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1、 分光光度法测定青果多酚的含量分光光度法测定青果多酚的含量摘要：以没食子酸为标准品，使用酚试剂，采用分光光度法对青果（ ）多酚的含量进行检测。结果表明，酚试剂用量为 ，与 质量分数的溶液混合， 反应 ，于 处测定吸光度，没食子酸浓度在 范围内与吸光度有良好的线性关系，回归方程为y x 0。该方法能较准确地定量分析青果多酚含量，具有简便、快速、稳定，重现性好的优点。关键词：分光光度法；酚试剂；青果（ ） ；多酚 p ， ， （ ； ， ， ，）： in c g as standard that detection mixing （） ， reacting in which y x 0 ， ， i
2、n c ： ； ； c； 青果（ ）别名橄榄，为橄榄科植物橄榄的果实，青果具有抗菌 、抗病毒 、抗肿瘤和抗氧化作用 ，有较高的药用价值。青果化学成分包括挥发性成分、三萜类化合物、香豆精、多酚、蛋白质和氨基酸、脂肪和脂肪酸、矿物质、微量元素等多种成分。其中，多酚为青果中的重要化合物，是其主要功效成分。泸州合江是四川省青果生产基地，具有丰富的种质资源，开发青果的药用价值对继承和发展我国传统医学以及带动和促进当地青果的产业化发展具有重要意义。本研究应用福林酚比色法对青果多酚进行定量分析，为进一步筛选青果品种，综合开发其药用价值提供参考。 材料与方法 材料与仪器材料：青果（购自泸州宝光医药有限公司，选
3、择优质果实洗净，风干，粉碎） 。分析纯试剂：乙醇、碳酸钠、没食子酸标准品（批号，纯度，中国食品药品检定所） ；化学纯试剂：酚试剂。仪器：超声粉碎仪（宁波新芝生物科技股份有限公司） ；电子天平（梅特勒托利多仪器有限公司） ；型紫外可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司） ；恒温水浴锅（天津泰斯特仪器有限公司） 。2 方法准确称取 没食子酸标准品，定容于 容量瓶中，配制成 标准液，取 标准液定容至 ，得 工作液。准确称取青果果实粉 ，溶于 的乙醇（体积分数）中，超声 后，取提取液抽滤，即为样品液，采用分光光度法对青果多酚的含量进行检测 。 结果与分析 测定波长的选择分别取没食子酸标准溶液和青果样品液
4、在 范围内扫描，两者在 处均有最大吸收峰，故选择 为测定波长。 试剂用量的确定酚试剂与的（质量分数，下同）溶液比例的确定：取 没食子酸标准溶液，加入 酚试剂，混匀后分别加入、和 10% 溶液，定容至 ， 水浴反应显色后，于 处测定吸光度。结果表明，当 10% 溶液加入量为 时，体系显色反应较为完全，故确定酚试剂与 溶液的体积比为。酚试剂用量的确定：取 没食子酸标准溶液，分别加入、和 酚试剂，混匀后加入酚试剂倍体积的 溶液，定容至 ， 水浴反应显色后，测定 处吸光度。结果表明，当酚试剂加入量大于 后吸光度达到最大，并趋于稳定，所以确定酚试剂用量为 。 稳定性检测酚比色法的稳定性结果见表。由表可知
5、，在反应前期吸光度随时间增加而上升， 内吸光度变化较为平缓，表明反应完全，在此阶段稳定性好，从提高效率的角度考虑选择反应时间为 。 精密度试验取份青果样品液各 ，按照上述方法加样，反复测定次，结果见表。结果表明该方法具有较高的精密度，能满足样品分析的要求。 标准曲线的制作取支 具塞试管，分别加入、和 的标准溶液， 酚试剂和 溶液，30 水溶 60 min 后测定 od765 nm。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为：y x， （图） ，表明没食子酸浓度在 范围内与 od765 nm呈现良好的线性关系，方程可用于青果多酚的定量测定。 重现性试验检测份同一青果样品液中多酚的含
6、量，结果见表。结果表明在该条件下青果多酚的平均含量为，重现性符合要求。 回收试验将已知含量的青果样品液份， 份，分组，各精确加入没食子酸，和 ，按照上述方法测吸光度，取平均吸光度计算多酚含量。按照下列公式计算回收率：回收率（总多酚含量原样液多酚含量）加标量其回收率在之间，平均回收率为，为（表） 。结果表明该方法准确可靠，可用于青果多酚的定量分析。 小结目前多酚含量的测定方法主要有高锰酸钾法、比色法、色谱法等。其中高锰酸钾法简便易行，但被测液中的还原性物质一般均能被氧化，选择性不高；色谱法测定速度快、灵敏度高，但需要进行繁杂的衍生前处理，且分析成本高。相比较而言，分光光度比色法测定总多酚含量简便
7、、快速 。青果为药食兼用型水果，多酚是青果的重要药效成分，主要集中在果肉中，与青果的苦涩味和药理作用密切相关 。本试验采用福林酚比色法测定青果中的多酚含量，其最佳条件为：酚试剂 、 2 、在 下反应 ，测定波长为 。该方法操作简便、稳定、重现性好、结果准确可靠。参考文献： 王 瑶，惠 曦，田 吉 橄榄多酚对口腔致病菌的体外抑菌实验研究 泸州医学院学报，1（）： 杨 洁，孙 魏，杨旭锐，等 青果抗人免疫缺陷病毒活性部位的筛选研究 中国药房，（）： ， ， ， f e i p i a h c c c ， ，（）： ， ， ， s e v o e p o l e ， ，（）： ， ， ， p e o o p（，） c r o mi c ， ，（）： 潘文洁，李敬华，王建通 大山村野茶茶多酚提取工艺研究 安徽农业科学，（）：， 何志勇，夏文水 橄榄果实中酚类化合物的分析研究 安徽农业科学，（）： 周志娥，熊建华，闵嗣璠，等 南瓜花黄酮超声波辅助提取工艺的研究 湖北农业科学，（）： 何志勇，夏文水 比色法测定橄榄中多酚含量的研究 林产化学与工业，（）： 张国友，唐 玲，陈 玮，等 分光光度法测定蒙古栎叶中多酚的含量 中国科学院研究生院学报，（）： 罗杨合 法测定马蹄皮中多酚的含量 湖北农业科学，（）：
