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1、微生物自主设计实验1常用香辛料的抑菌效果探究常用香辛料的抑菌效果探究【摘要】本实验对日常生活中常见的香辛料大蒜、生姜和辣椒的抑菌性进行了探究，得出了三 种物质对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的不同抑菌效果，其中生姜和辣椒对 三种菌的抑菌效果不明显，大蒜对三种菌的抑菌效果都比较明显，且浓度越高效果越强， 加热后抑菌效果有所下降。In this study, the antimicrobial activity on the daily life of common spices garlic, ginger and chilli inquiry, obtained three subst
2、ances inhibitory effect on E. coli, Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis, in which the ginger and chilliobvious inhibitory effect of the three bacteria, garlic antibacterial effects of the three bacteria are more obvious, and the higher the concentration the stronger the inhibitory effect dec
3、lined after heating.【实验目的】通过所学的微生物实验技能，简单探讨、检测几种常见香辛料的抑菌、杀菌效果。【实验材料及仪器设备】1. 菌种：大肠杆菌（Escherichia coli），金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus），枯 草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。 2. 培养基：牛肉膏蛋白胨固体培养基（300mL）。3. 3 种常用的香辛料：大蒜、生姜、辣椒。 4. 仪器、试剂及用具：电子秤、烧杯、电磁炉、三角瓶、无菌水、涂布器、研钵、过 滤器、无菌培养皿（36 个）、酒精灯、移液枪、枪头、圆滤纸片、镊子、37 恒温培养箱等。【实验步骤】
4、(一) 实验前期准备： 1. 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（300mL），在三角瓶中加入牛肉膏 0.9g、蛋白 胨 3g、NaCl 1.5g、水 200mL，用玻棒搅拌溶解，之后加入琼脂 2.5g 后加热溶 解，分装两个三角瓶。 2. 灭菌 牛肉膏蛋白胨固体培养基 36 个培养皿 若干圆滤纸片（放在一个培养皿中） 54mL 蒸馏水（分装于 12 支试管中） 试管 10 支微生物自主设计实验2枪头若干 取以上用品进行高压蒸汽灭菌。(二) 抑菌效果的测定： 1. 称取大蒜、生姜、辣椒三种香辛料各 50g，分别用研钵捣碎，先用纱布过滤， 再分装到两支试管中。分别将三组中的一支试管放到大烧杯中，沸水浴加
5、热 3min，然后将 6 支试管中的物质分别用过滤器过滤出原液置于 6 支试管中。 无菌操作，用 12 支含 4.5ml 无菌水的试管分别对六种原液进行 50%和 25%的 稀释，共得到 18 种不同浓度的提取液。 2. 无菌操作，将 18 种不同浓度的提取液分别倒入 18 个培养皿中，各自放入 10 个滤纸片，浸泡备用。 3. 无菌操作，将牛肉膏蛋白胨固体培养基加热溶解后倒 18 个平板，待凝固后分 别用大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌接种到其中的 6 个平板（用 移液枪取 0.2mL 菌液置于相应平板中，进行涂布），并做好标记。 4. 将接种好的平板静置 5min，按照如下布局，将事
6、先准备好的浸泡在提取液中的 滤纸片放置于平板中相应的区域内（每种菌分别对应三种香辛料各两份，一 份作为重复），放置 5min 后，转移到 37恒温培养箱中培养 24 小时。(三) 结果观察与记录： 测量抑菌圈的大小并做记录。【实验结果】微生物自主设计实验3细菌培养的抑菌圈观测结果如下:抑菌圈大小原液50%25%菌种香辛料种类培养基 a培养基 b培养基 a培养基 b培养基 a培养基 b大蒜2.482.511.851.931.421.43大蒜（加热）1.922.031.671.690.941.1生姜000000生姜（加热）000000辣椒000000大肠杆菌辣椒（加热）000000大蒜2.412.
7、371.231.291.170大蒜（加热）1.321.141.1200.870生姜000000生姜（加热）000000辣椒000000金黄色葡 萄球菌辣椒（加热）000000大蒜2.532.472.131.061.240.97大蒜（加热）1.231.190.920.9700生姜000000生姜（加热）000000辣椒000000枯草芽孢 杆菌辣椒（加热）000000【分析讨论】通过实验所得抑菌圈大小的数据可以看出三种香辛料对于三种菌的抑菌效果。生姜和 辣椒的提取液经不同的实验条件处理后，均不能使三种培养基产生抑菌圈，所以本实验推 测，生姜和辣椒对于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的抑菌效
8、果不明显。实验 结果中，大蒜的提取液经不同的实验条件处理后，一般都能产生较为明显的抑菌圈，表明 大蒜对于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及枯草芽孢杆菌都有较为明显的抑菌效果。 下面就大蒜对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及枯草芽孢杆菌的抑菌效果，做深入的分 析。对实验结果进行处理，得到大蒜对三种菌的抑菌效果数据，如下：抑菌圈大小平均值菌种处理条件 25%50%原液未加热1.4251.892.495大肠杆菌加热1.021.681.975未加热0.5851.262.39金黄色葡萄球菌加热0.4350.561.23微生物自主设计实验4未加热1.1051.5952.5枯草芽孢杆菌加热00.9451.21通过以上数
9、据，可以看出大蒜的提取液的原液以及分别稀释到 25%和 50%后都能使大肠 杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的培养基形成抑菌圈，对三种菌的抑菌效果比较明 显，将三种香辛料的提取液分别加热后，对三种菌仍然具有较强的抑菌性，只是较加热前 有一定的下降。对比三种菌培养基的抑菌圈大小，在大肠杆菌的培养基中形成的抑菌圈最 大，在金黄色葡萄球菌的培养基中形成的抑菌圈次之，在枯草芽孢杆菌的培养基中形成的 抑菌圈最小，由此可以看出，大蒜对三种菌中大肠杆菌的抑制性最强，对枯草芽孢杆菌的 抑制性次之，对金黄色葡萄球菌的抑制性最小。 分别将大蒜对三种菌的抑制性进行分析，三种抑菌效果图如下：原液原液25%25%50
10、%50%微生物自主设计实验5通过以上各图，可以直观的看出大蒜的提取液抑菌效果与浓度相关，浓度越大，抑菌 效果越强，而且经过加热的提取液相比于同等浓度的未经加热的提取液的抑菌效果有所下 降，但在三种菌中的下降表现程度略有不同，对大肠杆菌的下降最明显，对金黄色葡萄球 菌和枯草芽孢杆菌的下降较为明显。大蒜的提取液对三种菌的抑菌效果随浓度的变化也有 一定的差异，大肠杆菌的抑制性影响最小，对枯草芽孢杆菌的抑制性影响次之，对金黄色 葡萄球菌的抑制性最大，刚好与对三种菌的抑制性强度相反。 加热后的提取液相比于同浓度的未经加热的提取液的抑菌效果下降，原因可能是对提 取液进行沸水浴加热导致提取液中的部分抑菌物质
11、被分解破坏，从而抑菌效果下降。 本实验中，由于操作不当或实验方案的问题，可能导致部分实验结果与实际不符，但 由于本实验设置了重复，所以保证了总体的实验结论的正确性。 由于大蒜对于常见的菌类具有较好的抑菌性，所以，在使用或使用过程中对此加以有 效利用。【参考文献】1.李静,吴卫东.大蒜、生姜水浸液对体外细菌抑制的对比研究J.中国调味品, 2008,(12).2.孙翠玲,于大胜.大蒜素的提取及其应用J.广州化工,2009,(06).3.郑俏然,姚成强,郑丽霞.大蒜及生姜提取液抑菌性能的对照研究J.农产品加工(学刊),2011,(02).【致谢】感谢老师对本实验方案的指导和建议，以及助教老师在实验实施过程中给予的大力帮 助，最后感谢全体小组成员的积极配合！原液25%50%
