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1、KKME-专业医学搜索引擎 http:/ 5ml(婴幼儿 12ml)，立即注入培养基中(约 50ml)，轻摇混匀。骨髓采集应在严格消毒后抽取骨髓 12ml。对已用药的病人，可使血培养基为 120 或更高;亚急性感染性心内膜炎及布鲁杆菌病，要多次采血和增加采血量，并主张此种病人应从肘动脉或股动脉采血。(2)培养方法：分为一般细菌培养、真菌培养、厌氧菌培养、L-型细菌培养。(3)常见致病菌：血液及骨髓中常见的致病菌有如下几种。1)革兰阳性菌：金黄色葡萄球菌-表皮葡萄球菌-A 群和 B 群链球菌-草绿色链球菌-肺炎链球菌-肠球菌-厌氧链球菌-产气荚膜梭菌-产单核李斯特菌-丙酸杆菌-念珠菌。2)革兰阴
2、性菌：脑膜炎奈瑟菌-卡他布兰汉菌-伤寒及副伤寒沙门菌-大肠艾细菌-肺炎克雷伯菌-沙雷菌-铜绿假单胞菌-不动杆菌-流感嗜血杆菌-胎儿弯曲菌-拟杆菌-梭杆菌。(4)临床意义：KKME-专业医学搜索引擎 http:/ -溶血性链球菌，化脓性心包炎可由致病性葡萄球菌、-溶血性链球菌、肺炎链球菌引起，烧伤后败血症常由绿脓杆菌、致病性葡萄球菌引起。3)伤寒、副伤寒及布鲁病均可做血液及骨髓培养，且骨髓培养阳性率高。疖、痈和脓肿继发的败血症，主要是金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌所致;血液病、肝硬化患者易并发败血症，以金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌最常见;弥漫性血管内凝血以革兰阴性菌败血症多见;对酷似败血症而血液培
3、养多次阴性者应注意 L-型细菌、真菌以及病毒感染的可能性。4)对不常见的所谓“污染菌”的鉴别也应注意。因为任何一种机会致病菌均可能成为败血症的病原菌。其鉴别可依据：培养结果 2 次以上为同一组菌。患者于检出细菌 23 周后，血液中相应抗体滴度上升，均可视为败血症病原体。2.尿液标本的细菌学检验：(1)标本采集：1)方法：尿液标本的采集一般有中段尿采集法、导尿法、肾盂尿采集法、膀胱穿刺尿采集法及留尿法 5 种。KKME-专业医学搜索引擎 http:/ 11000 高锰酸钾水溶液冲洗外阴部及尿道口;男性病人应翻转包皮，用肥皂水 11000 的苯扎溴铵冲洗或消毒尿道口，再用灭菌纱布擦干，让病人排尿，
4、弃去前段尿，收集中段尿 1020ml，盛于无菌容器内立即加盖送检。导尿法：采取导尿管导尿法，是一种较好的无菌采集法。取得 1015ml 尿液盛于无菌容器中送检。肾盂尿采集法：确定菌尿是否来自肾脏。可用导尿管采集肾盂尿，首先充分冲洗膀胱，以最后一次冲洗尿作对照，后用导尿管插入输尿管，分别标记左右侧，各收集三次尿;如果输尿管菌数比对照尿菌数多或第三次尿中菌数比第一次多，该菌尿可能来自肾脏;反之，如果第一次尿菌数多于第三次尿菌数，则可能来自膀胱。膀胱穿刺尿采集法：将病人耻骨上皮肤经碘酒、酒精消毒后，以无菌针筒作膀胱穿刺。此法主要用于尿液中厌氧菌的培养，故在取得尿液后，针头立即插于橡皮塞上送检。当儿童
5、或婴儿采集中段尿困难或培养结果与患者病情有矛盾时，可考虑用此法采集尿液。留尿法：尿液检查结核分枝杆菌时，可用一个洁净容器，留取 24 小时的尿液，取其沉淀部分盛于清洁瓶内送检。2)注意事项：为了避免在尿液标本的采集和培养中污染杂菌，故应严格进行无菌操作。尿液标本采集后要立即送检或存放于 4冰箱，因搁置时间KKME-专业医学搜索引擎 http:/ 则肯定为感染，105/ml 多为体外污染;介于二者之间则为可疑;对于免疫功能相当低下者，105/ml 亦应考虑为感染，还应结合病情分析。3)细菌培养：方法有：一般细菌培养;厌氧菌培养;淋病奈瑟菌培养;L 型细菌培养;结核分枝杆菌培养;霉菌培养。(3)尿
6、中常见致病菌：1)革兰阳性菌：金黄色葡萄球菌、肠球菌种、A 群链球菌、腐生葡萄球菌、表皮葡萄球菌、结核分枝杆菌。2)革兰阴性菌：淋病奈瑟菌，大肠埃希菌、变形杆菌种、肺炎克雷伯菌、沙门菌种、产气肠杆菌、铜绿假单胞菌、沙雷菌。(4)临床意义：KKME-专业医学搜索引擎 http:/ 23 周时检出伤寒、副伤寒杆菌对疾病有诊断价值。3)外尿道有许多正常菌群存在，易污染尿液。通常多次培养若是同一细菌，则可排除污染。此外，尿液标本应及时送检，如在室温下放置 2 小时，即使计数105/ml 亦可能为污染。总之，多种因素可影响病原菌数量，所以须结合临床，作具体分析，辨证评价。3.粪便标本的细菌学检验：(1)
7、标本采集：1)方法：粪便多采集自然排出之粪便，亦可用直肠拭子法采集。自然排便采集法：自然排便后，可挑取有脓血、黏液部分的粪便 23g。液体粪便取絮状物，盛于灭菌的广口瓶或蜡纸盒中，或置于保存液或增菌液中送检。直肠拭子法：如不易获得粪便时或排便困难的患者及幼儿，可采用直肠拭子法采便。其方法是将拭子前端用甘油湿润，然后插入肛门约 45cm(幼儿约 23cm)处，轻轻在直肠内旋转，擦取直肠表面黏液后取出，放入无菌试管或保存液中送检。2)注意事项：KKME-专业医学搜索引擎 http:/ 天)内采集标本，以提高检出率。标本最好在用药前采集。用于厌氧菌培养的标本，应尽量避免接触空气，最好立即培养。在不得
8、已时，可将粪便置于无菌容器内于 4保存，但不能超过 24 小时，不能采用低温冷冻(-20-80)保存。(2)细菌学检查：1)直接涂片镜检：霍乱弧菌涂片检查：a.染色镜检：分别用革兰染色和 110稀释的石炭酸复红染色，菌体为革兰阴性逗点状或香蕉样。b.湿片检查：霍乱弧菌呈穿梭鱼群样运动。c.制动试验：制动阳性。结核分枝杆菌涂片：粪便盐水悬液涂片，行萋尼抗酸染色，找抗酸杆菌。其他：革兰染色镜检，可检出呈葡萄状排列的球菌，革兰阳性粗大杆菌，一端多见卵圆芽孢似艰难梭菌，弯曲菌。除上述几种菌外，一般不做粪便涂片检查。2)细菌培养：有沙门志贺菌培养、霍乱弧菌培养、致病大肠埃希菌培养、副溶血弧菌培养、小肠结
9、肠炎耶尔森菌培养、空肠弯曲菌培养、葡萄球菌培养、厌氧菌培养、真菌培养，以及肠道菌群KKME-专业医学搜索引擎 http:/ 35ml，盛于无菌试管或小瓶中送检。2)注意事项：由于脑膜炎奈瑟菌离体后极易自溶，流感嗜血杆菌及肺炎链球菌也易死亡，故采集后必须立即送检。KKME-专业医学搜索引擎 http:/ 3000r/min 离心 510 分钟后，取沉淀涂片、染色、镜检。革兰染色：根据染色反应及细菌形态特征，常可初步提示感染细菌的种类。结核分枝杆菌涂片检查：抗酸染色：镜检找抗酸杆菌。结核性脑膜炎的脑脊液于冰箱中放置过夜，常出现有网膜样纤维蛋白，用接种环小心将此网膜取出涂片染色，找结核杆菌，其效果较
10、沉淀涂片为佳。金胺“O”染色：用荧光显微镜镜检。新型隐球菌涂片检查：墨汁染色后镜检。2)培养检查：一般细菌培养：主要适用于肺炎链球菌、链球菌、葡萄球菌、大肠埃希菌、产气肠杆菌、流感嗜血杆菌等的分离培养。脑膜炎奈瑟菌培养。KKME-专业医学搜索引擎 http:/ 群链球菌、A 群链球菌、肺炎链球菌、消化链球菌、炭疽芽孢杆菌、结核分枝杆菌、产单核细胞李斯特菌、新型隐球菌、白色念珠菌。2)革兰阴性菌：脑膜炎奈瑟菌、卡他布兰汉菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌科菌种、脑膜败血性黄杆菌、假单胞菌、无色杆菌、拟杆菌。(4)临床意义：1)正常人的脑脊液是无菌的，故在脑脊液中检出细菌(排除标本污染)，都应看做是致病菌。
11、2)由于引起脑膜炎的细菌种类不同，治疗、处理及预后均不相同。因此，必须经涂片或培养检查，以确定细菌的种别。3)脑脊液的细菌学检查对于细菌性脑膜炎的病原学诊断、浆液性脑膜炎或无菌性脑膜炎的鉴别诊断颇有价值，也有助于选用抗生素治疗及疗效判断。5.穿刺液标本的细菌学检验：穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液。(1)标本采集：KKME-专业医学搜索引擎 http:/ 12 天后进行。胸水及腹水可抽取510ml，心包液、关节液等抽取 25ml，将所得穿刺液盛于有抗凝剂的试管或小瓶中，充分混合后，立即送检。2)注意事项：标本的采集严格无菌操作，以防污染。标本与抗凝剂之比为 101，充分混合均匀。标本采集后立即送检。(2)细菌学检查：1)涂片检查：这
