《Akt和PEA15在缺血后处理对抗全脑缺血再灌注损伤中的作用研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《Akt和PEA15在缺血后处理对抗全脑缺血再灌注损伤中的作用研究（56页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、研究生个人简介王慧1 9 8 8 年9 月出生理学学士学位研究生2 0 0 6 2 0 1 0 就读于盐城师范学院，获得工学学士学位2 0 1 0 - 2 0 1 3 就读于徐州医学院生物化学与分子生物学专业三年中完成了科学学位硕士研究生要求的所有内容研究生期间共修3 2 5 学分通过大学英语六级考试完成了学位课题研究撰写学位论文及综述2 篇目录缩略词表1中文摘要。3A b s t r a c t 5A k t 在缺血后处理对抗全脑缺血再灌注损伤中的作用研究一7前言7材料和方法91材料92 方法1 2结果1 5讨论2 1结论2 3P E A - 1 5 在缺血后处理对抗全脑缺血再灌注损伤中的作
2、用研究2 4前言2 4材料和方法：2 61材料2 62 方法2 7结果2 9讨论3 3结论3 5参考文献一3 6综述4 0攻读硕士学位期间发表学术论文5 0致谢5 1论文独创性声明5 2论文使用授权声明5 2论文审阅认定书5 3徐州医学院硕士学位论文缩略词A k tB C I PB S AG l u K 2M K K 7M ：L K 3N B TP A G EP E A 1 5P M S FP N P PP S D 9 5S D S英文全称缩略词表A b b r e v i a t i o n中文全称丝氨酸，苏氨酸蛋白激酶5 - b r o m o - 4 - c h l o r o 3 -
3、i n d o l y l - p h o s p h a t e5 - 溴- 4 - 氯- 3 - 吲哚磷酸B o v i n es e r u ma l b u m i n牛血清白蛋白G l u t a m a t e r g i ck a i n a t er e c e p t o r谷氨酸的海人藻酸受体亚s u b u n i t2I m m u n o b l o t t i n gI n t r a c e r e b r o v e n t r i c u l a r li n j e c t i o nI m m u n o p r e c i p i t a t i o n
4、I s c h e m i cp o s t c o n d i t i o n i n gl s c h e m i a r e p e r f u s i o ne - J u nN - t e r m i n a lp r o t e i nk i n a s e基2免疫印迹脑室注射免疫沉淀缺血后处理缺血，再灌注c - J u n N 末端蛋白激酶M i t o g e na c t i v a t e dp r o t e i nk i n a s e 丝裂原活化的蛋白激酶激k i n a s e 7酶7M i x e dl i n e a g ek i n a s e3混合谱系激酶3
5、N i t r ob l u et e t r a z o l i u m硝基四氮唑兰P o l y a c r y l a m i d eg e le l e c t r o p h o r e s i s聚丙烯酰胺凝胶电泳p h o s p h o p r o t e i ne n r i c h e di na s t r o c y t e s星形胶质细胞富含磷蛋白P h e n y l m e t h y ls u l f o n y ln u o m e苯甲基磺酰氟P - n i t r op h e n y lp h o s p h a t e对硝基苯磷酸P o s t s y
6、n a p t i cd e n s i t y p r o t e i n9 5突触后密度蛋白9 5S o d i u md o d e c y ls u l f a t e十二烷基硫酸钠V0Xm 肼m 豫 腻徐州医学院硕士学位论文S Dr a tT E M 匣DT I i sS p r a g u e - D a w l e yr a t斯普拉格一道利鼠N ，N ，N ，N ，- t e t r a m e t h y l e t h y l e n e d i a m i n e四甲基乙二胺T r i s O a y d r o x y m e t h y l ) a m i n om
7、e t h a n e三( 羟甲基) 氨基甲烷2徐州医学院硕士学位论文A k t 和P E A 一15 在缺血后处理对抗全脑缺血再灌注损伤中的作用研究中文摘要目的缺血后处理( i s c h e m cp o s t e o n d i t i o n i n g ，I P o s t ) 能够减轻脑缺血再灌注( i s c h e m i a r e p e r f u s i o n , I R ) 诱导的神经功能损伤，是一种内源性保护脑缺血的新方法，但其保护机制尚不清楚。本研究旨在探索缺血后处理神经保护作用的分子机制，为治疗缺血性脑损伤提供新的思路。方法采用四动脉结扎( 4 - v o
8、) 法，雄性S D ( S p r a g u e D a w l e y ) 大鼠全脑缺血1 5 m i n 作为全脑缺血再灌注损伤模型：在全脑缺血1 5 r a i n 后的再灌注期内施行短暂全脑缺血3 m i n 作为缺血后处理。第一部分A k t 的选择性抑制剂A k ti n h i b i t o rI V 在缺血后2 h 进行侧脑室注射。应用尼氏染色观察海马C A l 区神经元的存活情况，采用免疫沉淀和免疫印迹检测蛋白质的相互作用和表达。第二部分P E A - 1 5s i R N A 于缺血后1 h 定位注射至海马。应用尼氏染色观察海马C A l 区神经元的存活情况，采用免疫印
9、迹方法检测蛋白质的表达。结果第一部分1 A k t 抑制剂A k ti n h i b i t o rI V 消除了缺血后处理对全脑缺血再灌注损伤的保护作用。2 A k t 抑制剂A k ti n h i b i t o rI V 消除了缺血后处理对G l u k 2 - P S D - 9 5 - M L K 3 信号复合体的抑制作用。3 A k t 抑制剂A k ti n h i b i t o rI V 解除了缺血后处理对M L K 3 J N K 3 信号通路的抑制作用。第二部分1 缺血后处理显著提高了全脑缺血再灌注2 4 h 大鼠海马C A I 区P E A - 1 5 的表达水平。
10、2 缺血后处理改变了由全脑缺血再灌注引起的P E A - 1 5 的表达变化。3 P E A - 1 5s i R N A 消除了缺血后处理对全脑缺血再灌注损伤的保护作用。结论第一部分1 缺血后处理的神经保护作用是通过激活A k t 来实现的。2 3笙型垦堂堕堡主堂堡垒查在缺血后处理过程中，激活的A k t 通过抑制G l u k 2 P S D 9 5 M L K 3 J N K 3 信号通路来发挥神经保护作用。第二部分1 缺血后处理能够调控全脑缺血再灌注损伤对P E A - 1 5 表达的影响2 P E A - 1 5 介导缺血后处理对全脑缺血再灌注损伤的保护作用。关t 词脑缺血；缺血后处
11、理；A k t ；P E A - 1 54徐州医学院硕士学位论文T h ef u n c t i o no fA k ta n dP E A _ 1 5i ni s c h e m i cp o s t c o n d i t i o n i n g i n d u c e dp r o t e c t i o na g a i n s tg l o b a li s c h e m i cb r a i ni n j u r yA b s t r a c to b j e c t i v e P o s t ( m c h e m i cp o s t e o n d i t i o n i
12、 n g ) i sp r o v e dt ob ea l le n d o g e n o u sp r o t e c t i v ea p p r o a c ht oc e r e b r a li s c h e m i a ，r e d u c i n gs t r u c t u r a la n df u n c t i o n a li n j u r yi n d u c e db yc e r e b r a li s c h e m i a r e p e r f u s i o n ，b u tt h ep r o t e c t i o nm e c h a n
13、i s mi so b s c u r e T h ep u r p o s eo ft h i ss t u d yi st oe x p l o r et h eu n d e r l y i n gp r o t e c t i v em e c h a n i s m so fp o s t c o n d i t i o n i n ga g a i n s tg l o b a li s c h e m i c 嘲u r y , p r o v i d i n gn e ws t r a t e g i e st ot r e a t m e n to fi s c h e m i cb r a i ni n j u r y M e t h o d sG l o b a lc e r e b r a li s c h e m i aw a si n d u c e df o r15m i n u t e sb yt h ef o u r -v e s s e lo c c l u s i o nm e t h o d ( 4 一V O ) i nm a l eS p r a g u e - D a w l e yr a t s T e nm i n u t e sa f t e rt h ei s c h e m
