凋亡在梗阻性黄疸心肌损伤的作用及基因表达

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1、盂宪民基金会首届学术讨论会暨第十二届全国普外基础与帖床进展学术大会普外进展论坛凋亡在梗阻性黄疸心肌损伤的作用及基因表达口,大连医科大学一院普外二科巩鹏孙林谭广王忠裕本项研究应用流式细胞仪、电镜等技术检测梗黄大鼠心肌细胞凋亡,并通过免疫组织化学方法检测F a s F a s L 、T N e a 、B c l - 2 的表达,探索梗黄心肌损伤的发生机制。假手术对照组( s h a m - o p e r a t e d ,S O 组) 1 6 只,胆道梗阻6 天组( b i l e d u c t E g a t e d ,B D L l组) 、胆道梗阻1 2 天组( B D L 2 组) 、胆

2、道梗阻后黄芪治疗6 天组( a s l r a g a l u sm e m b e r a n a c e u s ,A M l 组) 、胆道梗阻后黄芪治疗1 2 天组( A M 2 组) ,每组8 只。梗黄大鼠心肌病理学胆道梗阻组( B D L ) 同假手术对照组( s h a m - o p e r a t e d ,S O 组) 相比,梗阻6 天后出现心肌纤维稀疏,部分变细,淡化、肌膜游离,心肌细胞浊肿,白细胞浸润;结扎1 2 天时,细胞凋亡增加,心肌细胞浊肿加重,问质血管扩张,有少许心内膜下心肌发生出血、坏死。A M 组较同时相的B D L 组白细胞浸润少,但可见细胞凋亡,同时细胞浊

3、肿轻微,未见有心肌细胞出血及坏死。透射电镜S O 组心肌细胞形态正常,细胞浆内细胞器正常,染色质均匀疏松,心肌肌节长度均一,z 、M 线明显。6 天B D L 组可见细胞固缩,染色质浓缩、裂解,胞浆内“小泡”,但未见“凋亡小体”。胆道梗阻后黄芪治疗组( A M 组) 病变较同时相B D L 组轻微,1 2 天时仅有线粒体减少及线粒体肿胀。细胞凋亡检测结果S O 组6 天、1 2 天H o e c h s t3 3 3 4 2 荧光染色后心肌细胞表现为弥散、均匀的荧光。B D L 组6 天始,H o e c h s t3 3 3 4 2 染色的心肌细胞可见新月型或哑铃型等不规则形状的细胞核。随梗

4、阻时间延长,含不规则形状细胞核的凋亡细胞逐渐增多,且形态各异。A M 组6 天后亦开始出现细胞内新月型或哑铃型等不规则形状的细胞核。梗黄是一种全身性疾病,一发而动全身,胆道梗阻后,胆汁成分返流入血引发了机体多种继发性病理生理变化,随之而来的诸多继发损害,已超出“梗黄”二字的字面含义,心肌仅是其中受累的主要脏器之一。细胞凋亡是由特异性信号有序激活细胞内在固有的死亡机制所诱发的细胞主动死亡,最早期的形态学改变是核染色质固缩,集聚在核膜周边;然后胞浆浓缩、胞膜起泡;继而核裂一3 8 0 盂宪民基金会首届学术讨论会暨第十二届全国普外基础与临床进展学术大会普外进展论坛解成若干碎片,胞浆膜包裹细胞碎片形成

5、“凋亡小体”,该小体即被邻近细胞或吞噬细胞吞噬、消化。本研究综合应用各种方法,证实梗黄大鼠存在心肌细胞凋亡,且随着梗阻时间的延长而凋亡增加。梗黄大鼠心肌损害及心脏功能受损亦随梗阻时间延长而加重,细胞凋亡与其正相关,由此可以推测:梗黄大鼠心肌细胞凋亡可能是梗黄心脏功能损害发生发展的重要机制之一。过程可能如下:胆道梗阻后,各种致病因素作用下使得凋亡调控基因进行表达,而心肌细胞出现凋亡,随着凋亡调控基因的进一步表达,使得心肌细胞凋亡增加,有功能的心肌细胞进一步减少,心脏功能进一步受损。F a s F a s L 系统在梗黄过程中表达上调,导致心肌细胞凋亡,进而造成梗黄心肌受损。梗黄6 天B c l

6、- 2 高表达、抑制凋亡,将是纤维增生的重要机制。T N F a参与了梗黄心肌细胞凋亡的过程,通过多种途径作用于心肌细胞,使梗黄心肌受损。黄芪能够通过多种途径减轻梗黄心肌的损害。主要为:降低梗黄心肌组织内M D A 生成,使S O D 含量增加对抗氧自由基的损害。使梗黄血浆中E T 含量明显降低,对抗E T对心肌的损害。有效降低血浆中T N F a 的含量,对抗T N F a 通过氧自由基损害心肌。本实验结果显示,A M 组大鼠心肌比同时相B D L 组大鼠凋亡轻微。说明黄芪除具有抗氧化作用外,可能通过免疫调节,下调F a s F a s L 、T N F a 的表达,对梗黄引发的心肌凋亡起到抑制作用,从而保护梗黄心肌,减轻损害。胆囊切除术后副损伤原因防治体会D 吉林省吉林市中西医结合医院普泌外科龚日章张天威董锋随着人民生活水平提高,疾病谱的变化,胆囊疾病病人逐年增多,胆囊疾病为普外常见病、多发病,近几年已开展微创腹腔镜胆囊切除,但适应症有一定限制,传统胆囊切除术仍为常规手术。胆囊切除术成为常规手术,一般不困难,每个外科医生都能掌握,但因个体差异解剖变异,炎症粘连,麻醉不佳,切口选择不当,医生不重视,造成医源性损伤,时有存在,应引起重视。一3 8 l 一

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