《不同浓度5aza诱导兔骨髓干细胞后cTnI的表达》由会员分享，可在线阅读，更多相关《不同浓度5aza诱导兔骨髓干细胞后cTnI的表达（36页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、不同诱导兔骨艘千细胞后 T n l 的表达中文摘要浓度5- a Z a目 的 :探讨5 一 氮胞昔( 5 一 az a)浓度对骨髓基质干细胞( MsC s)向 心肌细胞转化的影响。方法: 利用密度梯度离心法和贴壁培养法分离兔 盛cs; 用 5 一 aza对 MScs进行体外诱导转化， 并使用心肌 特异性抗体肌钙蛋白1 对诱导后的MSCs进行免疫组化染色。结果 :分离 培养后的M S C s 生长密集， 形态呈梭形， 在 3 林 m 0 1 /L， 5 四01/L 和10四01/L 5 一 a 跪 的诱导下分化成类心肌细胞， 免疫组化染色心肌特异性抗体( 肌钙蛋白 1)阳性。结论 :5 一 az
2、 a是 促进干细胞向 心肌细胞 转化的 有效诱导剂， 以 1 0 卿01/L 的5 一 a z a 对MScs向心肌细胞转 化的影响最大。羊键词: 体外诱导: 骨髓千细胞; 5 一 氮胞昔哈 尔 滨 医 赳 大 到醚全燮丝二一一一一一一一E x p erim ental stUdi es ofo f s 一 a z a c o n c e nir at i o no no fb o n es t e m c e l l sandt h eo fthetrP o ni n lo bj e c ti v e : T o e x p l o r et h ei n f l u e n c e so
3、fs 一 a Z aC o n c e n t r a t i o no nt h et r a n s f o r mat i o no fb o n e口 a r r o w mes e n c h y ma1s t e mc e 1 1 si n t oc ard i o 畔o c y t e sMe t h o d :T h e b o n em a r r 洲 waso b t a i n e df r o mt h ef e muro ft h e r abb i t u n d e rt h ea s e p t i cc o n d i t i o n ， 帕ss e p a
4、r a t e db yP e r c o 1 lg r a d i e n tc e n t r i f u g a t i o nmet h o d ， a n dw a sc u l t u r e dw i t hs 一 a 么 ai nd i f f e r e n tc o n c e n t r a t i o n . I n d u c e dM S C sw e r el ” 切 l u n o h i s t o c h 朗i c a l l ys t a i n e dforc a r d i a c 一 s P e c i f i ca n t i b o d y .R
5、e sult:T h e s e切 S C sw e r ec u 1 t u r e d i nv i t r o a n dw e r e s p i n d l e 一 s h 即e d叩p e a r anc e . T h ec e l l s c u l t u r e d w i t h ( 3 林 肋1 / L ， 5 协 阴1 / La n d1 0 协 m o l / L ) 5 一 a z as h o w e dl i k e 一 m y o c ard i a la P P e a r a n c e. I tw a ss t r o n gP o s i t i v
6、 ef o rt r P o n i nlC o n c ins ion :5 一 a 么 a i s an a c t i v e d e r i v a t i v e f o r t h et r ans f o r mat i o n o f b o n em ar r l Wb e t t e rm e s e n c h y m a lt h a n3 林 m o l / Ls t e mc e l l si n t o c ard i o 叮o c y t e s . 1 0 p m l 1 / LS 一 a z a i sands “ m o l / LS 一 a z af o
7、 rt h et r a n s f o r m a t i o n Ke尹v o r ds: E x t r a c o r p o r e a l i n d u c t i o n ;B o n e m ar r o w m e s e n c h y mal s t e m c e l l s ;5 一 S Z a不同浓度5 . .诱导兔骨艘干细胞后 T ll l 的表达前言冠心病是威胁人类健康的最主要疾病之一。 由于成熟的心肌细胞缺乏再生能力， 心肌梗死( 甜1)发生后， 梗死区心 肌只能通过纤维组织增生， 由无收缩功能的疤痕组织代替。 为保持心脏的 泵血功能 ， 机体发生退行性左心
8、室重构， 心功能下降，最终会导致心力衰竭。 现行的治疗方法只能通过缩小AM工 的范围、恢复缺血的存活心 肌的 血液供应、 延 缓左室重构， 以改善患 者的预后， 而不能从 根本上 修复 坏死的心 肌组织， 彻底恢复心 脏的正常收缩功能。 细 胞疗法( C ell T h er aPy ) 近年 来已 成为治疗多 种疾病的新策略， 其目 的 是代替、 修复或加强受损组 织或器官的生物 学功能。 细胞疗法中应用最多的靶细胞是各种干细胞。 干细胞移植与心血管疾病的研究己是近年来研究的一大热点。骨髓间质干细胞( m e s e n c h y mal s t e m c e l l s ， M s C
9、 s ) 1， 1 是一种多能成体干细胞，易 贴壁生长， 扩增能力强， 且勿需昂 贵的 细胞因子支持。 现知它可分化为 心肌细胞但诱导因素和分化效率各家报道不一。 5 一 aza 是胞昔类似物， 具脱甲基效 应， 是现在已 知的唯一有诱导千细 胞向心 肌分化的 物质。 肌钙蛋白I( c T l 1 D 存在于 骨骼肌、心肌 细胞中 ， 而平滑肌细胞中不含肌钙蛋白 1 。 我们拟研究 不同 浓度的 5 一 氮胞 昔(5 一 a z a)诱导的M S C s 表达心肌特异性肌钙蛋白 1 的水平。哈尔滨医科大学硕士学位论文文献综述千 细胞(s tem ce ll) 是21 世纪人们研究的 重点 之一
10、， 尤其是近一两年干细胞在冠心 病特别是 心肌梗死方面的研究引起了人们的极大关 注， 人们渴望用千细胞来挽 救 梗 死的 心 肌， 这 将对 冠 心 病 位 。 r o n ar y arte rydi se as e ， C A D ) 尤 其 是急 性 心 肌 梗死( 朗 以 e m y o c a r d i aiin-云 灯 c t 1 0 n ， A 卜 11 ) 的治疗是一个重大的突破.一干细胞移植( 一) 千细胞的基本概念千细胞是一种具有多分化潜能和 自我复制功能的早期未分化细胞， 在特定条件下， 它可以 分化成不同的功能细胞，形 成多种组织和器官。包括全能 干细胞( 肠石 p
11、o t e n t st em ce n X 如受精卵细胞等) 、 多能 千细 胞(P luriP O t e n t s t e mce ll) ( 如胚胎干细胞等 ) 和专能 干细胞( Mu l t i p o t e n t s 忱 n 、 ceu ) ( 如骨 髓干细胞、神经干细胞，骨髓间 质 干 细 胞 、 肌肉 干 细 胞、 成 骨 千 细 胞 等 ) 阳 1 。千细胞的基本特征有:(l) 具 有自 我更新与自 我 维持的能力，即 可以 分裂， 分裂后的 子细胞与母细胞一样不但保持原 有的细 胞生物学特性， 而且还可不断 地分裂下去 ; ( 2) 具有多向分化的潜势，即 可发育为各
12、种胚层组织的细胞( 胚胎干细胞) ，或 分 化 为 本 系 统各 谱系 的 细 胞 (特定 组 织 千 细 胞， 如 造 血 干 细 胞 ); ( 3) 干 细 胞 的 分 裂能 力可维持相当长的时间， 有的可维持终生，如 肠粘膜千细胞等;(4) 既具有生理性的更新能力， 也 具有对损伤或疾病导致的反 应与 修复能 力， 如皮肤间 质千细胞等 ;(5) 干细 胞的自 我 更新与分化需要特定的 微环境 (h i t c b e s ) 。干细胞技术治 疗疾病有两方 面: 一是定向诱导，即把胚胎干细胞( e ln b ry o ll lcs t e l n ce ll)转 化成特定的功能细胞; 二
13、 是横向 分化(tr 即5 d i fl 七 r e ntiation) ， 即把一种组织的成 体千细胞转化成另一种组织的功能细 胞。 尤其是后者为干细胞生物工程在临床治疗中的 广泛应用奠定了 基础。( 二)千细胞的调控(l ) 内 源性 调控: 包括干细胞内的一些结构蛋白 和多 肤因子对干细胞不 对称分裂的调控; 转录因子对干细胞分化的调节; 端粒体 (t el o mere ) 的长度对干细胞的增一 一一- 一 一一一 止 迥 鲤 丝竺 燮 达 塑 红 鲤 鳗 卫 竺 擎竺 一 - 殖 和 分 化的 影 响。 (2 ) 外 源 性 调 控:分泌 因 子 (转 化生 长因 子T GF 和w
14、n t 家 族 ) 对 千细胞增 殖和分 化的 调节; 膜蛋白 介导的 细胞间 相互作用困以 叼 h ) ; 细胞外基质 ( 整合素家族 恤e ghn) 对千细胞的调控(3)干细胞的可塑性: 横 向分化0 拍 p s . d i ffere ntiation) ， 千细胞的 分化与 微环境密 切相关。( 三)千细胞分类 1 . 胚胎干细胞 胚胎干细胞是指来源于胚胎组织的具有多 分化潜能的细胞。 胚 胎千细胞具有多分化潜能可分化为多种细胞， 从而构成机体的不同器官与组织2 .成年干细胞成年干细胞( a d u l t s t e m c e ll) 是指存在于成年动物或人体内 的千细胞。 传统的
15、 观点认为， 成年千细胞分化潜能有限 ， 仅起祖细胞的作用， 如骨髓造血干细胞只能向各种 血细胞定向 分化。目 前， 大量的 研究认为， 成年干 细胞具 有广阔的分化 潜能， 在一定的 环境中 及适当的因素作用下， 可分化为多 种细胞， 成年千细胞存在于人和动物的多 种组 织中 14 。(l ) 骨髓来源的干细胞 骨髓造血千细胞骨髓造血干细胞中存在一种亚单位， 称为 SP 细胞(s i d e 训州ationcell)，它表达c D 34一 ， 具有多 分化潜能 5.7。 骨 髓单个核细胞 骨髓单个核细胞是指骨髓中细 胞核形 态为单个细胞的总 称，包 括造血千细胞， 成纤 维细胞，成骨细胞，血
16、管内皮细胞 前体细胞等8 :9骨髓间 质千细胞诸多研究认为， 骨髓干细胞也有多分化潜能， 可分化为骨细胞 ， 软 骨 细 胞， 脂 肪 细 胞 与 肌肉 细 胞 等 【10 . M ak in o 等 11 】首 次 发 现 ， 小 鼠 的 骨 髓千 细 胞 在 体 外 经5- 氮 胞 昔 诱 导后 ，可分 化为 心 肌 细 胞。 也 有 研 究证 实 【 12 人 的 骨髓干细胞在体外可被诱导分化为 骨细胞， 软骨细胞。 人的 骨髓间质千细胞在合适的 条件也有可能被诱导成心肌细胞l3 】 。 骨髓成 血管细胞 骨髓中存在一种成血管细胞， 它具有胚胎成血管细胞的某些特征， 表 达C D 3 4+是血管内皮细胞的前体细胞l4l。(2 ) 肝脏来源的千细胞扒 5 。(3 ) 血管来源的 干细胞l6 。_一竺丝些塑叁鲤全丝鱼匕一一一一一 (4)骨骼肌来源的干细胞 骨骼肌受到 损伤后能自 身修复， 这归因 于骨骼肌中 存在的成肌细胞， 又 称卫星细胞， 它可分化形成新的骨骼肌细胞.， 目 前认为成肌细胞也具有千细胞的功能，
