真菌的特性及最新早期诊断技术介绍

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1、肟静点,7 1 0 天为1 疗程。2 、肺炎双球菌:首选青霉素,成人1 6 0 0 2 0 0 0 万U d ,分4 6 次静点,小儿2 0 4 0 万U k g 。待症状好转或脑脊液接近正常可改为8 0 0 万U d ,直至体温正常、症状及体征消失、脑脊液正常为止。一般2 周为1 疗程。重症患者治疗在脑脊液正常后再维持治疗2 周。也可选用头孢曲松或头孢噻肟治疗,1 0 一1 4 天为1 疗程。3 、葡萄球菌:首选氨苄西林,成人1 2 9d ,小儿肌注5 0 - 1 0 0 m g k g ,静点1 0 02 0 0 m g k g ,1 - 2 次d ,4 周为l 疗程。对于耐药菌株可用去甲

2、万古霉素,也可选用头孢噻吩或头孢噻啶,成人4 6 9 d ,小儿8 0 1 0 0 m g k g 静点,1 4 2 1 天为l 疗程。4 、流感、嗜血杆菌:首选氨苄西林,首剂1 0 0 m g k g ,以后3 0 0 m g k g 静点,4 次d ,1 0 1 4 天为1 疗程。对耐药菌株选用头孢曲松、头孢噻肟或氯霉素,1 01 4 天为1 疗程。5 、大肠杆菌:首选氨苄西林,也可选用头孢曲松或头孢噻肟,并联合应用庆大霉素或卡那霉素,待脑脊液细菌培养转阴后继续用1 0 一1 4 天。对症及支持治疗:所有细菌性脑膜炎均需住院治疗,对于流脑要及时隔离,对于昏迷的患者要保持呼吸道通畅,必要时做

3、气管切开。维持静脉通路,确保水、电解质及酸碱平衡,监测生命体征,降颅压以防止脑疝。如有癫痫发作或癫痫持续状态者可给予抗癫痫治疗;对躁动不安、有精神症状者可适当给予镇静剂。加强护理,防止褥疮、尿路感染及肺部感染。真菌的特性及最新早期 诊断技术介绍内蒙古包头市铁路医院检验科 徐晓莉0 1 4 0 4 0真菌多在土壤生长,孢子飞扬于空气中,可能被吸入肺部引起肺真菌感染( 外源性) ,如曲茵、奴卡菌、隐球菌、荚膜组织胞浆。有些真菌为口腔寄生菌,当机体免疫力下降时可引起肺部感染,例如念珠菌为口腔、皮肤、肠道及阴道的寄生菌,放线菌为口腔龋齿寄生菌,此类均可引起继发性肺部真菌感染。静脉高营养疗法的中央静脉插

4、管如留置时间过长,高浓度葡萄糖虽不适合细菌生长,但易致念珠菌败血症。由于长期应用广谱抗生素、糖皮质激素、免疫抑制剂、化疗或放疗后以及A I D S 患者,深部真菌感染近年来逐渐增多。深部真菌感染现在称系统性真菌感染。肺部真菌感染是最常见的系统性真菌感染。引起病变的决定因素是真菌的毒力、数量与侵入途径。真菌胞壁中的酶类亦参与促进感染与侵入宿主细胞的作用。有的真菌具有抗吞噬能力及致炎成分,如新型隐球菌有宽厚的多糖荚膜,可抵抗吞噬细胞的吞噬。有的真菌对机体的不同器官有倾向性的侵袭作用,如曲霉菌易侵犯人的呼吸道,隐球菌易侵犯脑膜。健康人对真菌有天然的高度抵抗力,体液免疫及细胞免疫均在感染中发挥作用。有

5、些真菌感染有地理区域特点,与真菌的特有生态特征使当地居民对其产生易感性有关。生活习性、居住工作环境等亦有一定影响,如居住于潮湿发霉的房屋、经常接触带有真菌滋生、布满尘埃的物品,诸如草绳、木料、纸张、垃圾、腐烂的植物、种子以及鸟类的粪便、土壤等,均可能感染真菌。长期中性粒细胞低下、广谱抗生素的应用、器官移植、接受免疫抑制剂及大剂量激素治疗者若出现不明原因长期发热应警惕系统性真菌感染,对这一类患者应多取痰、尿、血、胸水等标本作涂片直接镜检,有条件者进一步做真菌培养。一旦临床上高度怀疑有系统性真菌感染,无论实验室回报结果是否阳性,均应立即给予抗真菌治疗。抗真菌感染治疗疗程普遍较抗细菌感染疗程为长,而

6、有些抗真菌药副作用较大,部分病人不能耐受以至治疗中断而失败。及时准确地诊断真菌感染及通过实验室研究探讨真菌耐药的机制是真菌实验室工作的重要方面。i 、采用的新技术和新方法:德国杜宾大学的E i n s e l e 医生提出用P C R 技术对患者的血液进行真菌病病原学诊断。该技术是用一段18 s 的核糖体R N A 作为模板进行D N A 扩增,此模板是真菌细胞中的保守序列,扩增后用不同的种特异性D N A 小片段作为探针进行杂交。该方法快速、敏感( 每毫升血液有一个真菌细胞就可被发现) ,所有真菌感染患者检测均为阳性,健康人中的假阳性率为1 6 。该法同时可检测多种致病因子,并可对真菌鉴定到

7、种。2 、美国临床实验标准制定委员会(N C C L S ) 已暂定了酵母鉴定及药敏试验法( M 2 7 一T ) ,但对丝状真菌的测定还没有标准。德克萨斯大学的M i l l 医生证明用E T E S T 法可对丝状真菌进行药敏检测。把分离所得真菌的孢子和菌丝置于生理盐水1 6制成混悬液,调节至M c F a r l a n d1 号管浊度,涂于R P M I 培养基,3 5 。C 孵育2 4 7 2 小时,根据菌落生长情况即可判定结果。对于丝状真菌来说,该法简便易行、快速、准确。3 、真菌胞壁或胞内成分的检测:( 1 )烯醇化酶( E n o l a s e ) 烯醇化酶广泛存在于真菌细胞

8、中,含量丰富且高度保守。它。也是白色念珠菌中含量最为丰富的蛋白质之一,研究显示只有在深部白色念珠菌感染时才大量释放烯醇化酶,而寄生在浅表部位的白色念殊菌一般不会释放该酶。 ( 2 ) b e t 稍聚糖,目前检测b e t a一葡聚糖的方法是G 试验,应用于念珠菌感染和曲菌感染感染的诊断。 ( 3 ) 甘露聚糖( M a n n a n ) 甘露聚糖是目前研究最为广泛的一种抗原,它对热稳定广泛存在于真菌胞壁中,是真菌胞壁的重要组成成分。目前已有多种血清学方法用于外周循环中甘露糖的检测,包括P a s t o r e x 法、F A C E 法( F 1 u o r o p h o r e -a

9、 s s i s t e dc a r b o h y d r a t ee l e c t r o p h o r e s i s,免疫荧光碳氢化合物电泳) 等。( 4 ) C a n d - - T e c 是念珠菌属的一种热敏糖蛋白抗原,可用一种颗粒凝集试验系统( 又称L a t e x 凝集法) 检测。此种方法是一种可用于早期诊断深部念珠菌病,并决定抗真菌治疗疗程的方法。( 5 ) 荚膜多糖抗原是隐球菌( 特别是新型隐球菌) 的厚荚膜内含特异抗原性的多糖,主要用乳胶凝集( L a t e x 凝集法)进行检测。4 、P C R 产物的分析:琼脂糖凝胶电泳、限制性酶切分析、S o u t

10、 h e r n 杂交、特异性寡核苷酸探针斑点( 狭缝) 杂交、液相杂交、P C R - E L I S A 微孔板杂交法。近年深部真菌感染的诊断水平得到了较大发展,新技术为早期诊断提供了有力帮助。但是,这些新技术往往需要完善的实验室条件,干扰因素多,操作步骤较烦琐,不利于普遍开展;并且检测结果仍不能作为临床疗效考核的金标准。若将传统检测方法如真菌培养与新技术相结合,更有利于深部真菌感染诊断水平的提高。呼吸内科下呼吸道感染细菌 的分布及药敏分析 肇庆市第一人民医院李南洋5 2 6 0 4 0为了解下呼吸道感染主要病菌及耐药状况,本研究对肇庆市第一人民医院住院呼吸内科2 0 0 8 年收治的下呼

11、吸道感染患者痰培养结果进行了回顾性分析。现将结果分析如下:一、材料和方法 1 、材料:( 1 ) 菌株来源:2 0 0 8 年1 月一2 0 0 8 年1 2 月,从本院住院呼吸内科下呼吸道感染患者的合格痰液标本中分离的细菌共1 2 3 株。严格按全国临床检验操作规程) 第3 版操作。( 2 ) 质控菌株:质控菌株为铜绿假单胞菌A T C C 2 7 8 5 3 ,大肠埃希菌A T C C2 5 9 2 2 ,金黄色葡萄球菌A T C C 2 5 9 2 3 ,均购自广东省临床检验中心。 ( 3 ) 仪器:德灵公司M i c r o S c a na u t oS c a n 一4 型全自动细

12、菌鉴定分析仪。2 、方法:( 1 ) 细菌鉴定和药敏试验:使用鉴定和药敏复合板,由细菌鉴定仪检测,按美国临床实验室标准化委员会( C L S I) 标准判定结果。 ( 2 ) 统计学处理:采用w h o n e t5 4软件进行数据分析。二、结果1 、痰培养结果:对同个患者多次培养的痰液标本同一菌种作一次计算,检出致病菌1 2 3 株,其中细菌11 6 株:革兰氏 阳性( G + ) 菌1 4 株( 11 3 8 ) ,其中检出7 株为金黄色葡萄球菌( 5 6 9 ) ;革 兰氏阴性( G 。) 菌1 0 2 株( 8 2 9 3 ) ,铜绿假单胞茵2 8 株( 2 2 7 6 ) ,不动杆菌

13、属1 8 株( 1 4 6 3 ) ,大肠埃希菌1 7株( 1 3 8 2 ) ,嗜麦芽寡养食单胞菌1 4株( 1 1 3 8 ) ;真菌7 株( 5 6 9 ) 。2 、药敏结果:大肠埃希菌对加有B 一内酰胺酶抑制剂的联合药对比没有加的耐药率明显减低,产超广谱B 一内酰胺酶( E S B L s) 的比例占4 4 0 ,具体主要G 致病菌的耐药率见表2 。G + 菌由于例数太少,没有做药敏统计,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌( M R S A ) 比例占6 1 O 。表2 主要G 一致病菌的耐药率氨苄西林哌拉西林8 9 2 91 5 3 88 7 2 5一一一一8 7 5 0一一1 79 0 0 07 0 0 0

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