《兔白细胞介素1(il-1)定量检测试剂盒(elisa) 使用说明书》由会员分享，可在线阅读，更多相关《兔白细胞介素1(il-1)定量检测试剂盒(elisa) 使用说明书（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。兔白细胞介素兔白细胞介素 1（IL-1）定量）定量检测试剂盒（检测试剂盒（ELISA） 使用说明书使用说明书【试剂盒名称试剂盒名称】兔白细胞介素 1（IL-1）定量检测试剂盒（ELISA）【试剂盒试剂盒用途用途】定量检测兔血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素 1（IL-1）的含量。【检测检测原理原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA） 。将标准品、待测样本加入到预先包被兔白细胞介素 1（IL-1）抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间
2、后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中兔白细胞介素 1（IL-1）浓度呈正相关，450nm 波长下测定 OD值，根据标准品和样品的 OD 值，计算样本中兔白细胞介素 1（IL-1）含量。【试剂盒试剂盒组成组成】 1酶标包被板12 孔8 条7显色剂 B 液6mL 2标准品0.3mL*6 管8终止液6mL 320 倍浓缩洗涤液25mL9说明书1 份 4生物素1mL10封板膜2 张 5酶标试剂10mL11密封袋1 个 6显色剂 A 液6mL备注：备注：标准品（S0S5）浓度依次为：320、1
3、60、80、40、20、0ng/L.【需要而未提供的试剂和器材需要而未提供的试剂和器材】 1、37恒温箱 2、标准规格酶标仪 3、精密移液器及一次性吸头 4、蒸馏水 5、一次性试管 6、吸水纸2【操作步骤操作步骤】1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡 30 分钟。2、配液：用蒸馏水将 20 倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、设置加样孔：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置。4、加标准品：标准品孔中加入标准品 50L；空白对照孔不加。5、加待测样本：待测样本孔中先加入生物素 10L，再加待测样本 50L；空白对照孔不加。6、加酶标工作
4、液：每孔加入酶标工作液 100L；空白对照孔不加。7、温育：37水浴锅或恒温箱温育 60min。8、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 4 次（也可用洗板机按说明书操作洗板） 。9、显色：每孔先加入显色剂 A 液 50L，再加入显色剂 B 液 50L，37避光显色15min。10、终止：取出酶标板，每孔加终止液 50L，终止反应（颜色由蓝色立转黄色） 。11、测定：以空白孔调零，在终止后 15 分钟内，用 450nm 波长测量各孔的吸光值（OD值） 。12、计算：根据标准品的浓度及对应的 OD 值，计算出标准曲线的直线回归方程，
5、再根据样本的 OD 值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【样本要求样本要求】1、样本不能含叠氮钠（NaN3） ，因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。2、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能立即试验，可将标本放于-20保存，但应避免反复冻融。3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。【注意事项注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检
6、测，取平均值，以减小实验误差。4、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。5、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、3样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。6、试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。7、底物 B 对光敏感，避免长时间暴露于光下。【操作程序总结操作程序总结】准备试剂，样品和标准品准备试剂，样品和标准品 加入准备好的样品、标准品和酶标试剂，加入准备好的样品、标准品和酶标试剂，3737反应反应 6060 分钟分钟洗板洗板 4 4 次，加入显色液次，加入显色液 A A、B B，3737显色显色 1515 分钟分钟加入终止液加入终止液1515 分钟之内读分钟之内读 ODOD 值值计算计算【检测范围检测范围】10ng/L - 320ng/L【规格规格】96T/盒【贮藏贮藏】2-8，避光防潮保存。【有效期有效期】6 个月
