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1、黑龙江生物科技职业学院实验报告姓名： 专业班级： 学号： 时间： 酒精生产常用的酵母菌酒精生产常用的酵母菌一、实验目的一、实验目的 1学习酒精生产常用的酵母菌都有哪些，并了解其生长特性。 2了解不同量酒精生产原料酵母菌的不同。 3通过对菌株的观测了解，回答酒精生产用酵母菌的要求。 4通过实验能掌握鉴定酵母菌细胞死活的方法。 5会计算酵母细胞的增长速度及传代次数。 二、实验原理二、实验原理 我国淀粉质原料生产酒精中，所采用的酵母菌种有拉斯 12 号、拉斯 2 号、南阳 1308、南阳 1300、K 字酵母等；用于生产糖蜜原料的酵母菌有中国科学院 2610、川 345、川 102 等，它们适宜 于
2、较高温度下的糖蜜发酵，具有繁殖快，发酵时间短等特性。通过对这些菌株的培养与显微镜观测， 测定其死活，细胞增长速度及传代时间，绘制糖度、温度与酵母增长速度的关系图。 三、实验器材三、实验器材 1材料：拉斯 2 号、南阳 1308 菌株，AADY 酒精活性干酵母，糖化酶，曲霉菌，淀粉酶，美蓝试 剂。 2仪器设备：温度计，灭菌锅，一次性手套，托盘，糖度计，恒温培养箱，显微镜，血球计数板， 。 四、实验步骤四、实验步骤 1、将拉斯 2 号、南阳 1308 菌株，AADY 酒精活性干酵母活化，培养基先行配制及灭菌。用米曲汁 培养基（米酒发酵剩余的大米糯米） ，AADY 的复水活化采用清水，糖水和米曲汁醪
3、液三种方法分别 分组活化。 2、显微镜下观察各类菌株，并用美蓝液鉴定细胞死活。 采用 0.1的吕氏美兰液染色法。活的酵母细胞由于不停地进行着新陈代谢，细胞内氧化还原值 颇小，还原力较强，当无毒的美兰染液进入细胞后，能立即还原脱色，不能被美兰液染上颜色；而 死后或接近死亡的酵母细胞，不具有此还原能力，当加入美兰液后，就被美兰液染成兰色。进而达 到鉴别的目的。操作方法是将被检查的酵母细胞溶液，用清洁、干燥的吸管吸取 12ml，置于清洁、 灭菌后的试管中，加入无菌水 510 倍稀释，再吸取 0.1吕氏美兰液 12 滴，加入试管中，然后 充分混合均匀。用无菌吸管吸取 1 滴于消毒、清洁的载玻片上，盖上
4、载玻片，静置 2030 秒钟，再 放在显微镜下观察，凡是被染成兰色的酵母细胞则是死亡或接近死亡的细胞，呈无色的就是活的酵 母细胞。 3、不同浓度，不同温度培养不同菌株，一定时间后测定其细胞数，并计算其传代数。 五、实验结果五、实验结果 1酒精生产中常用的酵母菌种观测记录菌名细胞形态细胞大小 m 适宜 PH 培养温度 适宜糖度 Bx适宜培养基拉斯 25.65.8452528141 拉斯 126.8744.5283014113086.66.64528301416均可采用米曲汁培养基13003.35.94.528301416K4.85.24.55.028301214 2酵母细胞各影响因素的图表六、思考题六、思考题 1选择酒精生产所用酵母菌的要求有几点？2现有 6m3的酒母醪，培养时间 20 小时，要求培养成熟后的酵母细胞数为 12 亿mL，接种时 接种量为 50ml，酵母数为 1.8 亿ml，求酵母细胞的生长速度和传代时间。*其他发现、心得和收获：成绩评定： 教师评语：
