件，人体所必需的脂肪酸一般取自食品用油，即食用油脂。气象色谱法测定油脂脂肪酸组分是现在最常用的方法，也是一些相关标准（如：GB/T17377）规定应用的检测方法。甲酯化是分析动植物油脂脂肪酸成分的常用的前处理方法，也是常用的标准方法（GB/T 17376-1998）。本实验要求了解气相色谱法测食用油脂肪酸组成的原理，掌握样品的前处理方法，学习食用油脂
2、中脂肪酸组分的色谱分析技术。 二、原理二、原理本实验甲酯化方法采用国标-GB/T 17376-1998，甘油酯皂化后，释出的脂肪酸在三氟化硼存在下进行酯化，萃取得到脂肪酸甲酯用于气象色谱分析。样品中的脂肪酸（甘油酯）经过适当的前处理（甲酯化）后，进样，样品在汽化室被汽化，在一定的温度下，汽化的样品随载气通过色谱柱，由于样品中组分与固定相间相互用的强弱不同而被逐一分离，分离后的组分，到达检测器（detceter）时经检测口的相应处理（如FID的火焰离子化），产生可检测的信号。根据色谱峰的保留时间定性，归一法确定不同脂肪酸的百分含量。三、仪器与试剂三、仪器与试剂（一）仪器1气相色谱仪：具氢火焰离子
3、化检测器（FID）。2恒温水浴锅3移液管4胶头滴管5小圆底烧瓶 6冷凝管7. 样品瓶（二）试剂1.正己烷：分析纯，沸程6090或3060，重蒸。2.氢氧化钾甲醇溶液3.三氟化硼甲醇溶液4.饱和食盐水5.市售大豆油四、实验步骤四、实验步骤（一）样品预处理 甲酯化：取24滴大豆油样品于xml的圆底烧瓶中，加入3ml的KOH甲醇溶液，70水浴加热回流5min；取出冷却至室温（可用水冷），加入5ml三氟化硼溶液，70水浴加热回流5min；取出冷却至室温，加入3ml正己烷，70水浴加热回流5min；取出冷却至室温，加入适量饱和食盐水溶液，静止35min，取上层油样1ml于试样瓶中，进GC分析。测定：（1
4、）气相色谱条件色谱柱：石英弹性毛细管柱，0.25mm（内径）60m，内膜厚度0.32。程序升温： 150保持3min，5/min升温至220，保持10min；进样口温度250；检测器温度300。气体流速：氮气：40mL/min，氢气：40mL/min，空气：450mL/min，分流比301。柱前压：25kpa（2）色谱分析自动进样，吸取1L试样液注入气相色谱仪，记录色谱峰的保留时间和峰高。利用标准图谱确定每个色谱峰的性质（定性），利用软件自带的自动积分方法计算各脂肪酸组分的百分含量。五、注意事项五、注意事项1本法检测灵敏度高，在分析时应注意防止由于色谱柱中高沸点固定液、样品净化不完全及载气不纯等带来的污染，使其灵敏度下降。2本方法采用极性色谱柱，样品处理时应尽力保证脱水彻底。3本实验采用自动进样，序列采集，工作站在序列运行之后不再允许更改序列采集方法，所以在运行某一序列之前应确认程序编辑无误。4为了保护毛细管柱，一定要确认升温程序在该型号色谱柱的温度允许范围内。七、思考题七、思考题1.气象色谱的原理，适用范围2.检测某一样品脂肪酸组成常用的分离、分析方法
