水稻脱水蛋白启动子重组载体构建

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1、诚 信 声 明本人郑重声明:所呈交的本科毕业论文是本人在指导老师的指导下,进行研究工作所取得的成果,成果不存在知识产权争议。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体在文中均作了明确的说明并表示了谢意。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。毕业论文作者签名: 金明2011 年 11月 26 日目目 录录缩写表.1摘要.2关键词.21 前言.21.1 非生物逆境对植物尤其是水稻等经济作物的影响.21.2 植物抗逆性的研究方法.31.3 启动子在植物抗逆性研究方面的理论和应用进展.31.4 脱水蛋白家族在植物抗逆性方

2、面的研究进展.51.5 研究意义.52 材料与方法.62.1 材料.62.1.1 实验植物、菌株和质粒.62.1.2 主要试剂.62.2 主要仪器.72.3 实验方法.72.3.1 启动子 RAB 16D 的生物信息学分析.72.3.2 CTAB 法提取水稻材料基因组.72.3.3 目的片段 PCR .82.3.4 PCR 产物和 pMD19-T 载体的连接.82.3.5 大肠杆菌的热激转化及扩大培养.92.3.6 菌落 PCR 检测 .92.3.7 Dehydrin 基因启动子表达载体的构建.92.3.8 大肠杆菌转化.102.3.9 农杆菌冻融法转化、检测和菌种保存.102.4 农杆菌溶液

3、的制备及侵染烟草叶盘.112.4.1 GUS 活性检测.113 结果与分析.113.1 启动子区的调控元件分析.113.2 启动子片段的克隆、酶切和农杆菌检测图.133.3 相关载体物理图谱.153.4 GUS 活性染色结果.134 讨论.164.1 启动子相关元件.164.2 载体及其酶切位点的选择.164.3 GUS 染色.165 结论.17参考文献.17致谢.20附录.211缩写表(缩写表(Abbreviation)缩写词英文名中文名ABAAbscisci acid脱落酸AmpAmpicillin Sodium salt氨苄青霉素bpBase pair碱基对CTABCetyltrimet

4、hyl Ammonium Bromide溴代十六烷基三甲胺ddH2ODouble Distilled Water双蒸馏水DNADeoxyribonucleic脱氧核糖核酸dNTPDeoxyribonucleotide triphosphates脱氧腺苷三磷酸EBEthidium Bromide溴化乙锭EDTADisodium ethylenediamine tetraacete乙二胺四乙酸钠盐GUS- glucuronidase-葡萄醛酸糖苷酶hhour小时KanKanamycin sulfate卡那霉素LBLuria-Bertani Medium细菌培养基mgmilligram毫克minminute分钟mLmillilitre毫升mmolmillimole毫摩尔MSMurashige-Skoog mediumMS 培养基PCRPolymerase chain rea

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