UVB胁迫下一氧化氮信号传导对豌豆细胞壁的影响

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1、兰州大学博士学位论文UV-B胁迫下一氧化氮信号传导对豌豆细胞壁的影响姓名:曲颖申请学位级别:博士专业:生物学 植物学指导教师:王勋陵;安黎哲20060501关于学位论文使用授权的声明本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属兰州大学。本人完全了解兰、H 大学有关保存、使用学位论文的规定,同意学校保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权兰州大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用任何复制手段保存和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为兰州大学。保密论

2、文在解密后应遵守此规定。论文作者签名:边兰廷导师签名:原创性声明本人郑重声明:本人所呈交的学位论文,是在导师的指导下独立进行研究i 取得的成果。学位论文中凡引用他人已经发表或未发表的成果、数据、8 点等,均已明确注明出处。除文中已经注明引用的内容外,不包含任何其1 个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究成果做出重要贡献 个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名:塑塑兰强日期:塑6 :j :主c :!黝参参博士学位论文致谢值此论文完成之际,带着几多感慨,几多不安,诚挚地感谢各位老师的谆谆教诲,各位同学的真诚帮助!首先感谢我的导师王勋陵教授! 师者

3、,所以传道授业解惑也。是王老师引领我进入环境植物学研究领域,教我做人做学问。王老师渊博的学识,深邃的思想和敏锐的学术思维为我营造了一种良好的精神氛围。置身其中,耳濡日染,使我领会了科学的思考方式,掌握了通用的研究方法,树立了自己的学术目标。王老师平易近人,以及宽厚待人的为人风格又为我树立了做人的典范。在此向王勋陵教授表达最诚挚的谢意和最深切的缅怀之情!特别感谢安黎哲教授! 安老师宽厚豁达,严谨务实,对科研问题的精确把握,令我敬佩并为之效仿。在安老师领导的团队中,我领会到了团结与协作的精神。论文实施过程中,安老师给予了巨大的支持与鼓励。这些,我都将铭记于心!衷心感谢蒲训副教授! 蒲老师可以说是我

4、学术路上的启蒙者。几年前的一次契机来到兰大,我遇到的第一位老师就是蒲训老师。无论是学业上还是生活上,蒲老师都给了我无微不至的关怀,使我的异地求学路倍感温馨。三位老师的知遇之恩令我一生感激!在几年的学习中,我遇到了许多可敬的老师、结识了i t J 爱的同学和朋友,他们给我提供了无私的帮助与支持。感谢冯虎元副教授、徐世键副教授、强维亚副教授、张满效教授、陈拓研究员、赵志光副教授、谢小东副教授、马晓军博士在论文写作和实验上给予热心指导和帮助;l 司时还要感谢王弋博、杨祺、万丽霞、程佳强、董珑丽、杨晖、傅宣英、王建辉、章高森、薛林贵、张有福、陈书燕、幸华、常建峰、吴建民、巩莉、张玉、张华、张丽静等朋友

5、和同学对我生活上和实验中的帮助与启发:感谢生命科学院资料室、中心实验室和库房的各位老师提供的帮助。深深感谢我的家人! 他们给我亲情,给我信念。对他们无言的付出无以为报,谨以此文献给他们。曲颖2 0 0 6 年5 月3 同于兰州大学碧# t 步亭博士学位论文A B AA G P sB H dC a MC A TC F C sc A D P Rc G M PC h lC H SC P D sE D l 、AF A DF M NG R P sH GH R G P 8l A AJ AL N N AM D AN A CN A D P HN ON o S缩写( A b b r e v i a t i o

6、n s )a b s c i S i Ca c i dA r a b i n o g a l a c t o p r o t e i n st e t r a y d r o f o l i ca c i dc a l m o d u l i nc a t a l a s ec h l o r o f l u o r o c a r b o n sc y c l i ca d e n o s i n ed i p h o s p h a t er i b o s ec y c l i cg u a n o s i n em o n o p b o s p h a t ec h l o r o

7、h y t lc h a l c o n es y n t h a s ec y c l o b u t y lp y r i m i d i n ed i m e r se t h y l e n ed i a m i n e t e r a a c e t i ca c i df l a v i na d e i n ed i n u c l e o t i d ef l a v i nm o n o n u c l e o t i d eG l y c i n e - - r i c hp r o t e i n sh o m o g a l a c t u r o n a nH y d

8、 r o x y p r o l i n e - - r i c hg l y c o p r o t e i n si n d o l e a c e t i ca c i dj a s m o n i ca c i dN ”一n i t r o - L a r g i n i n em a l o n d ja l d e h y d eN a c e t y l - c y s t e i n en i c o t i n a m i d ea d e n i n ed i n u c l e o t i d ep h o s p h a t en i t r i co x i d en

9、 i t r i co x i d es y n t h a s e脱落酸阿拉伯半乳糖蛋白四氢1 酸钙调蛋白过氧化氢酶氯氟烃环腺苷二磷酸核糖体环鸟苻酸叶绿素查尔酮合酶环T 烷嘧啶二聚体乙胺四乙酸黄素腺嘌呤二核苷酸黄素单核苛酸富含甘氨酸的蛋白同型半乳糖醛酸聚糖富含羟脯氨酸的蛋白吲哚乙酸莱莉酸N “一硝基一L 一精氨酸丙二醛N 一乙酰半胱氨酸烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化氮氧化氨合成酶錾搿一步亨博士学位论文N Ro ,。O H o O N oP A LP A RP M S FP O DP RP R P SP T I oR G 1R G I lR o SS AS A RS N PU D P GU U Bn

10、 i t r a t er e d u c t a s es u p e r o x i d ea n i o nh y d r o x y lr a d i c a lp e r o x y n i t r i t ep h e n y l a l a n i n ea m m o n i al y a s ep h o t o s y n t h e t i c a l l ya c t i v er a d i m i o np h e n y l m e t h y ls u l f o n y lf l u r i d ep e r o x i d a s ep h a t h o

11、g e n e s i s r e l a t e dp r o t e i nP r o l i n e - - r i c hp r o t e i n s2 - p h e n y l - 4 ,4 ,5 ,5 一t e t r a m e t h y l i m i d a z o l i n e- - l - o x y l 一3 - o x i d eR h a m n o g a l a c t u r o n a n - IR h a m n o g a l a c t u r o n a n I Ir e a c t i v eo x y g e ns p e c i e s

12、s a l i c y l i ca c i ds y s t e m i ca c q u i r e dr e s i s t a n c es o l i u mm i t r o p r u s s i du r i d i n ed i p h o s p h a t eg l u c o s eu I 订a v i o l e t B硝酸还原酶超氧阴离子羟自由基过氧化硝酸阴离子苯丙氨酸裂解酶光合有效辐射苯甲基黄酰氟过氧化物酶致病基冈相关的蛋白富含脯氨酸的蛋白2 一苯基一4 ,4 ,5 ,5 ,甲基咪唑啉一1 一氧一3化物鼠李半乳糖醛酸聚糖I鼠李半乳糖醛酸聚糖I I活性氧水杨酸系统获

13、得抗性硝普钠尿苷二磷酸葡萄糖紫外线一B四氧瓢步害博士学位论文摘要臭氧减薄使到达地面的紫外线一B ( U V - B ,2 8 0 3 2 0r i m ) 辐射增强。由于u V B 具有高能量,因此u VB 辐射增强将会对植物的生长发育、生理生化过程产生负面影响。N O 是近年来新兴的活性小分子,作为信号参与植物对逆境胁迫的应答和防御。而对于N 0 在u V B 辐射过程中的信号作用研究甚少。为了研究u 卜B辐射抑制植物生长的机理及可能的信号途径,本文以豌豆幼苗为材料,模拟兰州地区2 0 臭氧衰减时增强的u V B 辐射( 4 8 K J m 2 ) ,研究了N 0 在u v B 辐射下的信号

14、传导及其对细胞壁的影响,取得以下的结果:1 、U V - B 降低了豌豆的伸长生长和术葡聚糖降解酶活性,促进了N O 的释放和细胞质中N O S 活性升高。S N P 能够模拟U V - B 辐射的这种作用,而L N N A 和P T I O 对伸长生长、木葡聚糖降解酶的活性、N O 释放的影响与U V - B 相反。木葡聚糖降解酶的活性与细胞质中N O S 的活性呈线形相关。结果说明:N O 是U V - B辐射下产生的与生长发育有关的信号分子,相关N O 的来源是N O S 系统。U V - B诱导的生长抑制是通过影响细胞壁降解酶活性,改变细胞壁化学特性和机械延展性实现的。N O 作为U

15、V - B 辐射的第二信使介导了这一过程。2 、半纤维素A 单位长度总糖和醛酸含量与生长没有明显相关性,它们的变化趋势与单位长度细胞壁含量的变化趋势相反,在生长缓慢的前期急剧增加,而在生长较快的后期迅速下降。与对照相比,U V - B 辐射增加了半纤维素A 的总糖和醛酸含量。S N P 模拟了U V - B 辐射的这种作用,而L N N A 和P T I O 则逆转了U V - B 对半纤维素A 的影响。这种变化表明半纤维素A 的合成增多可能与抑制生长有关,而U V - B 产生的N O 调节了半纤维素A 的含量,从而完成了U V - B 对植物生长抑制的作用。3 、单位长度细胞壁含量随生长天

16、数增加而下降。果胶、半纤维素B 和纤维素的单位长度总糖含量和醛酸含量与单位长度细胞壁含量的变化趋势相似。细胞壁含量,果胶、半纤维素B 、纤维素总糖含量和醛酸含量与生长呈线形负相关,相关系数在O 9 6 以上。U V - B 辐射能够提高各种细胞壁组分的单位长度总糖和醛酸的含量。S N P 对除果胶外的细胞壁各组分的作用与U V - B 辐射相似,L N N A 和P T I O 对除果胶外的细胞壁其它组分的作用与U V - B 辐射相反。这表明单位长度细胞壁物质含量下降使细胞壁减薄,细胞壁可塑性增强,促进细胞生长。并进一够蚪步乎博士学位论文步证实了U V - B 辐射是诱导的生长抑制是通过N O 信号影响细胞壁组成,改变细胞壁化学特性,使细胞壁增厚,提高细胞壁机械强度,降低细胞壁延展性实现的。4 、对照条件下,内源N O 水平较低,外源N O 能够诱导N O S 活性增加并促进N O 释放率;而U V - B 辐射下,内源N O 水平较高,与外源N O 一起降低了N O S 活性从而减少N O 释放率,且N O

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