《植物雌激素对去卵巢血管性痴呆大鼠学习记忆能力的影响》由会员分享，可在线阅读，更多相关《植物雌激素对去卵巢血管性痴呆大鼠学习记忆能力的影响（47页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、兰州大学硕士学位论文植物雌激素对去卵巢血管性痴呆大鼠学习记忆能力的影响姓名：高晓兰申请学位级别：硕士专业：人体解剖与组织胚胎学指导教师：宋焱峰;侯一平20051201兰州大学硕士学位论文植物雌激素对去卵巢血管性痴呆大鼠学习记忆能力的影响摘要目的：研究植物雌激素对去卵巢血管性痴呆( v a s c u l a rd e m e n t i a ，v o )大鼠学习记忆能力的影响，并应用免疫组化的方法观察大鼠海马结构神经元型一氧化氮合酶( n e u r o n a ln i t r i co x i d es y n t h a s e ，n N O S ) 及神经肽Y( n e u r o p
2、 e p t i d eYN P Y ) 免疫反应阳性细胞表达的变化，探讨植物雌激素对中枢神经系统( c e n t r a l n e r v o u ss y s t e m ，C N S ) 的保护作用及可能的机制。方法：采用M o r r i s 水迷宫筛选空间学习记忆能力正常的雌性W i s t a r大鼠6 0 只，随机分为4 组，每组1 5 只：假手术及普通喂养对照组( S O组) ：只切除卵巢周围部分脂肪，基础饲料自由饮食7 0 d ；去卵巢及普通喂养对照组( O O 组) ：切除双侧卵巢后，基础饲料自由饮食7 0 d ：去卵巢及苯甲酸雌二醇注射组( O E 组) ：切除双侧卵
3、巢后第二天，在基础饲料自由饮食的基础上，给予苯甲酸雌二醇( 4 5 儿g k g ) 隔日肌肉注射一次共7 0 d ；去卵巢及大豆异黄酮喂养组( O S 组) ：切除双侧卵巢后第二天起，在基础饲料自由饮食的基础上，大豆异黄酮( 1 2 0m g k g ) 每日灌胃一次共7 0 d 。去卵巢术后2 1 天，将所有大鼠双侧颈总动脉夹闭1 0 m i n 后，开通1 0 m i n ，荐夹闭1 0 m i n ，再次开通后缝合伤口以制各V D 大鼠模型。此次造模术后4 9 天再次连续4 天应用M o r r i s 水迷宫兰州夫学硕士学位论文测试大鼠空问学习记忆能力的变化，整个行为学研究过程由水迷
4、宫测试系统记录大鼠寻找水下平台的潜伏期( 1 a t e n c y , L ) 、距离( d i s t a n c e ，D ) 、游泳速度( v e l o c i t y , V ) 等相关参数。最后一次迷宫测试结束后将各组大鼠灌注固定、取脑、切片，应用免疫组化方法检测各组大鼠海马结构神经元型氧化氮合酶( n e u r o n a ln i t r i co x i d es y n t h a s e ，n N O S ) 和神经肽Y( n e u r o p e p t i d eYN P Y ) 免疫反应阳性细胞的表达。结果：( 1 ) 在术前第1 次水迷宫测试中，随着训练次数
5、的增加，全部大鼠越来越趋向于在有平台位置的搜索，并且游泳距离越来越短，其结果表明大鼠通过训练后建立了不同程度的空间记忆。同日各组大鼠之闯寻找水下平台的潜伏期( L ) 、距离( D ) 、游泳速度( V ) 没有显著性差异( P 0 0 5 ) ；( 2 ) 在V D 大鼠模型制备术后4 9 天第2 次水迷宫测试中，O O 组的游泳距离( D ) 及潜伏期( L ) 明显较同日的S O 组、O E 组及O S 组延长，差异有显著性( P 0 0 5 ) a m o n gt h e4g r o u p s ( 3 ) I m m t m o h i s t o c h e m i s t r
6、yi nh i p p o c a m p a lf o r m a t i o nr e v e a l e dt h a tt h ep o s i t i v ei m m u n o r e a c t i v el a b e l e dn N O Sa n dN P Yw a sd e c r e a s e ds i g n i f i c a n t l yr P 0 0 5 ) 。而在V D 造模术后4 9 天第2 次水迷宫测试中，O O 组的游泳距离明显较同日的S O 组、O E 组及O S 组的游泳距离延长，差异有显著性意义( P 0 0 5 ) 。表3 各组大鼠第1 次
7、水迷宫测试中连续4 天寻找水下平台的游泳速度( c m s ，x 士s )T a b 3T h es w i m m i n gv e l o c i t i e so fe a c hg r o u pf o rs e a r c h i n gs u b m e r g e dp l a t f o r mo ft e s t1f o r4c o n s e c u t i v ed a y s ( c m s ，x4 - S )甚2 5 之2 0 蛊01 5 富1 0 V - I 85 一邑0口S 00 0 圈O E 图0 S23哇D A Y兰州大学碗士学位论义图5各组大鼠第1 次水迷宫
8、测试中连续4 天寻找水下平台的游泳速度F i g 5T h es w i m m i n gv e l o c i t i e so f e a c hg r o u pf o rs e a r c h i n gs u b m e r g e dp l a t f o r mo f t e s tlf o r4c o n s e c u t i v ed a y 表4各组大鼠第2 次水迷宫测试中连续4 天寻找水下平台的游泳速度( c r r d s ，x 士s )T a b 4T h es w i m m i n gv e l o c i t i e so f e a c hg r o u
9、pf o rs e a r c h i n gs u b m e r g e dp l a t f o r mo f t e s t2f o r4c o n s e c u t i v ed a y ( c m s ，x 士S )若2 5 12 0 o1 5 曲 巴1 0o r o5 80口S 00 0囵0 E 圈0 SD A Y34图6各组大鼠第2 次水迷宫测试中连续4 天寻找水下平台的游泳速度F i g 6T h es w i m m i n gv e l o c i t i e so fe a c hg r o u pf o rs e a r c h i n gs u b m e r g
10、 e dp l a t f o r mo ft e s t2f o r4c o n s e c u t i v ed a y 各组大鼠第1 、2 次水迷宫测试中连续4 天寻找水下平台的游泳速度如T a b 一3 ，T a b 一4 ，F i g - 5 ，F i g 6 所示。在两次水迷宫测试中各组大鼠的游泳速度始终保持在较高水平，各组之间差异没有统计学意义( P O 0 5 ) 。1 6兰州人学硕士学位论文表5各组大鼠第1 次水迷宫测试连续4 天寻找水下平台的潜伏期( s e c ，x 土s )T a b 5T h el a t e n c yo f e a c hg r o u pf o
11、rs e a r c h i n gs u b m e r g e dp l a t f o r mo f t e s t1f o r4c o n s e c u t i v ed a y s ( s e e ，x 士s )，、1 5 0o1 0 0hU 量5 0J 023哇n A Y图7 各组大鼠第1 次水迷宫测试连续4 天寻找水下平台的潜伏期F i g T h el a t e n c yo fe a c hg r o u pf o rs e a r c h i n gs u b m e r g e dp l a t f o r mo ft e s tlf o r4c o n s e c
12、u t i v ed a y s 表6 备组大鼠第2 次水迷宫测试连续4 天寻找水下平台的潜伏期( s e c ，- x 土s )T a b 6T h el a t e n c yo fe a c hg r o u pf o rs e a r c h i n gs u b m e r g e dp l a t f o r mo ft e s t2f o r4c o n s e c u t i v ed a y s ( S C C ，x4 - s )g r o u p15 d a y2 “d a y3 md a y4 m d a y S oO oo E9 6 8 5 士2 0 1 81 0 5
13、6 7 2 1 4 19 7 5 6 士1 9 8 55 6 3 2 士1 3 6 87 2 1 9 1 6 0 5 *4 3 5 9 土1 3 0 12 1 9 9 - 士9 0 16 1 3 5 士1 5 3 2 *2 0 9 7 士7 4 92 0 4 7 士7 9 23 8 1 9 士1 2 1 8 1 7 6 5 土7 2 3O S9 5 1 5 士1 8 6 34 0 11 土1 2 7 61 7 1 6 7 4 11 6 7 9 4 2 0+ P O 0 5 ) 。而在V D 造模术后4 9 天第2 次水迷宫测试中，O O 组的潜伏期明显较同日的S O 组、O E 组及O S 组
14、的潜伏期延长，差异有显著性意义( p 0 0 5 ) 。3海马n N O S 和N P Y 免疫组化的结果3 I 海马n N O S 免疫组化的结果：n N O S 阳性细胞均为神经元，胞浆和突起浓染，大部分集中于锥体细胞层和颗粒细胞层内或边缘，胞体多为锥形或梭形。O O 组大鼠海马各亚区及齿状回阳性细胞分布稀疏，数目较S O 、O E 、O S 组明显减少( P 0 0 5 ，见表7 ) 。兰州丈学倾| | 学位论义表7 高倍镜下各组大鼠海马各亚区及齿状回n N O S 阳性细胞数比较( x4 - s )塑型型塾竺垒!竺竺! 垒!曼垒!堕s o1 51 98 6 a ：2 0 51 9 2
15、4 1 9 81 8 8 6 a ：2 2 71 7 3 1 e 2 1 01 3 9 l 1 5 3o o1 5O E1 51 6 0 6 2 4 l +1 9 3 2 1 9 61 6 1 5 士2 8 1 +1 9 6 6 - b 2 2 l1 73 7 1 9 1 +18 9 7 2 5 41 5 1 3 1 2 3 +1 6 9 7 士2 3 61 2 0 3 15 1 +1 4 5 9 1 1 8竺! ! ! ! ：! ! ：! ：! ! ! ：! 兰：! ! ! ：! 壁：! 一一! ：! 坠! ：! ! ! ：! 兰! ：丝+ P 0 0 5 ，见表8 ) 。表8 高倍镜下各组
16、大鼠海马各皿区及齿状回N P Y 阳性细胞数比较( x4 - s )+ P O 0 5 ) 。说明去卵巢血管性痴呆大鼠的空间学习记忆能力受到了损害，而添加雌激素( 包括植物雌激素) 可减轻此种损害。其可能的机制为：植物雌激素由于具有弱的雌激素作用，其中枢保护作用可能通过E R ，从两方面发挥作用：( 1 ) 长期基因组作用：通过与核内受体结合，并与D N A 的特殊位点反应元件结合，影响基因的转录、表达、翻译；( 2 ) 快速的非基因组作用【4 5 】。即与植物雌激素结合受体不在核内，而可能在胞膜上，通过第二信使，完成信号传导，导致一系列蛋白质磷酸化，并通过c 舢旧反应成分结合蛋白( c m 皿r e s p o n s ee l e m e n t - b i n d i n gp r o t
