酸性蛋白酶生产工艺

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1、酸性蛋白酶生产工艺 1.种子罐 1.1、投料体积 1.2、配方及制作方法 糊精 5% 豆饼粉 3% 酵母膏 0.5% 磷酸氢二钾 0.2% 羧甲基纤维素钠 0.5% 玉米浆 2% 消泡剂 PPE0.06% 灭菌后 PH4.6-4.8 1.3、培养基配制方法:先将上述原料用自来水溶解,搅拌 30 分钟,然后用磷酸调节 PH4.6 左右。 注:羧甲基纤维素钠单独溶解当主料升温至 90时加入。 1.4、灭菌:121 35 分钟 1.5、接种:冷却到 33接入种子。 1.6、培养条件:温度:30通风量:0-10 小时 1:110 小时-移种 1:1.2罐压:0.05-0.08Mpa 1.7、液体种子成

2、熟标准:培养液稠密,菌丝体多,染色深,无杂菌,PMV 达到 40%, 周期 20 小时左右,移种量 20%。 2、 发酵罐 2.1、投料体积 2.1、配方玉米粉 5%玉米浆 2%豆饼粉 4%酵母粉 0.5%氯化钙 0.5%磷酸氢二钾 0.3%氯化铵 0.5%消泡剂 PPG0.06%高温淀粉酶(2 万) 制作方法:先将基础料中的玉米粉、豆饼粉、酵母粉、氯化钙加水溶解后,投入罐中,搅 拌 20 分钟使其充分溶解,调节 PH6.0,加入液化酶,加热至 91液化 20 分钟后再加入玉 米浆及各种无机盐,最后用磷酸调节 PH5.2。 3、接种:冷却到 30接入种子。 4、培养条件:温度:29-30PH:

3、初始 PH5.2,当 PH 降至 4.8 时,补氨控制 4.7-4.8。通风量:0-10 小时 1:111-120 小时 1:1-1:1.2罐压:0.06-0.07Mpa搅拌转速:200-650rpm(根据溶氧可调) 5、补料罐配料麦芽糖浆 20%KA 水解液 40%玉米浆 2%PPG 0.06%PH 不高于 4.5,若高于 4.5 用磷酸调回。 KA 水解液的水解方法:KA:水 1:6 加入石灰 6%(相对 KA) ,升温至 1.2kg/cm2,保 压 1 小时。 6、补料控制:当发酵 10 小时左右,PH 自然回升时开始补料,控制溶氧 30%。酸性蛋白酶发酵生产控制工艺 1、 一级种子罐(

4、2m) 1.1、投料体积 1m,实际投料体积 0.8m。 1.2、配料方法:原料加入配料罐后,搅拌溶解 30 分钟后测 PH 值(灭菌前) ,调节PH5.00.1。 1.3、灭菌:慢慢升温至 90,保温 15 分钟,灭菌 121 35 分钟。 1.4、控制工艺:温度 30罐压 0.05Mpa通风量 0-5 小时 36m/h6 小时后 72 m/h 1.5、移种标准:培养 24 小时左右,取样镜检无杂菌,pmv25%,即可移种。 2、 二级种子罐(10m) 2.1、 投料体积 5m,实际投料体积 4.5m。 2.2、 原料加入配料罐后,搅拌溶解 30 分钟后测 PH(灭菌前) ,调节 PH5.3

5、0.1。 2.3、 灭菌:慢慢升温至 90,保温 15 分钟,121,35 分钟。 2.4、 控制工艺温度:30罐压:0.05Mpa通风量:0-5 小时 360m/H6 小时后 400m/H 2.5、 移种标准:培养时间 6 小时左右,pmv35%,取样镜检无杂菌,即可移种。 3、 发酵罐(60m) 3.1、 投料体积 28m,实际投料体积 26m,将原料投入配料罐中搅拌 20 分钟。 3.2、 调节 PH5.0(片碱) 3.3、 灭菌:121,35 分钟。 3.4、 控制工艺温度:31罐压:0.05Mpa通风量:0-5 小时 1:0.8 1400m/H6-180 小时 1:1-1.5 1700-3500m/H根据溶氧调整。 PH 的控制:当 PH 下降至 4.3 时开始补氨,控制 PH4.7-4.8。补料控制:当发酵至 10 小时左右 PH 上升时开始补料。参考补料量:初始补料量 150-200L/H,根据溶氧情况适当增加补料量,最大补料量不 超过 300L/H。溶氧控制:一般溶氧控制在 30-35%,溶氧低于 10%,可适当增加风量及搅拌转速。3.5、 放罐标准:酶活力增长缓慢,周期 180 小时左右。 4、 补料罐 4.1、 投料体积 25m 4.2.1、投料体积 7m,实际投料体积 6.5m。 PH4.5(磷酸调) 灭菌:121,30 分钟。

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