《毛细管区带电泳测定生物碱的解离常数》由会员分享，可在线阅读，更多相关《毛细管区带电泳测定生物碱的解离常数（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、毛细管区带电泳测定生物碱的解离常数贡素萱1 枣车宝泉2 苏晓丹1 薄涛1 李克安1 刘虎威1( 1 北京大学化学与分子工程学院，北京1 0 0 8 7 12 北京市药品检定所，北京1 0 0 0 3 5 )前言生物碱是中草药主要药效成分之一，其解离常数与化学反应速率，分离机制等有着密切 的关系，尤其是在新药的开发中有着重要的作用，因为很多药物通过细胞及穿过其它细胞膜 的过程与内环境、药物的物理化学性质及其p K a 值存在相关关系 4 ，5 。毛细管区带电泳法 ( C Z E ) 已经被广泛应用于测定酸性化合物的离解常数。建立一种常规的方法来测定弱酸或弱碱的p K a 值，并将其做成数据库，对
2、以后药物开发和分析将会起到一定的指导作用。根据实 验室现有的生物碱，我们对苦参及白刺花中的五种生物碱( 苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、 、氧化槐果碱和槐定碱) 及唐松草中的五种生物碱( 小檗胺、粉防己碱、t h a l i f a r e t i n e 、t h a l i f a r i c i n e 、n o r t h a l f i n e ) 进行了解离常数p K a 的测定。图1 给出了十种生物碱的结构式。 罄露罄宰宰m a t r i n es o p h o c a r p i n es o p h o r i d i n eo x y m a t r i n eo x y
3、s o p h o c a r p i n e( a ) T h es t r u c t u r e so ff i v ea l k a l o i d si nS o p h o r a 锣_ 锣_ 曾B e r b a m i n e( + ) T e t r a n d r i n eT h a l i f a r e t i n eT h a l i f a r i c i n eN o r t h a l f i n e图1 十种生物碱的结构式1 原理以= 熹精心其中肛为完全去质子化物质的电泳淌度，肚为有效淌度，局为解离常数【8 】。根据公式，由实验所得的数据，可以得到m 一 H
4、 + 的非线性关系曲线，然后用相关软件拟合并计算得到相应化合物的p K a 值。6 52 仪器与试剂A g i l e n t C E 毛细管电泳仪，D A D 检测器。熔融石英毛细管柱4 8 5c mX 5 0 岬1 ，有效长度 为4 0C f f l ( 河北永年光导纤维厂) 。进样条件：5 0m b a r X 5S ：分析电压：3 0k V ；检测波长：2 1 0n m 。毛细管温度：2 5 。C 。背景缓冲液为离子强度为0 0 3 的不同缓冲体系【1 3 】：醋酸一醋酸钠( p H 4 0 - 5 5 ) ，磷酸二氢钠一磷酸氢二钠( p H6 0 1 0 O ) 。本实验澳4 定的生
5、药苦参和白刺花中的五种生物碱m a t r i n e ( 苦参碱) 、s o p h o c a r p i n e ( 槐果碱) 、s o p h o r i d i n e ( 槐定碱) 、o x y m a t r i n e ( 氧化苦参碱) 、o x y s o p h o c a r p i n e ( 氧化槐果碱) 标准品由北京中医药大学提供；小檗胺( B e r b a m i n e ) 、粉防己碱( ( + ) - - T e t r a n d r i n e ) 、T h a li f a r e t i n e 、T h a li f a r i c i n e 和
6、N o r t h a l f i n e 标准品均由中国医学科学院药用植物研究所提供。其余试剂均为分析纯。3 实验结果和讨论采用上述方法所测得的十种生物碱的解离常数见表1 。同时我们还考察了不同浓度甲醇对生物碱解离常数的影响，随着甲醇浓度增加，T h a l i f a r i c i n e 的解离常数逐渐增大，见表2 。裹1生物碱的解离常数( p K a )参考文献：【t 】H a n a iT ，K o i z u m i lK ，K i n o s h i t aT ，R A r o m ，JC h r o m a t o g rA1 9 9 7 ，7 6 2 ：5 5 【2 】I
7、s h i h a m aY ，O d aY ，A s a k a w aN ，J P h a m l S c i1 9 9 4 ，8 3 ：15 0 0【3 】M e r c i e rJ P ，M o r i nP h ，D r e u xM ，T a m b u t eA ，C h r o m a t o g r a p h i a1 9 9 8 ，4 8 ：5 2 9 【4 】C l e v e l a n dJ A ，B e n k oM H ，G l u c kS J ，W a l b r o e h lY M ，J C h r o m a t o g r A1 9 9 3 ，6 5 2 ：3 0 1
