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1、” 性等问题也有待深入探讨。致谢：西北农林科技大学 2003 级硕士研究生张!参加数据统计分析，特此致谢。参考文献1许长同，余德生，赖澄清，等. 橄榄栽培M . 北京：中国农业出版社，1999：1 -462彭成绩，邱瑞强，方书远，等.橄榄栽培技术M .广州：金盾出版社，1997：1 -133胡德活，梁学海，吴祖强，等.幼龄橄榄开花结实初步调查J . 广东林业科技，2001，17（1） ：27 -314胡德活，吴惠姗，曾培贤，等.广东省橄榄种植概况、存在问题及对策J . 广东园艺，2002，3（3） ：3 -65黄少伟，谢维辉.实用 SAS 编程与林业试验数据分析M .广州：华南理工大学出版社，
2、2001：28 -976徐冰，胡晓红. 果树田间试验中的两种统计分析方法J .中国果树，1989（4） ：41 -457莫惠栋.农业试验统计M .上海：上海科学技术出版社，1984：267 -2788唐启义，冯明光.实用统计分析及其 DPS 数据处理系统M . 北京：科学出版社，2002：285 -2979张代坚，赵含章.因子分析法在肉质评定与选育中的应用J . 中国畜牧杂志，1993，29（3） ：25 -27番木瓜继代培养影响因素的探讨游恺哲 林冠雄 周常清 李卫红（广东省广州市果树科学研究所，广东广州 510405）收稿日期：2006 -09 -11基金项目：国家科技部星火计划（2004
3、EA780073）和广州市科技局“225 工程”重点技术攻关项目（JB02）99 -2 -058 -01）作者简介：游恺哲（1964 - ） ，男，高级农艺师，从事南亚热带果树组织培养及番木瓜育种研究。摘 要 本文探讨了影响番木瓜继代培养的若干因素，以期为番木瓜组织培养工厂化育苗提供技术依据。结果表明：培养基的 pH 值应调至 6. 1 10. 1；不同番木瓜品种对激素水平的要求有明显差异；诱根培养基中的活性碳浓度以 1 gL-1较合适。关键词 番木瓜；继代培养；影响因素Study on Impact Factors of Papaya SubcultureYOU Kai - zhe LIN
4、Guan - Xiong ZHOU Chang - ging LI Wei - hong（Guangzhou Institute of Fruits Sciences，Guangzhou 510405，Guangdong China）Abstract SeveraI impact factors were investigated on papaya subcuIture in order to provide a technoIogicfoundation for the papaya tissue cuIture and rapid muItipIication. The resuIts
5、showed that medium pH was6. 1 10. 1，the different cuItivars obviousIy had different demand on phytohormone IeveI in the medium.The optimum concentration of active carbon in root - induced medium was 1 gL-1.Key words Papaya；Tissue cuIture；Impact factors番木瓜（ Carica papaya L. ）是重要的热带、亚热带水果，也是营养丰富的保健水果。
6、据 FAO统计1，全球共有 25 个国家种植番木瓜，2004 年收获面积 36. 5 万 hm2，产量 650 万 t。我国投产面积 6 200 hm2，产量 16. 5 万 t，分别仅占世界的1. 70%和 2. 54%，番木瓜产业的发展前景广阔。采用组织培养（组培）技术培育两性株苗，改变了用种子繁殖番木瓜苗木的历史。与实生苗对比，两性株组培苗具有株性稳定、早熟、稳产、果实外观一致等优点，经济效益提高 25% 以上。目5福建果树总第 140 期 Fujian Fruits 2007. 1试验研究前，番木瓜组织培养技术已有较大发展，组培苗的批量生产也开始起步。但是，关于番木瓜组培育苗的影响因素
7、鲜有报道。为此，我们进行了相关研究，以期为番木瓜组织培养工厂化育苗提供技术基础。1 材料与方法试材为番木瓜第 5 8 代组培不定芽。以 MS为基本培养基，并添加蔗糖 30 g L-1和琼脂6 gL-1；继代培养基附加不同浓度的6 - BA、KT和 NAA 组 合（ 表 2） ，诱 根 培 养 基 附 加 NAA1 mgL-1，活性炭（AC）浓度分别为 1、2、3、4、5 gL-1。除 pH 值对组培苗的影响试验外，其余培养基 pH 值调至 6. 1 10. 1，121C灭菌 15 min。培养温度（27 12） C，光照度 1 200 IX，光照时间12 1c-1。每个处理 72 120 瓶（
8、每瓶 6 个芽） ，重复 3 次，培养 30 c 后统计结果。2 结果与分析2. 1 培养基 pH 值对组培苗生长的影响从表 1 可见，pH 值 6. 13（灭菌前）的培养基固化正常，月增殖系数最高（3. 87） ，组培苗生长良好。pH 值。6. 02，培养基偏软，甚至不固化，组培苗生长差；pH 值。6. 34，培养基太硬，组培苗生长也不正常。因此，番木瓜组培培养基的理想pH 值为 6. 13。表 1 培养基 pH 值对组培苗生长的影响pH 值 （灭菌前）培养基 固化状况月增殖系数 （n 值）组培苗 生长情况5. 65不凝固5. 80半固化1. 47差、 玻璃化6. 02偏软2. 45较差6.
9、 13正常3. 87好、 叶翠绿6. 34偏硬2. 24较差6. 51太硬1. 36差、 叶黄化2. 2 激素配比对增殖系数的影响经连续 5 代培养结果表明（表 2） ，不同番木瓜品种所需的适宜激素水平有明显差异。红妃、红表 2 番木瓜品种不定芽增殖系数与激素水平的关系培养基 代号生长调节剂 （mgL-1）不定芽增殖系数 （n 值）6 - BAKTNAA美中红穗中红红日系列夏威夷红妃红铃 2 号P11. 0000. 204. 164. 235. 265. 375. 816. 17P20. 500. 500. 203. 613. 774. 454. 585. 345. 54P30. 7500.
10、203. 173. 243. 874. 114. 724. 86P40. 500. 250. 152. 582. 723. 223. 363. 773. 94P50. 250. 500. 152. 252. 333. 023. 073. 323. 51P60. 250. 250. 101. 892. 132. 582. 762. 873. 16铃 2 号等中果型品种只需较低水平的细胞分裂素（P5与 P6） ；夏威夷和红日系列等小果型品种需稍高水平的细胞分裂素（P4） ；穗中红和以其为父本选育出的美中红品种则需要较高水平的细胞分裂素（P3） 。较高水平的细胞分裂素有利于提高增殖系数，但是，当 n
11、 值超过 4. 5 时，丛生芽过密，节间偏短，无菌操作时难以切割成单芽，不利于诱导生根和壮苗，也影响瓶苗的移栽成活，实际生产中增殖系数以 3. 0 3. 5 较适合。与单独使用 6 - BA（P1和 P3）相比，采用 KT 和 6 - BA 激素组合的培养基（P2、P4、P5） ，虽然月增殖系数稍有下降，但幼苗的生长状况较好，木质化程度也较高，有利于不定芽的诱导生根。2. 3 活性炭浓度对组培苗根系诱导的影响 图 1 表明，活性炭的浓度以 1 gL-1较合适，诱根率 85%以上，而且根系细长，幼苗生长良好。 在激素水平相同的培养基中，当活性炭的浓度增加 到 3 gL-1时，诱根率降至 12%
12、。由于每毫克能吸附约 100 mg 生长调节剂，而且还吸附铁盐和维 生素2，因此，活性炭浓度过高不利于番木瓜组培苗的根系诱导。6福建果树总第 140 期 Fujian Fruits 2007. 1试验研究100806040200 12345诱根率(%)活性炭浓度(g!L-1)图 l 活性炭浓度对组培苗根系诱导的影响3 讨论3. 1 选择优良母株作为外植体来源番木瓜的组培研究采用的外植体包括幼胚、子叶、叶片、实生苗茎段和成年株的侧芽等，选择优良的母株作外植体，对番木瓜组培育苗至关重要。应从已进入收获期的植株中选择产量、品质以及果实性状均优的单株作母株。进入收获期的果园环斑花叶病为害严重，即使未表
13、现病症的单株也可能已受病毒（PRV）侵染，因此，母本园必须有 40 目以上的防虫网保护，以防蚜虫传播病毒。3. 2 调整培养基配方，保持合适的繁殖系数由于前一代培养基的激素水平对当代培养物的生长仍有后续影响，随着培养物的继代次数的增加，内源激素水平和激素间的比例都会发生一定的变化，因此，对于不同类型的番木瓜品种以及相同品种继代培养的不同阶段，很难一成不变地采用一种培养基，要根据不同品种以及培养物的实际生长情况适时地调整。在工厂化育苗过程中常常要同时生产多个品种，而且，中后期继代培养与诱导生根两个阶段同步进行，即同一批丛生芽中的一部分转入增殖培养，另一部分则转入生根培养。因此，既要保持适量的月增
14、殖系数，又要使丛生芽在转入诱根培养时有足够的木质化程度，以利于瓶苗的生根和移栽成活，还要尽可能简化培养基的种类，以利于生产管理。经过多年探索，我们认为表2 中的 P4和 P5培养基适用于大部分番木瓜品种的继代培养，生产前期采用 P4继代培养基，中、后期采用 P4和 P5培养基进行交替继代培养，对维持不定芽的正常生长和较高的增殖系数比较有利。穗中红和美中红品种则宜采用 P2和 P4培养基进行交替继代培养。3. 3 替代培养基主成分，降低组培成本能源的消耗是工厂化育苗生产中的最大开支，其中用于培养室温度调节的能源消耗占近半。l5 30C的环境温度都能满足番木瓜组培苗的生长，只是生长的速度稍有差异，
15、因此，培养室的温度控制无须象组培试验那样严格控制在（27 1 2） C，通常只在冬季的夜间适当加温，夏、秋季节的白天当室温超过 30C时才开空调降温。构成培养基的主要成本因素是水和碳源，两者约占培养基灭菌前直接成本的 72. 2%。采用井水和食用白糖代替去离子水和化学纯蔗糖配制的培养基，无论是继代培养还是诱根培养均未出现不良影响，而且能使培养基灭菌前的直接成本降低六成。3. 4 降低组培苗玻璃化比率组培苗出现玻璃化现象是工厂化育苗生产中的严重问题。对引起玻璃化苗的原因目前仍无统一看法。但可以肯定的是，玻璃化是一种生理病害3。半固化培养基、用自来水配制培养基、6 - BA 浓度和培养代数过高都会
16、引起番木瓜组培苗的玻璃化4。上述问题在生产中是可以解决的，但仍发现有玻璃化现象出现，尤其是在冬季。经过多年探索，我们认为：温差太大导致培养容器内水分过饱和才是造成番木瓜组培苗出现玻璃化的主要原因。冬季的培养室虽有加温措施，夜间温度仍低至l2C，而白天若继续加温，中午会超过 32C，温差达到 20C，容易诱发玻璃化苗。这种现象在春季的温室炼苗阶段也曾出现。减少日温差就可有效降低玻璃化比率。不同品种的番木瓜组培苗对环境变化的忍耐程度不同，在相同的日温差条件下，美中红、夏威夷等小果型品种较易出现玻璃化现象。本文只探讨了影响番木瓜继代培养阶段的若干因素。然而，组培苗的炼苗和移栽技术对工厂化育苗同样重要，而且直接影响组培工厂化育苗的经济效益，对此还需进一步研究。参考文献l杨连珍，韦
