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1、发酵罐的实消及接种发酵发酵罐的实消及接种发酵 一、实验目的一、实验目的 1、学习发酵过程中培养基的添加、实消、接种等一般操作过程。 2、对发酵罐进行参数设定并对发酵罐进行自动化控制， 完成培养、取料、罐的清洗等步 骤。 二、实验原理二、实验原理 （一）培养基的添加 按工艺要求配制培养基原液。 打开排气阀 F14，关闭进气阀 F13，卸去罐内压力；将校验好的 pH、DO 电极装入 发酵罐内。注意：传感器的坡面要放置正确，使得罐壁平滑；防止出现死角灭菌不 彻底。 打开罐盖上的加料口，将培养基原液加入发酵罐内，并加水至所配培养液总量的 7585左右（视环境温度、蒸汽压力及接种量而定，其余 2515为
2、蒸汽冷凝 水和种子量） 。 拧紧加料口螺母，但不要太紧以免损坏密封圈。 （二）培养基的实消 检查夹套排水阀 F33 是否打开，夹套水是否排尽。 夹套预热：打开 F2、稍开 F33，接通电源，开电源开关，手动开启搅拌电机，调节 电机转速至 150rpm 左右，进行慢速搅拌。注意：F2 不要太大，防止产生内压而损 坏罐体。夹套预热是为了防止进入罐内的水蒸气冷凝成水后改变培养基浓度。 当发酵罐内的温度达到 80左右时，打开 F4、F22，排尽蒸汽罐中冷凝水后即关闭 F22；稍开 F21，使蒸汽徐徐进入发酵罐；继续升温 关闭进气阀 F13，并将排气阀 F14 调为微开 当培养液养液温度达到 95100
3、后可停止搅拌。当发酵罐内温度达到灭菌要求温 度时，关闭阀门 F4 和 F14。在灭菌过程中，应时刻注意罐压，并控制在 0.10.11MPa 之间，严禁超压。罐压的控制通过调节阀门 F2 和 F33 来实现。 注意在升温过程中，要关闭冷却水，否则当温度设定值设定在培养温度时，冷却水 管中会自动通冷却水，不仅会影响升温速度、浪费水蒸气，更重要的是会引起冷凝 水过多，引起培养液浓度变化或不能达到灭菌效果。 实消时间一般为 30 分钟。到时间后，关闭 F2、F14。自然冷却 10 分钟左右。 通冷却水进行冷却，操作如下：关闭夹套排水阀 F33，按冷却键，至手动冷却状态； 或调整温度设定值(调节方法见“
4、DF-B1C 控制系统的操作说明”)，按冷却键至自动 状态；此时起即进入控温状态。 当蒸汽阀门关闭后以及通入冷凝水，罐内温度会迅速下降，当压力降至 0.03Mpa 时， 必须间隙开启进气阀 F13，让空气进入发酵管内，并保持内压力在 0.030.05MPa 之间。 当罐内温度降至 70以下时，调节搅拌电机的调速器，慢速搅动培养基，加快冷 却速度；同时可稍开进气阀 F13 和调节排气阀 F14，使罐压保持在 0.030.05 MPa 之间。 注意在各操作过程中，必需保持空气管道压力大于发酵罐压，否则会引起发酵液倒 流进过滤器中，堵塞过滤器而失去过滤能力。 （三）接种当发酵液温度降到接种温度时即可
5、进行接种。 准备合格的摇床菌种。 用酒精棉擦洗罐顶接种口，并在接种口四周围上酒精棉。接种者的双手也需用酒精 棉擦洗消毒、晾干。 调进气阀 F13，减少进气量（不能关闭，否则罐压跌零，引起污染） ，拧松接种口 螺母；检查罐内压力是否在 0.01MPa 以下（如不在应开大排气阀 P14 或调进气阀 F13，减少进气量） ，点燃接种口四周的酒精棉；拧下接种口螺母，并将其放入预先 准备的盛有酒精的培养皿中。 将菌种瓶的瓶口在火焰上烧一会儿，并在火焰下拔下瓶塞，迅速将菌种倒入发酵罐 内。 盖上接种口螺母，灭火焰，拧紧螺母；并用酒精棉将接种口擦洗干净。 调节进气阀 F13 及排气阀 F14，达到工艺要求的通气量及保持罐压。 （四）培养 （五）取样 （六）出料 （七）发酵罐的清洗 （八）发酵罐的维护与保养
