《T细胞疫苗诱导异品系大鼠同种异体肢体移植免疫耐受的实验研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《T细胞疫苗诱导异品系大鼠同种异体肢体移植免疫耐受的实验研究（78页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、哈尔滨医科大学博士学位论文缩略词Tc e l l v a c c l n atl o nA 刀 t o i 刀 I n l u r e d l s e a s eA u t o i l l 刀 1 1 l l n e enc ePh a l 0 I I y e l i t i sadjuva I 1 t aIt颐ti sm u l t i P l e s c l e ros i sTc e l l r e c ePtorm y e l i n b a s i c P ro t ei nC o l l l P o s i t e Tis s u e All o gra ft sA l l 吐 i
2、 g e n P r e s ent i ng c e l l sd end ri t i cc e l lC P t o t o x i c TI 扣 1 1 P hoc yt eD a r k a g o u t i ratL e 认 Z i s r atD e l aye d tyPe l l yPe r s e n s i ti v i tyF a s l i g a n 1F l u o r e s c e in 一 i s o t hi o C P anat eH um anl e uko c yt e ant i g e n工 爪erl e u kin 一 2五 且 erleu
3、kln 一 4hit erl e u 卜 i n 一 1 0Maj o r hi s t o c o ll l P at l b i l i t y c o n l l 斗 l e xMl x e d l 犯 1 1 P h o c yt e r e act i o nTh e 1 P e r t yPe l c e l lT细胞疫苗自身免疫性疾病实验性自身免疫性脑脊炎佐剂性关节炎多发性硬化T细胞受体髓鞘碱性蛋白异体复合组织移植抗原呈递细胞树突状细胞细胞毒性 T淋巴细胞D A大鼠路易斯大鼠迟发型超敏反应F a s 配体异硫氰酸荧光素人体白细胞抗原白细胞介素一 2白细胞介素一 4白细胞介素一 1
4、0主要组织相容性复合体混合淋巴细胞反应T 一 1 型辅助细胞V，卫;R护从CLWH;-LA2410犯及TCAllEA从MSTCMBCT，APIDCCTDALExDT:FasFITHLIL-:I-L-IL-呱呱ThlT 细胞疫苗诱导异品系大鼠同种异体肢体移植免疫耐受的实验研究Th e l P e r t yPe Z c e l lant i l y l l l P h o c yt e g l o b u l l nant i t h 刃 1 1 o c yt e g l o b u l i nC ycl o s p o ri n Am yCo P h e n o l a t e m o fet
5、i l助s t 一 v e r s u s 一 gra ftd i s e a s egr a ft 一 v e r s u s 一 h o s t d i s e a s eT 一 2 型辅助细胞抗淋巴细胞球蛋白抗胸腺细胞球蛋白环袍素 A霉酚酸酷宿主对抗移植物病移植物对抗宿主病DD Th2AL(AT(CsP咖HV.GV1哈尔滨医科大学博士学位论文中文摘要目的:1 、 探讨接 种T 细 胞疫苗 T c V) 大鼠 针对供体来源 抗原的 免疫反 应状态。2 、探讨T 细胞疫苗 (TC V) 诱导大鼠同种异体肢体移植嵌合耐受的作用。方法:1 、 制备受 者L ewi S 大鼠 针 对供者DA大鼠
6、的T cv， 应用T cv， 免疫正常L e w i S 大鼠共3 次，每周1 次。设TCv 组， TCv 未接种组在接种前及接种后sd进行混合淋巴细胞培养 ( M L R);接种后 7d进行淋巴细胞毒实验和迟发超敏反应(DT H ) 检测。 2 、 制备受者L ewi s 大鼠 针对供者D A 大鼠 的T C V ， 应用T CV，免疫正常Lew i s 大鼠共3 次，每周1 次。设T CV 组，CsA组，空白对照组于接种后7 d 进行 D A 大鼠针对 Lew i s 大鼠的同种异体肢体移植，术后第 sd进行混合淋巴细胞培养 ( M L R); ，在术后7d进行淋巴细胞毒检测，术后Zld
7、进行嵌合分析。结果:1 、 M LR结果显 示， L ewi S 大鼠 的 脾细胞反 应程度接种组显 著低于未接种组 ( P 肌肉骨软骨， 不同成分抗原性的差异决定了机体的排斥反应应远较脏器移植复杂。( 二)肢体移植的动物实验研究1961 年开始实验性肢体移植。起初的实验没有应用免疫抑制剂而是采用了克服组织不相容性的 方法。 L apch i ns k y等以 新生犬为动物模型与供体交换输血后， 经过1 一 2 年使供体犬成长到成熟阶段然后进行肢体移植， 其中一只成活7 年。随着免疫抑制剂在内脏器官移植的广泛应用， 一些学者也将免疫抑制剂应用到肢体 移 植的 研究中 ， 1 9 6 6 年G
8、ol d w yn62应 用琉陛 喋 吟 和6 一 琉 基漂 吟 作免 疫 抑制 剂成功进行了首例犬的同种异体肢体移植，未用免疫抑制剂的5 只犬， 于术后第6天即出现明显排斥，用免疫抑制剂的11只犬中的7 只，排斥反应延迟到18天。传纹的锐疫抑制剂毓啤镖吟、6 一 琉基嘿吟、强的松龙等虽然能使同种异体肢体移哈尔滨医科大学博士学位论文植存活时间 得以 延长， 但它们较大的副作用限 制了它们的 应用， 6 3 ) 因 此很多学者在寻找毒性较低且无致命不良 反应的免疫抑制剂。F urna s 等 r6 4 ，( 1 9 5 3 ) 和F 五 t z 6 5 ) 等 ( 1 9 8 4 ) 分 别报
9、道了 用环 抱素A ( c y c l o s p o ri n A ，CsA ) 作免疫抑制剂， 在小鼠 模型上进行同 种异体肢体移植， 所有组织均存活。 环抱素A的 发 现是一 个重大进步66)。 它是一 种强 有力的 免疫抑制 剂，csA较常规免疫抑制剂更有效且毒性小。它是由真菌产生的含有 H个氨基酸残基的环状肤.主要抑制包括I L 一 2 在内的 细胞因子和对To一 A g 的初次应答。 对亲环素有特别的亲和力。当环抱素 A与亲环素结合后，阻断其酶活性，因而抑制某些基因特别是I L 一 2 的转录，从而影响T细胞的克隆扩大、其他细胞因子的产生及B细胞的生长。 它的发现使得器官移植成为现
10、实，并很安全。 这就为同种异体肢体移植提供了新的机遇。 自u m an的观察表明C s A尚能逆转排斥反应。 他们给LBN 一 L E W大鼠 后 肢肢体移 植受鼠 肌 注c s A 8 m 留 (k 9 涟 )， 20d 后改为间 断 给 药每周2 次 有2 只鼠 分别于术后1 5 0d和 1 9ld 发生排斥反应。此时，连续肌注CsA 8 m 留 ( kg.d ) sd，然后恢复每周2 次间断给药， 使排斥反应完全逆转6 ， 。 P r es s 等报告了 腹腔应用环抱素A和泼尼松龙行成年鼠同种异体肢体移植，共26只鼠，结果表明不能使移植肢体长期存活， 失败的原因是感染和败血症， 但此时常
11、无排斥只有轻度排斥，这可能与环袍素 A剂量太大有关。减少剂量重复实验，肢体存活时间延长，但没能阻止皮肤排斥。 H e w itt68)等在L B N 一 LEw大鼠 后肢移植模型中分别给予不同剂量的CsA采用剂量曲 线判定结果。 他得出s m 眺洲 是这一模型的 最佳有效剂量。 很多学者认为69 0 川， 即使长期应用c s A治疗也难以 使宿主产生免疫耐受。 其肾 毒性和肝毒性作用均较严重， 而且最终发生移植物抗宿主病( G v E D ) 。同种异体肢体移植期待毒性更小、作用更强的免疫抑制剂的出现。F K5 06的出 现极大地提高了 肢体移植的水平72)。 F K5 06是从土壤中的“ 筑
12、链霉菌”培养物中分离出的免疫抑制剂。结构与环抱素 A不同，但免疫抑制作用的 机制基木相似， 而效力更强。 主要是抑制Th细胞释放 I L 一 2， IL 一 4 和IF N比 环抱素A 强1 00倍。既能抑制同种异型反应性T 细胞表达 I L 一 2 受体，还能抑制抗体的生成，并且有亲肝作用，能够促进肝细胞的再生与修复。目前， 很多动丁 细胞疫苗诱导异品系大鼠同种异体肢体移植免疫耐受的实验研究物实验研究均证实， F K 一 5 o 6极大地提高了肢体移植的存活率。 A ral 了3 ) 等报告了经过1 吐 天的F K 一 5 0 6 治疗， 剂量为l mg( k g d)， 可使移植肢体平均存
13、活 1 50天;K u r o ki等报道， 经过 14天的F K 一 5 06治疗， 剂量为0 . 64飞/( k g d)， 肢体存活率平均为3 5 . 6 % ;M l n 和J o n e s 等用 l m g /( k g d ) 的F K 一 5 0 6 治疗 1 4 天后， 皮肤排斥反应出现的时间平均为3 2 . 5 天， 用Z ln g /( k g d)的F K 一 5 06治疗 14天后， 皮肤排斥反应出现的时间平均为40 天和 1 80 天。F K 一 5 06 的应用给同种异体肢体移植带来希望。 随后很多学者孤7 1】 3 了4 对F K 一 5 06的免疫抑制作用进行
14、了 研究， 他们认为. F K 一 5 06的免疫抑制作用较C : A 明显强大。 它能够阻止免疫排斥反应的发生，且有一只动物在停药2 55d 后仍存活，一般健康状况良好。据此推断，免疫耐受业己产生。Fealy 认为， 在免疫排斥发生后3d 内口 服F K 一 5 06， 可以逆转免疫排斥反应的发生， 而且逆转所需的时间与开始治疗的时间相关 如: 免疫排斥反应发生后第 3天给药，需 2 6d;排斥反应发生的当天给药，则需 1 0d 即可逆转) 。在大鼠同种异体肢体移植实验中短期应用 F K 一 5 06， 受鼠移植肢体长期存活， 显示出F K 一 5 0 6 显著优于CsA的免疫抑制作用。但在
15、内脏器官移植中， 应用F K 一 5 06治疗组中胰岛素依赖型糖尿病的发病率显著高于C sA治疗组， 在同种异体肢体移植中 应用 F K 一 5 06 产生的副作用， 以 及移植物长期存活后如何对待慢性移植物抗宿主病等问题， 还有待于继续研究。目 前， 随着各种免疫抑制剂的发展及对其作用机制的进一步认识， 使得肢体移植后的 存活率有望再提高。 w alter 翻等将脱氧精肌素 D s g ) 应用在 D A 一 L E w大鼠后肢移植动物模型中， 腹膜内注射组较未用药组平均存活时间显著延长。有报道称 F K S O 6 与脱氧精肌素( D s g ) 有协同作用。 然而，该药对受鼠外周血细胞的
16、抑制作用不容忽视。K eii chj 等报道的在大鼠肢体移植模型中， 应用F T Y 一 7 20 ，认为单用F T 丫 一 7 20其延长移植物存活时间与剂量有关， 但其效果不如F K 一 5 O 6 ， C sA和D s g 76 。 有的 学者认为孤 衍 创 ， 在延长同 种异体移植肢体的 存活时间 方面 FTY 7 2 0只能作为辅助性药物。 另外， H e l d e r 了吸9 9 4 年报道了 用R S 一 6 1 4 4 3 作为免疫抑制剂的 研究， 认为R S 一 6 1 4 4 3 在逆转急性免疫排斥反应方面是非常有效。 另外的研究显示80 日 R s 一 6 1 4 4 3 在治 疗对。 K T3或类固 醇激素无反应的 难治 性的肾 移 植和 肝移哈尔滨医科大学博士学位论文植的免疫排斥反应方面非常有效。P r o s p e r在大鼠后肢移植模型中， 持续皮下注射R S 一 6 1 1 4 3 ，在术后3 2 周内， 该组6 只受鼠中仅有一只的移植肢体
